SiHa-celler - kaster lys over forskning på livmorhalskreft

SiHa-celler er livmorhalskreftceller som er mye brukt i biomedisinsk forskning. De er gode transfeksjonsverter og egner seg derfor godt til genekspresjonsstudier. På grunn av deres menneskelige opprinnelse og livmorhalskreftrelevans brukes disse cellene hovedsakelig i studier innen kreftbiologi, virologi og legemiddelutvikling.

SiHa-cellenes generelle egenskaper og opprinnelse

Det er avgjørende å forstå en cellelinjes opprinnelse og generelle egenskaper, ettersom det påvirker bruken av den i forskningen din. I denne delen av artikkelen vil du lære om SiHa-cellelinjens opprinnelse, karakteristiske egenskaper og mye mer: Hva er SiHa-cellelinjen? Hva er SiHa-celler HPV? Hva er SiHa-cellelinjens opprinnelse? Hva er morfologien til SiHa?

SiHa, cellelinjen for livmorhalskreft, ble avledet fra fragmenter av en primær livmorbiopsi fra en asiatisk kvinne (55 år gammel) med plateepitelkreft [1].
SiHa-cellelinjen har en hypertriploid karyotype. De fleste cellene har et gjennomsnittlig kromosomtall på mellom 69 og 72. Rundt 24 % av cellene har imidlertid et modalt kromosomtall på 71.
SiHa-celler er positive for humant papillomavirus 16. De viser integrasjon av rundt 1 til 2 kopier av HPV-genomet per celle [2].
Disse livmorhalskreftcellene har en epitelial morfologi.

Deling av HeLa livmorhalskreftceller under mikroskop.

SiHa-cellelinje: Informasjon om dyrking

Det er ikke lett å vedlikeholde en cellelinjekultur før du kjenner til alle de viktigste punktene for dyrking av den. Det bør du vite: Hva er fordoblingstiden for SiHa? Hva er SiHa-cellemedia? Hvordan dyrker du SiHa-cellelinjen?

Viktige punkter for dyrking av SiHa-celler

Fordoblingstid:	Fordoblingstiden for SiHa-celler er ca. 17 timer.
Adherent eller i suspensjon:	SiHa er en adherent cellelinje.
Subkultiveringsforhold:	Subkultiveringsforholdet for SiHa-celler er 1:2 til 1:4. For passering skylles de adherente cellene med 1x PBS. Accutase-løsning tilsettes, og cellene inkuberes i 8 til 10 minutter ved omgivelsestemperatur. Deretter tilsettes dyrkingsmedium, og cellene sentrifugeres. Cellepelleten resuspenderes, og cellene helles over i den nye kolben for dyrking.
Vekstmedium:	Eagle's minimum essential medium (EMEM )som inneholder 10 % FBS, 2 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 og Earle's Balanced Salt Solution (EBSS), brukes for ideell vekst av SiHa-celler. Mediet skiftes ut 2 til 3 ganger per uke.
Vekstbetingelser:	SiHa-celler holdes i en 37 °C fuktig inkubator med 5 % CO2-tilførsel.
Oppbevaring:	De frosne SiHa-cellelinjeampullene med livmorhalskreftceller oppbevares ved temperaturer under -150 °C i en elektrisk fryser eller i dampfasen av flytende nitrogen over lengre tid.
Fryseprosess og medium:	CM-1 eller CM-ACF frysemedium brukes til frysing av SiHa-celler. Cellene fryses ved hjelp av en langsom nedfrysingsmetode som kun tillater en reduksjon på 1 °C per minutt for å beskytte cellenes levedyktighet.
Tineprosess:	Frosne celler holdes i 40 til 60 sekunder i et 37 °C varmt vannbad til det er igjen en liten isklump. Deretter tilsettes nytt vekstmedium, og cellene sentrifugeres for å fjerne komponenter fra frysemediet. Cellepelleten resuspenderes, og cellene fordeles i en dyrkingskolbe for vekst.
Biosikkerhetsnivå:	Det kreves et laboratorium på biosikkerhetsnivå 1 for å håndtere og vedlikeholde SiHa-cellekulturer.

Et adherente lag av SiHa-celler i 10× og 20× forstørrelse.

Fordeler og ulemper med SiHa-cellelinjen

I likhet med andre humane karsinomcellelinjer har SiHa også noen distinkte egenskaper som er forbundet med visse fordeler og ulemper. Her har vi diskutert noen av de viktigste.

Fordeler med SiHa-cellelinjen for livmorhalskreft

Modell for livmorhalskreft
- Avledet fra plateepitelkarsinom i livmorhalsen.
- Brukes til å studere mekanismer, vekst og utvikling av livmorhalskreft.
- Uttrykker genene p53+ og pRB+, som er knyttet til DNA-reparasjon, cellesyklusregulering og tumorundertrykkelse.
Tumorframkallende potensial
- SiHa-celler er tumorogene og kan indusere dårlig differensierte epidermoide tumorer av grad III i nakne mus.
- Brukes til in vivo kreftforskning og testing av kreftbehandlinger.

Ulemper med SiHa-celler

Spredningshastighet
- SiHa-celler formerer seg raskt, noe som fører til overvekst.
- Krever hyppig passering, noe som øker risikoen for genetisk ustabilitet, som kan påvirke cellenes atferd over tid.

Forskningsmessige anvendelser av SiHa-celler

SiHa-cellelinjen er mye brukt i forskning på livmorhalskreft. Noen få spesifiserte bruksområder for denne cellelinjen omtales her.

Studier relatert til humant papillomavirus (HPV): SiHa-celler er HPV 16-positive og er derfor verdifulle enheter for studier av humant papillomavirus, dets molekylære mekanismer og rolle i utviklingen og progresjonen av livmorhalskreft. Forskere bruker også disse cellene til å undersøke virusreplikasjon, integrasjon og virusets innvirkning på prosesser i vertscellen. I en studie som ble gjennomført i 2020, ble SiHa-cellelinjen brukt til å undersøke hvilken rolle HPV E6/E7-onkoproteiner spiller i utviklingen av livmorhalskreft ved å angripe dem med CRISPR-teknologi. Funnene viste at knockdown av E6/E7-genene førte til veksthemming og apoptose i SiHa-celler. Disse virusgenene kan derfor fungere som viktige mål for utvikling av behandling mot HPV-assosiert livmorhalskreft [3].
Kreftbiologi: SiHa-celler er en uvurderlig modell for å studere livmorhalskreftbiologi, inkludert kreftutvikling, progresjon, metastasering og invasjon. Forskere bruker disse cellene til å utforske genetiske mutasjoner og underliggende molekylære veier som bidrar til utvikling og vekst av livmorhalskreft, som for eksempel en studie som brukte SiHa-celler og fant at oppregulert SEC61G (SEC61 translocon subunit gamma) oppmuntrer til spredning av livmorhalskreftceller gjennom aktivering av MAPK-kaskaden [4].
Screening og testing av legemidler: SiHa er en mye brukt livmorhalskreftlinje for å vurdere effekten av potensielle kreftmedisiner som er spesifikke for HPV-assosiert livmorhalskreft. Forskere utforsker det antiproliferative, apoptotiske og anti-metastatiske potensialet til legemidler ved hjelp av disse cellene. I 2019 ble det for eksempel utført en studie som undersøkte det cytotoksiske potensialet til fruktekstrakter fra Vatica diospyroides Symington Type SS på SiHa livmorhalskreftcellelinje [5].

SiHa-celler til forskningen din!

430,00 €*

Innhold: 1.5 milliliter

Priser ekskl. avgifter pluss fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 305023

Forskningspublikasjoner med SiHa-celler

Noen viktige og hyppig siterte forskningspublikasjoner omhandler SiHa-cellelinjen for livmorhalskreft.

Anti-tumoreffekten av aloe-emodin på livmorhalskreftceller var forbundet med humant papillomavirus E6/E7 og glukosemetabolisme

Denne publikasjonen i OncoTargets and Therapy (2019) foreslo at en naturlig forbindelse aloe-emodin utøver HPV E6/E7- og glukosemetabolisme-assosierte apoptotiske effekter i SiHa livmorhalskreftceller.

Evaluering av anti-kreftpotensialet til Excoecaria agallocha (L.) bladekstrakt på human livmorhalskreft (SiHa) cellelinje og vurdering av den underliggende virkningsmekanismen

Denne artikkelen ble publisert i Future Journal of Pharmaceutical Sciences i 2022. Denne studien undersøkte antitumoraktivitetene til Excoecaria agallocha (L.) plantebladekstrakt i SiHa livmorhalskreftcellelinjen.

Antiproliferativ effekt av 1,10-fenantrolin koblet til sulfaterte ZnO-nanopartikler i SiHa livmorhalskreftcellelinje

Denne studien publisert i Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022) foreslo at 1,10-fenantrolinmolekylet ved kobling med sinksulfatnanopartikler utøver betydelige antiproliferative effekter i SiHa-celler.

Astragalosid IV hemmer invasjon og metastase av SiHa livmorhalskreftceller via de TGF-β1-medierte PI3K- og MAPK-veiene

Denne forskningen ble publisert i Oncology Reports i 2019. Studien viste at astragalosid IV, et naturprodukt, undertrykker migrasjon og invasjon av SiHa-celler ved å modulere TGF-β1-medierte PI3K- og MAPK-signalveier.

IFI16 fremmer progresjon av livmorhalskreft ved å oppregulere PD-L1 i immunomikromiljøet gjennom STING-TBK1-NF-kB-veien

Denne studien i Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) avslørte at IFI16 (interferon-gamma-inducerbart protein 16) regulerer PD-L1-genet via aktivering av STING-TBK1-NF-kB-veien for å fremme vekst av SiHa-livmorhalskreftceller.

Ressurser for SiHa-cellelinje: Protokoller, videoer og mer

Her er noen nettressurser som inneholder SiHa-celler.

SiHa-celletransfeksjon: Denne forskningsartikkelen inneholder en protokoll for vedlikehold av SiHa-celler fra livmorhalskreft og for transfeksjon av SiHa-celler.

Følgende lenke inneholder informasjon om cellekultur for SiHa-celler.

SiHa-cellelinje: Dette nettstedet inneholder mye verdifull informasjon om SiHa-cellelinjen. Dette inkluderer informasjon om vekstmedier, dyrkingsbetingelser, protokoller for subkulturering av SiHa-celler og håndtering av proliferative og kryopreserverte kulturer.

Vanlige spørsmål om SiHa Cervical Carcinoma Cells

Referanser

Melzer, C., J. von der Ohe og R. Hass, Concise review: crosstalk of mesenchymal stroma/stem-like cells with cancer cells provides therapeutic potential. Stem cells, 2018. 36(7): p. 951-968.
Ostrowska, K.M., et al., Investigation of the influence of high-risk human papillomavirus on the biochemical composition of cervical cancer cells using vibrational spectroscopy. Analyst, 2010. 135(12): p. 3087-3093.
Chen, Y., et al., In vitro og in vivo veksthemming av humane livmorhalskreftceller via spalting av humant papillomavirus E6/E7 mRNA ved hjelp av CRISPR/Cas13a-systemet. Antiviral forskning, 2020. 178: p. 104794.
Fan, Y., et al., SEC61G fremmer spredning av livmorhalskreft ved å aktivere MAPK-signalvei. Disease Markers, 2022. 2022.
Chothiphirat, A., et al., Anticancer potential of fruit extracts from Vatica diospyroides symington type SS and their effect on program cell death of cervical cancer cell lines. The Scientific World Journal, 2019. 2019.