NCI-H1299-celler: Forskning og kliniske implikasjoner av NCI-H1299-lungekreftceller
NCI-H1299 er en udødeliggjort cellelinje for ikke-småcellet lungekreft som er mye brukt i forskning på immunonkologi, kreft og legemiddelutvikling. Forskere har dessuten brukt disse cellene til å undersøke medikamentfølsomhet, underliggende signalveier og molekylære mekanismer knyttet til lungekreft. Dessuten brukes disse cellene til å studere virusinfeksjoner som SARS-CoV-2.
Generelle egenskaper og opprinnelse til NCI-H1299-celler
Det første du bør vite om en cellelinje er dens opprinnelse og generelle egenskaper, ettersom de hjelper deg med å finne ut hvordan den skal brukes i forskningen din. Denne delen av artikkelen vil hjelpe deg med å lære deg viktig informasjon om NCI-H1299s opprinnelse og egenskaper. For eksempel, hva er NCI-H1299 lungekreftceller? Hvilken type celle er NCI-H1299? Hva er størrelsen på NCI-H1299-celler? Hva er forskjellen mellom A549 og NCI-H1299?
- NCI-H1299-cellelinjen stammer fra en lymfeknutemetastase i lungen til en 43 år gammel kaukasisk mannlig pasient med kreft.
- Disse cellene har homozygot partiell delesjon av p53-genet, og de uttrykker derfor ikke p53-proteinet. Mangel på uttrykk av p53-protein i NCI-H1299 bidrar til den proliferative tendensen til H1299-lungekreftceller.
- I tillegg til p53 er det rapportert at disse udødeliggjorte cellene har NCI-H1299 KRAS-mutasjon, som er ansvarlig for deres vekst, spredning, migrasjon og invasjonsegenskaper.
- NCI-H1299-karyotypen er tilnærmet diploid.
- NCI-H1299-celler har en epitelcellelignende morfologi.
- Disse cellene er avflatet og har en tykkelse på mindre enn 5 µm.
NCI-H1299 og A549
NCI-H1299 og A549 er cellelinjer for ikke-små lungekreftceller. NCI-H1299-celler er mer aggressive og følsomme sammenlignet med A549. Begge har relativt like mutasjoner, for eksempel KRAS. I motsetning til NCI-H1299-celler uttrykker A549-celler imidlertid P53-genet.
Informasjon om dyrking
Det er ikke enkelt å vedlikeholde en cellelinjekultur før du kjenner til all nøkkelinformasjon om den, inkludert: Hva er fordoblingstiden for NCI-H1299? Hva er såingstettheten for NCI-H1299? Hva er NCI-H1299-cellemedia? Hvordan dyrker man NCI-H1299-cellelinjer? I denne delen finner du svarene på alle disse spørsmålene om dyrking av NCI-H1299-celler.
Viktige punkter for dyrking av NCI-H1299-celler
|
Fordoblingstid: |
NCI-H1299-cellenes fordoblingstid varierer mellom 22-30 timer. |
|
Adherent eller i suspensjon: |
NCI-H1299 er en adherent cellelinje. |
|
Subkultiveringsforhold: |
NCI-H1299-celler subkultiveres i et anbefalt forhold på 1:3 til 1:6. Ved såing vaskes de adherente cellene med 1x PBS og inkuberes med Accutase-passiveringsløsning i 8 til 10 minutter ved omgivelsestemperatur. Celler som løsner, tilsettes nytt dyrkingsmedium og sentrifugeres. Cellepelleten resuspenderes deretter, og cellene helles over i nye kolber som inneholder vekstmedium. |
|
Vekstmedium: |
RPM1 1640 er et ideelt NCI-H1299-cellemedium. Det er supplert med 10 % føtalt bovint serum, 4500 mg/L glukose, 2,0 mM L-glutamin, 1 mM natriumpyruvat, 1500 mg/L NaHCO3 og 10 mM HEPES. Mediet bør fornyes hver 2. til 3. gang i uken. |
|
Vekstbetingelser: |
NCI-H1299 lungekreftcellekulturer holdes i en befuktet inkubator ved 37 °C med 5 % CO2-tilførsel. |
|
Oppbevaring: |
NCI-H1299-cellelinjen kan langtidslagres i dampfasen av flytende nitrogen eller i frysere med ultralave temperaturer på under -150 °C. |
|
Fryseprosess og medium: |
CM-1 eller CM-ACF er frysemedier for NCI-H1299-celler. Cellene fryses ved hjelp av en langsom fryseprosess som bare tillater en temperaturreduksjon på 1 grad per minutt for å beskytte cellenes levedyktighet. |
|
Tineprosess: |
Frosne NCI-H1299-celler omrøres raskt i et forvarmet vannbad ved 37 grader Celsius i 40 til 60 sekunder til det bare er en liten isbit igjen. De tinte cellene tilsettes ferske medier og kan dyrkes direkte i nye kolber eller sentrifugeres. I førstnevnte tilfelle bør mediet skiftes ut etter 24 timers inkubasjon. Sentrifugering bidrar til å fjerne frysende medieelementer. Etterpå resuspenderes de høstede cellene i nytt medium og fordeles i den nye kolben for dyrking. |
|
Biosikkerhetsnivå: |
Det kreves et laboratorium på biosikkerhetsnivå 1 for å håndtere NCI-H1299-cellekultur. |
Kjøp NCI-H1299-cellelinjen: Forskningsverktøy av høy kvalitet for å undersøke lungekreftbiologi
Fordeler og ulemper med NCI-H1299-celler
I likhet med andre humane kreftcellelinjer har også NCI-H1299 noen særegne egenskaper som er forbundet med spesifikke fordeler og ulemper. Her har vi oppsummert noen av de viktigste.
Fordeler og ulemper
De viktigste fordelene med NCI-H1299-cellelinjen for ikke-småcellet lungekreft er
-
In vitro-modellfor lungekreft
NCI-H1299-cellelinjene er utviklet fra lymfeknutemetastaser av lungekarsinom og har dermed relativt like egenskaper. Derfor kan disse cellene fungere som en in vitro-modell for å undersøke lungekreftbiologi, celle- og molekylære mekanismer og screene og teste potensielle behandlingsmetoder.
-
Enkle å dyrke
NCI-H1299-celler er enkle å dyrke og vedlikeholde i et forskningslaboratorium. Det er ingen vanskelige krav til og prosedyrer for celledyrking.
-
NCI-H1299 P53- og NCI-H1299 KRAS-mutasjon
NCI-H1299-celler mangler p53-genuttrykk, noe som gjør at cellene kan spre seg kraftig. I tillegg har de KRAS-mutasjon, som bidrar til cellevekst, spredning, invasjon og migrasjon. På bakgrunn av dette bruker forskere H1299-celler til å undersøke molekylære mekanismer som er relevante for KRAS- og P53-mutasjoner.
Ulemper
Ulempene med NCI-H1299-celler er
-
Vevsspesifisitet
NCI-H1299 stammer fra lungevev. Derfor er anvendeligheten for det meste begrenset til forskning på lungekarsinom. Den representerer kanskje ikke fullt ut andre krefttypers heterogenitet og generelle egenskaper.
Anvendelser av NCI-H1299-celler i forskning
NCI-H1299-cellelinjen er mye brukt i forskning på lungekreft. Her nevnes noen lovende bruksområder for denne cellelinjen.
- Kreftbiologi: NCI-H1299-celler er et godt forskningsverktøy for å undersøke kreftutvikling, progresjon og relaterte celle- og molekylære mekanismer. Disse cellene har visse mutasjoner, noe som gjør det mulig for forskere å utforske relatert kreftcelleatferd, signalveier og genuttrykksprofiler. Flere studier har brukt NCI-H1299-cellelinjen for ikke-småcellet lungekarsinom til å studere lungekreftbiologi. I en studie fra 2018 ble det for eksempel undersøkt hvilke signalveier som er involvert i apoptose av lungekreftceller ved hjelp av NCI-H1299-celler. Forskerne fant at PI3K/AKT-signalveien bidrar til celleproliferasjon, og at hemming av den kan føre til kreftcelledød [1]. En annen studie undersøkte mekanismene som er involvert i NCI-H1299-cellenes overgang fra epitelial til mesenkymal transformasjon (EMT). Denne studien foreslo at et ekstracellulært protein SPARC (utskilt protein surt og rikt på cystein) bidrar til NCI-H1299 EMT og migrasjon, og dermed fremmer tumorigenese i celler - SPARC-proteinet fungerer som en mediator av TGF-β1-signalering [2].
- Oppdagelse og screening av legemidler: NCI-H1299, en human lungekreftcellelinje, brukes i stor utstrekning til å vurdere toksisitet og effekt av potensielle legemidler. I tillegg brukes den av forskere til å undersøke virkningsmekanismen til antitumorlegemidler. Studier har også brukt disse cellene til å identifisere mulige mål for legemidler og resistensmekanismer. Xiao-Yun Shen og kolleger har for eksempel undersøkt kreftpotensialet til den naturlige forbindelsen brucein D (BD). Funnene viste at BD i betydelig grad hindrer spredning, invasjon og migrasjon av NCI-H1299-celler. Det kan derfor betraktes som en potensiell adjuvant terapi for behandling av ikke-småcellet lungekarsinom [3]. På samme måte evaluerte en studie de cytotoksiske effektene av xanthohumol alene og i kombinasjon med cisplatin som kjemoterapeutisk legemiddel på NCI-H1299 lungekreftceller [4].
Forskningspublikasjoner med NCI-H1299-celler
Her finner du noen av de viktigste og mest siterte forskningspublikasjonene om NCI-H1299 lungekarsinomcellelinjen.
Induksjon av apoptose i indol-3-karbinol-behandlede H1299-lungekreftceller via økt ROS-nivå
Denne artikkelen er publisert i tidsskriftet Human and Experimental Toxicology (2021). Studien foreslår at indol-3-karbinol induserer apoptose i H1299 via forhøyede nivåer av reaktive oksygenarter (ROS).
Denne forskningen ble publisert i 2018 i tidsskriftet Cellular Physiology and Biochemistry. Forskningsresultatene viste at kombinasjonen av koffeinsyre og paklitaksel har en synergistisk anti-krefteffekt i ikke-småcellet lungekreftcellelinje, NCI-H1299.
Denne forskningsartikkelen ble publisert i Molecular Medicine Reports (2018). Studien evaluerte antitumoreffekten av tubeimosid-1, et triterpenoid-saponin, og underliggende mekanismer i cellelinjen NCI-H1299.
Pristimerin induserer apoptose og hemmer spredning og migrasjon i H1299 lungekreftceller
Denne artikkelen publisert i Journal of Cancer (2020) foreslår at Pristimerin, en naturlig forbindelse, undertrykker spredning og migrasjon av NCI-H1299-celler.
Mekanismen for VIPR1-genets regulering av humane lungeadenokarsinom H1299-celler
Denne studien i Medical Oncology (2019) undersøkte de potensielle effektene av overuttrykk av VIPR1-genet på adenokarsinomcellelinjen NCI-H1299.
Ressurser for NCI-H1299 cellelinje: Protokoller, videoer og mer
Her er noen nettressurser som inneholder NCI-H1299-celler.
- NCI-H1299-transfeksjon: Denne videoen forklarer protokollen for transient transfeksjonsprotokoll for NCI-H1299-cellelinjer.
- Subkulturering av en adherente cellelinje: Denne videoen vil hjelpe deg å lære en generell subkultureringsprosedyre for en adherente cellelinje.
Følgende lenke inneholder informasjon om celledyrking for NCI-H1299-celler.
- NCI-H1299 cellelinje: Denne lenken kan hjelpe deg med å finne ut mer om NCI-H1299-cellepassering og transfeksjonsprotokoll.
Ofte stilte spørsmål om NCI-H1299-cellelinjen
Referanser
- Gu, J., et al., Studie av EGCG indusert apoptose i lungekreftceller ved å hemme PI3K / Akt signalvei. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): p. 4557-4563.
- Sun, W., et al., SPARC fungerer som en mediator av TGF-β1 for å fremme epitelial-til-mesenkymal overgang i A549- og H1299-lungekreftceller. Biofactors, 2018. 44(5): p. 453-464.
- Shen, X.-Y., et al, En studie av mekanismen til brucein D i behandlingen av ikke-småcellet lungekreft H1299-celler. World Journal of Traditional Chinese Medicine, 2020. 6(4): p. 500.
- Long, B., et al., Cytotoksiske effekter av Xanthohumol og dens kombinasjon med cisplatin på humane metastatiske lungekreft H1299-celler. Journal of Advances in Medicine and Medical Research, 2019. 30(9): p. 1-15.