Bunková línia BxPC-3
BxPC-3 je bunková línia rakoviny pankreasu odvodená od človeka. Má široké uplatnenie v štúdiách rakoviny. Výskumníci využívajú tieto bunky najmä na štúdium biológie rakoviny pankreasu, identifikáciu terapeutických cieľov a vývoj protirakovinových liekov.
Tento článok zahŕňa dôležité informácie o bunkovej línii BxPC-3, ktoré vám môžu významne pomôcť pri práci s ňou. Hlavne sa v ňom bude diskutovať o:
- Všeobecné informácie a pôvod bunkovej línie BxPC-3
- Kultivácia buniek BxPC-3
- Bunková línia BxPC-3: Výhody a obmedzenia
- Aplikácie buniek BxPC-3 vo výskume
- Výskumné publikácie o bunkách BxPC-3
- Zdroje pre bunkovú líniu BxPC-3: Protokoly, videá a ďalšie zdroje
1. všeobecné informácie a pôvod bunkovej línie BxPC-3
Znalosť pôvodu bunkovej línie je rozhodujúca pre jej použiteľnosť vo výskume. Znalosť jej vlastností vrátane morfológie, veľkosti buniek a ploidie uľahčuje a uľahčuje jej používanie. V tomto dokumente sa dozviete o pôvode a všeobecných vlastnostiach buniek BxPC-3: Čo sú bunky BxPC-3? Čo je to bunková línia BxPC-3? Aký je pôvod bunkovej línie BxPC-3? Aká je morfológia BxPC-3?
- Bunky BxPC-3, ľudský karcinóm pankreasu, boli odvodené od 61-ročnej Európanky s adenokarcinómom pankreasu v roku 1986. Tieto bunky boli potvrdené ako nádorové aj po tom, čo pacientka podstúpila niekoľko rádio- a chemoterapií. Vytvorená bunková línia je teda neoceniteľným modelom na štúdium vývoja a progresie rakoviny.
- Bunky BxPC-3 majú morfológiu podobnú epitelovým bunkám.
- Modálne číslo chromozómu pre BxPC-3 je 59. Tieto bunky majú homozygotnú deléciu na chromozóme 18q, ktorý kóduje proteín SMAD4/DPC4. Okrem toho v bunkovej línii chýba mutácia BxPC-3 kras, ktorá je bežná medzi nádormi pankreasu. V týchto bunkách karcinómu pankreasu sa nachádza aj delécia BxPC-3 braf.
Aký je rozdiel medzi BxPC3 a PANC-1?
Bunky BxPC-3 PADC (pankreatický duktálny adenokarcinóm) a PANC-1 sú primárne bunkové línie rakoviny pankreasu s epitelovou morfológiou. Prvé bunky pritom majú viac epiteliálnych vlastností, zatiaľ čo neskoršie vykazujú viac mezenchýmových atribútov [1].
2. kultivácia buniek BxPC-3
Bunková línia BxPC-3 sa široko používa v laboratóriách na výskum rakoviny. Na efektívnu kultiváciu tejto bunkovej línie rakoviny pankreasu je potrebné poznať nasledujúce kľúčové body. Naučíte sa: Aký je čas zdvojenia pre bxpc3? Ako kultivujete bunkovú líniu BxPC-3?
Kľúčové body pre kultiváciu buniek BxPC-3
|
Čas zdvojnásobenia populácie: |
Čas zdvojenia buniek BxPC-3 sa pohybuje v rozmedzí 48 až 60 hodín. |
|
Adherentné alebo v suspenzii: |
BxPC-3 je adherentná bunková línia. |
|
Pomer rozdelenia: |
Bunky BxPC-3 sa delia v pomere 1:2 až 1:4. Bunky sa premyjú 1 x PBS a inkubujú sa s pasážovacím roztokom nazývaným akutáza. Po 8 - 10 minútach sa k bunkám pridá čerstvé médium a bunky sa odstredia. Pelet sa opäť resuspenduje v médiu a bunky sa prelejú do novej kultivačnej nádoby na rast. |
|
Rastové médium: |
Na kultiváciu bunkovej línie BxPC-3 sa používa médium RPMI 1640. Je doplnené 10 % fetálnym hovädzím sérom, 2,1 mM stabilným glutamínom a 2,0 g/l NaHCO3 na dosiahnutie ideálneho rastu buniek. Médium by sa malo vymieňať 2 až 3-krát týždenne. |
|
Rastové podmienky: |
Bunkové kultúry BxPC-3 sa udržiavajú vo zvlhčenom inkubátore s teplotou 37 °C, ktorý je napojený na prívod 5 % CO2. |
|
Skladovanie: |
Zmrazené bunky sa zvyčajne skladujú pri teplote nižšej ako -150 °C alebo v parnej fáze tekutého dusíka, aby sa ochránila životaschopnosť buniek. |
|
Proces zmrazovania a médium: |
Na zmrazenie bunkových kultúr BxPC-3 sa môže použiť CM-1 alebo CM-ACF. Nasleduje pomalý proces zmrazovania, ktorý umožňuje pokles teploty len o 1 °C, aby sa zabránilo akémukoľvek šoku buniek. |
|
Proces rozmrazovania: |
Zmrazené bunky BxPC-3 sa rozmrazujú v prednastavenom vodnom kúpeli s teplotou 37 °C počas 40 až 60 sekúnd. Po tom, ako zostane malý ľadový chumáč, sa bunky doplnia čerstvým kultivačným médiom a odstredia sa, aby sa odstránili prvky zmrazovacieho média. Potom sa bunkový pelet resuspenduje a bunky sa dávkujú do banky na rast. |
|
Úroveň biologickej bezpečnosti: |
Bunkové kultúry BxPC-3 sa udržiavajú v laboratóriách s úrovňou biologickej bezpečnosti 1. |
3. bunková línia BxPC-3: Výhody a obmedzenia
BxPC-3 je dobre známa bunková línia adenokarcinómu pankreasu, ktorá má niekoľko výhod a obmedzení. Tu sú uvedené hlavné výhody a nevýhody tejto bunkovej línie.
Výhody
Hlavné výhody buniek BxPC-3 sú:
-
In vitro model rakoviny pankreasu
Bunky BxPC-3 získané z pacientov s adenokarcinómom pankreasu vykazujú relevantné vlastnosti, vďaka čomu sú vhodným modelom na štúdium správania sa rakoviny pankreasu in vitro.
-
Nádorová bunková línia
Bunky BxPC-3 majú tumorigénne vlastnosti a môžu vytvárať nádory po injekčnom podaní nahým alebo imunokompromitovaným myšiam. Tieto nádory sa veľmi podobajú primárnym nádorom adenokarcinómu pankreasu, vďaka čomu je xenogénny model BxPC-3 ideálny na štúdium rastu a progresie rakoviny.
Obmedzenia
Obmedzenia spojené s bunkovou líniou BxPC-3 sú:
-
Krížová kontaminácia
Bunková línia BxPC-3, rovnako ako každá iná, predstavuje riziko krížovej kontaminácie. Výskumníci by mali byť pri manipulácii s týmito bunkami opatrní a dodržiavať prísne protokoly na prevenciu kontaminácie.
-
Pomalá rýchlosť rastu
Bunky BxPC-3 vykazujú relatívne pomalú rýchlosť proliferácie s časom zdvojnásobenia od 48 do 60 hodín. Táto vlastnosť si môže vyžadovať dlhšie inkubačné obdobia pre špecifické experimenty, čo môže spôsobiť oneskorenie pokroku vo výskume.
4. použitie buniek BxPC-3 vo výskume
Bunky BxPC-3 majú mnoho možností využitia vo výskume rakoviny. Najčastejšie aplikácie sú:
- Výskum rakoviny pankreasu: BxPC-3 bunky imitujú adenokarcinóm pankreasu, a preto sa používajú na skúmanie genetických a molekulárnych mechanizmov, ktoré sú základom vývoja a rastu nádorov. Okrem toho výskumníci pomocou týchto buniek odhaľujú nové biomarkery a terapeutické ciele. Okrem toho bunky BxPC-3 významne exprimujú angiogénne faktory, t. j. interleukín-8 (IL-8), prostaglandín E2 (PGE2) a vaskulárny endotelový rastový faktor (VEGF), vďaka čomu sú vhodné na štúdium angiogenézy. V tomto prípade je angiogenéza kľúčovým procesom spojeným s rastom rakoviny a metastázovaním. V štúdii uverejnenej v roku 2022 sa skúmalo, že nadmerná expresia laminínu-5 gama-2 (LAMC2) v BxPC3 PDAC (duktálny adenokarcinóm pankreasu) zvyšuje jeho tumorigenézu prostredníctvom regulácie BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/ mTOR signálnej dráhy [2].
- Objavovanie a vývoj liekov: Bunková línia BxPC-3 slúži ako neoceniteľný model na testovanie protinádorových liekov. Výskumníci skúmajú cytotoxické, antimetastatické a apoptotické účinky potenciálnych liekov na BxPC3 PDAC. Štúdia, ktorú v roku 2020 uskutočnila Alexandria Turnerová a jej kolegovia, skúmala apoptotické vlastnosti extraktov z plodov Elaeocarpus reticulatus v bunkách rakoviny pankreasu BxPC-3 [3]. Podobne sa v roku 2020 uskutočnil výskum, ktorý určil protinádorový potenciál metanolového extraktu rastliny Oxialis obtriangulata v bunkách BxPC-3. Okrem toho vedci skúmali aj mechanistickú cestu buniek, prostredníctvom ktorej rastlinný extrakt vyvolával terapeutické účinky [4].
5.výskumné publikácie o bunkách BxPC-3
V tejto časti sú uvedené niektoré z najcitovanejších a najzaujímavejších publikácií, ktoré sa týkajú bunkovej línie BxPC-3.
Licokumaron indukuje smrť buniek pankreatického adenokarcinómu BxPC-3 inhibíciou DYRK1A
V tejto publikácii v časopise Chemico-Biological Interactions (2020) sa skúmali apoptotické účinky prírodného produktu, likokumaronu, na bunky rakoviny pankreasu BxPC-3.
Tento výskumný článok bol uverejnený v časopise Anticancer Research (2022). V štúdii sa navrhuje, že hydroxychlorochín spôsobuje smrť buniek BxPC3 inhibíciou génu BCL-XL.
Tento výskum bol uverejnený v roku 2020 v časopise Journal of Cellular Biochemistry. V štúdii sa uvádza, že prírodná zlúčenina, salidrozid, vykazuje protinádorové aktivity v bunkách BxPC-3 reguláciou signalizačnej kaskády HIF-1α (hypoxiou indukovateľný faktor) a LOXL2.
Tento článok v časopise Biomedicine & Pharmacotherapy naznačuje, že ibrutinib možno použiť ako skvelý rádiosenzibilizátor u pacientov s rakovinou pankreasu. Štúdia in vitro na bunkách BxPC-3 naznačuje, že znižuje fosforyláciu BxPC3 EGFR a expresiu pAKT a downstream génov regulovaných rádioterapiou.
Táto štúdia v časopise Integrative Cancer Therapies navrhla, že prírodný produkt chelidonín vyvíja apoptotickú aktivitu v ľudských pankreatických bunkách BxPC-3 prostredníctvom regulácie signalizácie BxPC3 p53 a GADD45a.
6. zdroje pre bunkovú líniu BxPC-3: Riešenia: protokoly, videá a ďalšie zdroje pre Bxxxx
Bunková línia BxPC-3 má mnoho podmanivých výhod, vďaka ktorým je vhodná na výskumné použitie. V mnohých online zdrojoch o bunkovej línii BxPC-3 sa uvádza jej spracovanie, údržba a protokol transfekcies.
- Transfekcia BxPC3: Toto video je sprievodcom, ktorý krok za krokom vysvetľuje protokol transfekcie buniek BxPC-3.
Táto časť článku obsahuje niekoľko odkazov vysvetľujúcich protokoly bunkovej kultúry BxPC3.
- Kultivácia buniek BxPC3: Táto webová stránka vám pomôže naučiť sa protokoly na subkultiváciu a manipuláciu s kryokonzervovanými a proliferačnými kultúrami BxPC-3.
Odkazy
- Kim, Y., et al. porovnávacie proteomické profilovanie bunkových línií duktálneho adenokarcinómu pankreasu. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Overexpression of laminin-5 gamma-2 promotes tumorigenesis of pancreatic ductal adenocarcinoma through EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR cascade. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al. výťažky z plodov Elaeocarpus reticulatus znižujú životaschopnosť a indukujú apoptózu v bunkách rakoviny pankreasu in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Anti-cancer potential of Oxialis obtriangulata in pancreatic cancer cell through regulation of ERK/Src/STAT3-mediated pathway. Molekuly, 2020. 25(10): p. 2301.