KG-1-cellelinjen
KG-1-celler er en human leukemicellelinje som er mye brukt i biomedisinsk forskning. De har mange bruksområder innen immunologi, kreft og toksikologisk forskning. Forskere bruker disse cellene til å studere sykdomsmekanismer og teste potensielle behandlingsformer. Denne artikkelen vil gi omfattende informasjon om KG-1-cellelinjen som kan hjelpe deg i arbeidet ditt. Spesielt vil den diskutere følgende:
- Generelle egenskaper og opprinnelse til KG-1-cellelinjen
- Informasjon om dyrking av KG-1-cellelinjen
- KG-1-cellelinjen: Fordeler og begrensninger
- Anvendelser av KG-1-celler i forskning
- Publikasjoner om KG-1-celler
- Ressurser for KG-1 cellelinje: Protokoller, videoer og mer
1. Generelle egenskaper og opprinnelse til KG-1-cellelinjen
En cellelinjes opprinnelse og generelle egenskaper hjelper en forsker med å avgjøre hvordan den skal brukes i arbeidet sitt. Du kan undersøke denne informasjonen før du begynner å jobbe med den. Denne delen av artikkelen handler om KG-1-makrofagers opprinnelse og egenskaper. Her vil du lære mer: Hva er KG-1-celler? Hva er KG-1a-cellelinjen? Hva er opprinnelsen til KG-1-cellelinjen? Hva er KG-1-morfologien?
- KG-1 er en lymfoblastlignende cellelinje avledet fra benmargsaspirat fra en kaukasisk mann (59 år gammel) med akutt myelogen leukemi. Den ble etablert av Koeffler og Golde i 1978. Disse cellene er hovedsakelig i modningsstadiet promyelocytt eller myeloblast [1].
- KG-1-celler har en lymfoblastlignende morfologi.
- KG-1-cellelinjens karyotype viser et pseudodiploid modalt antall kromosomer.
KG-1 og KG-1a
KG-1a er en sublinje av KG-1-foreldrecellene. Den ble utviklet etter 35 passasjer av KG1-cellelinjen. Den er mindre differensiert sammenlignet med KG-1-cellelinjen. Dessuten er denne sublinjen cytokjemisk, morfologisk og funksjonelt mindre moden sammenlignet med den opprinnelige cellelinjen (KG-1).
2. Informasjon om dyrking av KG-1-cellelinjen
Denne delen av artikkelen vil dekke all viktig informasjon om KG-1-celledyrking som kan lette arbeidet ditt. Her vil du lære mer: Hva er doblingstiden for KG-1-cellelinjen? Hva er dyrkingsbetingelsene for KG-1-makrofager? Hvordan dyrker man KG-1-celler?
Nøkkelpunkter for dyrking av KG-1-celler
|
Fordoblingstid: |
KG-1-cellenes fordoblingstid er ca. 45 timer. Den kan imidlertid variere avhengig av dyrkingsforholdene. |
|
Adherent eller i suspensjon: |
KG-1-cellene vokser i suspensjon. |
|
Celletetthet: |
Den optimale celletettheten for KG1-cellelinjen er fra 1 til 3 x105 celler/ml. Ved subkultur overføres cellesuspensjonen til et sterilt rør og sentrifugeres. De høstede cellene tilsettes deretter ferskt medium og resuspenderes forsiktig. Deretter fordeles cellene over i nye kolber og dyrkes ved en optimal celletetthet. Cellene kan deles når de når en maksimal celletetthet på 1 - 2 x106 celler/ml. |
|
Vekstmedium: |
IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium) som inneholder 10 % FBS, 4,5 g/L glukose, 4 mM L-glutamin, 1,0 mM natriumpyruvat og 3,0 g/L NaHCO3, brukes til dyrking av KG-1-celler. Mediet bør skiftes ut etter tre dager. |
|
Vekstbetingelser: |
KG1 AML-cellelinjen dyrkes i en befuktet inkubator ved 37 °C og med 5 % CO2-tilførsel. |
|
Oppbevaring: |
Frosne celler oppbevares i dampfasen av flytende nitrogen eller ved en temperatur under -150 °C i en elektrisk fryser med ultralave temperaturer for å beskytte cellenes levedyktighet. |
|
Fryseprosess og medium: |
CM-1 eller CM-ACF er egnet for frysing av KG-1-celler. Cellene fryses ved hjelp av en langsom fryseprosess for å beskytte cellene mot sjokk. Denne metoden tillater et gradvis temperaturfall på 1 °C per minutt. |
|
Tineprosess: |
Cellene tines i et forvarmet vannbad ved 37 °C til det bare er en liten isklump igjen. De tinte cellene tilsettes nytt medium og sentrifugeres for å fjerne komponenter fra frysemediet. Cellepelleten resuspenderes forsiktig og helles over i nye kolber som inneholder vekstmedium. |
|
Biosikkerhetsnivå: |
Et laboratorium på biosikkerhetsnivå 1 er avgjørende for å opprettholde KG-1-cellekulturer. |
3. KG-1 cellelinje: Fordeler og begrensninger
I likhet med andre cellelinjer er KG-1-cellelinjen for myeloid leukemi forbundet med mange fordeler og begrensninger. I dette avsnittet skal vi se nærmere på noen av de viktigste fordelene og begrensningene som kan være avgjørende når du skal avgjøre om den skal brukes i forskningen din.
Fordeler og begrensninger
De viktigste fordelene med KG-1-celler er
-
Enkel dyrking
KG-1-celler er enkle å dyrke i forskningslaboratorier, og de kan skilte med ukompliserte krav til cellekultur. De enkle vedlikeholds- og vekstbetingelsene gjør dem tilgjengelige for et bredt spekter av forskere med grunnleggende celledyrkningsfasiliteter.
-
Modell for akutt myeloid leukemi (AML)
KG-1 AML-cellelinjen stammer fra en mannlig pasient med akutt myeloid leukemi (AML), og er et verdifullt verktøy for å undersøke biologien til AML og for å forske på potensielle behandlingsmetoder, noe som gir innsikt i de underliggende mekanismene og behandlingsstrategiene for denne sykdommen.
begrensninger
Begrensningene knyttet til KG1-cellelinjen er følgende:
-
In vitro-modell
KG-1-celler er en verdifull in vitro-modell for AML-forskning, men det er viktig å være oppmerksom på at de kanskje ikke fullt ut gjenskaper sykdommens kompleksitet in vivo, og at de fungerer som en forenklet cellemodell som kanskje ikke omfatter alle aspekter av AML-biologien.
4. Anvendelser av KG-1-celler i forskning
KG-1 har flere lovende bruksområder innen biomedisinsk forskning. Noen av de viktigste bruksområdene for KG1-makrofager innen forskning inkluderer
- Kreftforskning: KG-1-celler stammer fra en pasient med akutt myeloid leukemi og anses derfor som et verdifullt forskningsverktøy for å undersøke AML-biologi. Forskere bruker disse cellene til å studere de cellulære og molekylære mekanismene som driver AML-utvikling, vekst og legemiddelresistens. Dette innebærer også å identifisere og oppdage nye biomarkører, genetiske mutasjoner og signalveier som er forbundet med AML. I en studie fra 2019 ble det for eksempel undersøkt at det lange ikke-kodende RNA-et linc00239 bidrar til doksorubicinresistens og ondartet atferd i KG-1-celler fra akutt myeloid leukemi. En videre studie avslørte at lncRNA-et aktiverer PI3K/Akt/mTOR-signalering for å utøve disse effektene i AML-celler [2].
- Toksikologi: KG1-cellelinjen er mye brukt i toksikologisk forskning. Forskere tester toksisitet og effekt av potensielle terapeutiske midler, inkludert kjemoterapeutiske legemidler og målrettede terapier, på KG1-myeloide leukemiceller for å identifisere lovende legemiddelkandidater for fremtidige prekliniske og kliniske evalueringer. I 2018 ble toksisiteten til doxorubicin-holdige nano-niosomer analysert på KG1 AML-cellelinjen. Studien viste at nano-niosomer er en egnet bærer for levering av legemidler, ettersom det øker effektiviteten av behandlingen [3]. I en annen undersøkelse utforsket forskerne de terapeutiske effektene av brenneslete tilberedt av Urtica dioica-planteblader. Studien avslørte at dette vandige bladekstraktet av planten har antitumoreffekter i akutte myeloide leukemiceller, KG-1 og U937 [4].
5. Publikasjoner om KG-1-celler
I denne delen av artikkelen presenteres noen interessante forskningspublikasjoner om KG-1-celler.
Quercetin sensitiviserer humane myeloide leukemiceller KG-1 mot TRAIL-indusert apoptose
Denne artikkelen ble publisert i Journal of Cellular Physiology (2019). Studien foreslo at quercetinforbindelsen sensitiviserer KG1 AML-cellelinjen mot TNF-relatert apoptoseinduserende ligand (TRAIL) og kan øke effekten av TRAIL-indusert cytotoksisitet i celler.
KLF8 øker veksten av akutte myeloide leukemiceller og glykolysen via AKT/mTOR-banen
Denne artikkelen i Tropical Journal of Pharmaceutical Research (2022) foreslår at nedregulering av krüppel-lignende transkripsjonsfaktor 8 undertrykker AML-celleproliferasjon og glykolyse, og fremmer apoptose via regulering av AKT/mTOR-signalveien.
Effekter av sorafenib og arsentrioksid på U937- og KG-1-cellelinjer: Apoptose eller autofagi?
Denne studien i Cell Journal (Yakhteh) (2020) undersøkte de potensielle effektene av arsentrioksid og sorafenib på U937- og KG-1-celler.
Denne studien publisert i Medical Oncology (2020) evaluerte OXPHOS og glykolyse som terapeutiske mål i AML-cellelinjen KG-1.
I denne publikasjonen fra 2020 om Drug Design, Development, and Therapy ble det foreslått at curcumin- og talidomidforbindelser synergistisk utøver apoptotiske effekter i KG-1-celler ved å redusere uttrykket av STAT3 og Bcl-xL.
6. Ressurser for KG-1 cellelinje: Protokoller, videoer og mer
Følgende er noen få nettressurser som er tilgjengelige om KG-1-celler.
- Subkultur av suspensjonsceller: Denne videoen beskriver protokollen for subkulturering av suspensjonscellekulturer som KG-1.
Følgende lenke inneholder KG-1-cellekulturprotokollen:
- KG-1 cellelinje: Dette nettstedet er fylt med grunnleggende informasjon om KG-1-cellelinjen. Den inneholder informasjon om cellelinjemedier og protokoller for subkulturering og håndtering av kryopreserverte og proliferative kulturer.
Referanser
- Pelliccia, F., V. Ubertini og N. Bosco, The importance of molecular cytogenetic analysis prior to using cell lines in research: Tilfellet med KG-1a leukemicellelinjen. Oncol Lett, 2012. 4(2): p. 237-240.
- Yang, Y., et al., Longnon-coding RNA linc00239 fremmer ondartet atferd og kjemoresistens mot doxorubicin delvis via aktivering av PI3K/Akt/mTOR-banen i akutte myeloide leukemiceller. Onkologirapporter, 2019. 41(4): p. 2311-2320.
- Bahrami-Banan, F., et al, Fremstilling og studie av nano-niosomer som inneholder doksorubicin og evaluering av dets toksisitet på akutt myeloblastisk leukemi-cellelinje KG-1. Payavard Salamat, 2018. 12(4): p. 309-323.
- Hodroj, M.H., et al., Brennesle-te hemmer vekst av akutte myeloide leukemiceller in vitro ved å fremme apoptose. Næringsstoffer, 2020. 12(9): p. 2629.