Bunky A431 - hĺbková analýza buniek epidermoidného karcinómu v dermatologickom výskume

A431 je bunková línia ľudského epidermoidného karcinómu. Široko sa používa v oblasti biomedicínskeho výskumu, najmä v biológii rakoviny, imunitnej onkológii a toxikologických štúdiách. Okrem toho bunky A431 nadmerne exprimujú EGFR (receptor epidermálneho rastového faktora), a preto sa používajú ako cenný in vitro model na štúdium bunkového cyklu a signálnych dráh súvisiacich s rakovinou.

Tento článok vysvetľuje základy rakovinovej bunkovej línie A431. Dozviete sa nasledujúce informácie:

Bunky A431: Všeobecné charakteristiky a pôvod
Bunková línia A431: Informácie o kultivácii
Výhody a nevýhody bunkovej línie A431
Výskumné aplikácie buniek A431
Výskumné publikácie s bunkami A431
Zdroje pre bunkovú líniu A431: Protokoly, videá a ďalšie zdroje informácií

1. A431 bunky: Všeobecná charakteristika a pôvod

Táto časť článku vám pomôže dozvedieť sa všeobecné informácie o bunkovej línii A431, ktoré potrebujete vedieť pred prácou s ňou. Napríklad, aký je pôvod Čo je to bunková línia A431? Aké sú vlastnosti bunkovej línie A431? Aká je morfológia buniek A431? Odkiaľ pochádzajú bunky A431?

A431, ľudská bunková línia rakoviny kože, bola získaná z epidermy 85-ročnej pacientky s epidermoidným karcinómom [1]. Vytvoril ju D. J. Giard a iní, ktorí vyvinuli mnoho ďalších bunkových línií zo solídnych nádorov.
Bunky A-431 majú epitelovú morfológiu. Agregujú sa a vytvárajú zhluky buniek.
Bunková línia rakoviny kože a431 je hypertriploidná. Modálne číslo chromozómov pre túto bunkovú líniu je 74, ktoré sa vyskytuje približne v 36 % buniek. Približne v 1 % bunkovej populácie sa vyskytujú aj vyššie ploidie.

Nádor rastúci pod kožou a infiltrujúci podkožné tkanivá.

2.a431: Informácie o kultivácii

Znalosť požiadaviek a postupov kultivácie bunkovej línie môže uľahčiť manipuláciu s ňou. Táto časť článku vám pomôže dozvedieť sa kľúčové body pre kultiváciu bunkovej línie A431. Napríklad sa dozviete: Aký je čas zdvojenia buniek A431? Je línia rakovinových buniek A431 adherentná? Aké rastové médium sa používa pre A431?

Kľúčové body pre kultiváciu buniek A431

Čas zdvojenia:	Čas zdvojnásobenia populácie buniek A431 sa pohybuje od 80 do 100 hodín.
Adherentné alebo v suspenzii:	A431 je adherentná bunková línia.
Hustota výsevu:	pre bunkovú líniu A431 je ideálna hustota 1 x¹⁰⁴ ^buniek/cm2. Bunky potrebujú takmer 4 dni, aby sa pri tejto hustote dostali do konfluencie. Adherentné bunky sa premyjú PBS (1x) a inkubujú s pasážovacím roztokom Accutase. Potom sa bunky resuspendovali v kultivačnom médiu a odstredili. Zozbierané bunky sa opäť resuspendovali a dávkovali do nových fliaš na rast.
Rastové médium:	Na kultiváciu bunkovej línie A431 sa používa médium DMEM doplnené 10 % fetálneho hovädzieho séra, 4,5 g/l glukózy, 1,0 mM pyruvátu sodného, 1,5 g/l NaHCO3 a 4 mM L-glutamínu. Médium by sa malo vymieňať každé 2 až 3 dni v týždni.
Rastové podmienky:	Rakovinové bunky A431 sa pestujú vo zvlhčenom inkubátore so zdrojom 5 % CO2 pri teplote 37 °C.
Skladovanie:	Bunková línia sa môže skladovať v elektrickej mrazničke alebo v parnej fáze tekutého dusíka pri teplote nižšej ako -150 °C, pretože to pomáha chrániť životaschopnosť buniek.
Proces zmrazovania a médium:	CM-1 alebo CM-ACF sú dve veľmi odporúčané mraziarenské médiá používané pre bunky A431. Bunky sa zmrazujú pomocou metódy pomalého zmrazovania, ktorá umožňuje pokles teploty len o 1 stupeň za minútu.
Postup rozmrazovania:	Zmrazené bunky A431 sa rozmrazujú vo vodnom kúpeli s teplotou 37 °C obsahujúcom antimikrobiálne činidlo počas 40 až 60 sekúnd. Keď zostane len malá hrudka ľadu, bunky sa pridajú s kultivačným médiom a odstredia sa. Zozbierané bunky sa resuspendujú a nalejú do kultivačných baniek na rast.
Úroveň biologickej bezpečnosti:	Na manipuláciu s kultúrami A431 a ich udržiavanie sa odporúča úroveň biologickej bezpečnosti 1.

A-431 pri rôznych hustotách buniek.

3.výhody a nevýhody bunkovej línie A431

Bunková línia A431 má charakteristické vlastnosti a ponúka niekoľko výhod a nevýhod. Niektoré z nich sme zhrnuli nižšie.

Výhody

Hlavné výhody rakovinovej bunkovej línie A431 sú:

Nadmerná expresia EGFR	Bunky A431 nadmerne exprimujú receptor pre epidermálny rastový faktor (EGFR). Slúžia ako pozitívna kontrola na štúdium signalizácie EGFR a jej dôsledkov pri rakovine. Používajú sa aj na hodnotenie nových terapií rakoviny.
Nádorová aktivita	Bunky A431 sú tumorigénne a majú schopnosť vytvárať nádory. Možno ich použiť na vývoj xenotransplantačných modelov rakoviny, ktoré sú cenným nástrojom na štúdium dynamiky rastu nádorov a hodnotenie nových spôsobov liečby rakoviny.

Nevýhody

Nevýhody buniek A431 sú:

Genetické abnormality	A431 je nádorová bunková línia obsahujúca genetické mutácie a zmeny, ktoré ju môžu odlišovať od pôvodných nádorových charakteristík.
Mikrobiálna kontaminácia	A431 je náchylná na mikrobiálnu kontamináciu, predovšetkým bakteriálnu. Dodržiavanie štandardných aseptických kultivačných podmienok však môže pomôcť zabrániť takejto kontaminácii bunkových kultúr A431.

430,00 €*

Obsah: 1.5 milliliter

Ceny bez daní plus náklady na dopravu

cryovial

Číslo výrobku: 300112

4. Výskumné využitie buniek A431

Bunková línia A431 sa vo veľkej miere používa vo výskume rakoviny. Tu je uvedených niekoľko sľubných aplikácií tejto bunkovej línie rakoviny kože. Biológia rakoviny: Bunková línia rakoviny kože A431 je skvelým výskumným nástrojom na skúmanie bunkových a molekulárnych mechanizmov, ktoré riadia rast, vývoj, metastázovanie a inváziu rakoviny.

Výskumníci intenzívne využívajú túto bunkovú líniu na intenzívne štúdium bunkových signálnych dráh, ktoré sa podieľajú na rôznych procesoch rakovinových buniek. Napríklad štúdia uskutočnená v roku 2018 skúmala, že signálna dráha PI3K/AKT/mTOR sa podieľa na proliferácii rakovinových buniek a inhibícia tejto dráhy indukuje apoptózu v kožných nádorových bunkách A431 [2]. Okrem toho sa v inej štúdii uvádza aj podiel dráhy PI3K/AKT/mTOR na metastázovaní buniek rakoviny kože a prechode z epitelu na mezenchým (EMT), čo naznačuje jej kľúčovú úlohu pri vývoji a progresii rakoviny [3]. Testovanie a hodnotenie liekov: Bunky A431 sa používajú na hodnotenie účinnosti a efektívnosti potenciálnych kandidátov na protirakovinové lieky. Výskumníci určili účinky liečiv na proliferáciu rakovinových buniek, metastázovanie, inváziu a apoptózu vykonaním niekoľkých laboratórnych experimentov - výskum uskutočnila Nurhidayah Ab. Rahim a jeho kolegovia využili bunky A431 a hodnotili terapeutický potenciál biogénne syntetizovaných nanočastíc striebra z rastliny Alstonia angustiloba v roku 2022. Zistenia odhalili, že angustiloba-AgNPs pôsobia antiproliferačne na bunky skvamózneho karcinómu kože [4]. Xenograftové modely nádorov: Bunková línia A431 je tumorigénna a po inokulácii do myšieho modelu môže vytvárať nádory. Je teda užitočným nástrojom na vývoj myších xenotransplantačných modelov na skúmanie biológie rakoviny in vivo. V niekoľkých štúdiách sa použila nádorová bunková línia A431 na vývoj nádorových xenotransplantačných modelov. Napríklad Yu Jin Lim a jeho tím vyvinuli xenotransplantačný model kožného nádoru na myši s použitím buniek A431 na posúdenie protinádorových a rádiosenzitívnych účinkov exogénneho epidermálneho rastového faktora (EGF) in vivo [5]. 5. Výskumné publikácie s bunkami A431 Tu sú uvedené niektoré významné výskumné publikácie, v ktorých sa vyskytuje bunková línia karcinómu kože A431. Účinnosť biopolymérnych PVA-AuNPs a PCL-Curcumin loaded electrospun nanofibers a ich protinádorová aktivita proti bunkovej línii karcinómu kože A431 Tento článok bol uverejnený v Materials Today Communications v roku 2020. V štúdii sa hodnotil protinádorový potenciál poly-ε-kaprolaktónu s kurkumínom naložených elektrospunových nanovlákien a polyvinylalkoholu-AuNPs proti rakovinovým bunkám A431. miRNA-221 podporuje progresiu kožného spinocelulárneho karcinómu cielením na PTEN Táto štúdia publikovaná v Cellular & Molecular Biology Letters (2019) navrhuje, že mikroRNA-221 zohráva onkogénnu úlohu pri kožnom spinocelulárnom karcinóme cielením na gén PTEN. Vinkristín z huby Eutypella spp-CrP14 izolovanej z Catharanthus roseus indukuje apoptózu v bunkovej línii ľudského skvamózneho karcinómu A431 Tento výskum v BMC Complementary Medicine and Therapies (2016) naznačuje, že vinkristín, sekundárny metabolit izolovaný z huby Eutypella spp - CrP14, indukuje apoptózu v bunkách A431. Nadmerná expresia CDC42SE1 v bunkách A431 znížila proliferáciu buniek inhibíciou dráhy Akt Táto štúdia bola uverejnená v roku 2019 v časopise Cells. Tento výskum navrhol gén CDC42SE1 ako dôležitý biomarker progresie rakoviny kože, keďže jeho downregulácia uľahčuje tumorigenézu. Metformín inhibuje proliferáciu buniek A431 moduláciou signálnej dráhy PI3K/Akt Tento výskum bol uverejnený v roku 2015 v časopise Experimental and therapeutic medicine. Navrhol, že metformín potláča proliferáciu bunkovej línie rakoviny kože a431 reguláciou signálnej dráhy PI3K/Akt. 6. Zdroje pre bunkovú líniu A431: Tu je niekoľko online zdrojov, ktoré obsahujú bunkovú líniu rakoviny kože A431. Transfekcia buniek A-431: Toto prepojenie poskytuje podrobný návod na transfekciu rakovinových buniek A431. Nasledujúce prepojenie obsahuje informácie o bunkových kultúrach pre bunky A431. Línia rakovinových buniek A431: Tento odkaz obsahuje potrebné informácie o bunkovej kultúre bunkovej línie A431. Zahŕňa kultivačné médiá, hustotu buniek, manipuláciu s kryokonzervovanými a proliferačnými kultúrami atď. Kultivácia buniek A431: Táto webová stránka obsahuje stručný protokol kultivácie bunkovej línie A431.

Odkazy:

Quadri, M., a i., Investigating Cutaneous Squamous Cell Carcinoma in vitro and in vivo: Novel 3D Tools and Animal Models (Skúmanie kožného skvamózneho karcinómu in vitro a in vivo: nové 3D nástroje a zvieracie modely). Front Med (Lausanne), 2022. 9: p. 875517.

Zeng, N., et al., Anticancer activity of caffeic acid n-butyl ester against A431 skin carcinoma cell line occurs via induction of apoptosis and inhibition of mTOR/PI3K/AKT signaling pathway Retraction in/10.3892/mmr. 2021.12011.

Správy z molekulárnej medicíny, 2018. 17(4): p. 5652-5657.

Rahaman, A., a i., Eukalyptol sa zameriava na dráhu PI3K/Akt/mTOR s cieľom inhibovať metastázovanie rakoviny kože.

Carcinogenesis, 2022. 43(6): p. 571-583. Rahim, N.A., et al., Investigation of antiproliferative mechanisms of Alstonia angustiloba-silver nanoparticles in skin squamous cell carcinoma (A431 cell line).

Journal of Molecular Structure, 2022. 1250: s. 131814. Lim, Y.J., et al., Tumor growth suppression and enhanced radioresponse by an exogenous epidermal growth factor in mouse xenograft models with A431 cells (Lim, Y.J., et al., Potlačenie rastu nádoru a zvýšená rádioreakcia exogénnym epidermálnym rastovým faktorom v xenograftických modeloch myší s bunkami A431).

Výskum a liečba rakoviny: Official Journal of Korean Cancer Association, 2015. 47(4): p. 921-930.