Hep2-celler og deres rolle i forskning på strupekreft
Hep2-celler er en sentral in vitro-modell som brukes i stor utstrekning på tvers av biomedisinske forskningsområder, som reumatologi, kreftforskning og immunologi. Disse humane cellene stammer fra strupehodekarsinom, og de har vært avgjørende for å belyse opprinnelsesvevet og de spesifikke trekkene ved svulster i strupehodet. Deres betydning er godt anerkjent innen translasjonsbasert kreftforskning, der de har bidratt sterkt til vår forståelse av laryngeal natur og opprinnelse av kreft, noe som markerer en betydelig tilstedeværelse i publikasjoner om laryngeal kreftforskning [1].
Hep 2-cellenes opprinnelse og generelle egenskaper
En cellelinjes opprinnelse og generelle egenskaper definerer dens anvendelighet i forskning. Denne delen vil hjelpe deg med å finne ut mer om opprinnelsen til Hep 2-celler og noen av de viktigste kjennetegnene ved dem. Du vil for eksempel finne ut av dette: Hva er HEp-2-cellelinjen? Hva er kilden til Hep 2-celler? Og hva er morfologien til Hep 2?
- Hep 2, en udødelig human epitelcellelinje, ble først beskrevet av H.W. Toolan som laryngeale karsinomceller i 1954. I det siste har det imidlertid blitt rapportert at Hep 2-cellelinjen består av adenokarsinomceller fra livmorhalsen og stammer fra kontaminering av Hela-cellelinjen [2].
- Hep 2-celler inneholder Hela-markørkromosomer og er positive for Keratin- og humant papillomavirus-DNA-sekvenser, noe som er bekreftet med henholdsvis immunoperoksidasefarging og PCR.
- Hela-cellelinjederivatet Hep 2 har en epitel-lignende morfologi.
- Hep 2-cellelinjen har både strukturelle og numeriske kromosomavskrapninger med en nesten triploid karyotype [3].
Hep 2-cellelinje: Informasjon om dyrking
Før vi arbeider med en cellelinje, må vi kjenne til følgende viktige punkter for dyrking av den. Denne informasjonen kan være nyttig for effektiv dyrking og vedlikehold av cellelinjen. Det bør du vite: Hva er fordoblingstiden for HEp-2-celler? Er Hep-2-celler adherente? Hva er såingstettheten til Hep2-celler?
|
Populasjonsdoblingstid: |
Den rapporterte doblingstiden for Hep 2-celler er ca. 40 timer. |
|
Adherente eller i suspensjon: |
Hep 2-celler er adherente og vokser i monolag. |
|
Utsåingstetthet: |
En såingstetthet på 1 x104 celler/cm2 er ideell for Hep 2-cellekultur. Ved såing skylles adherente Hep 2-celler med 1 x PBS-løsning, etterfulgt av inkubasjon med Accutase-dissosiasjonsløsning. Etter 8-10 minutters inkubering ved omgivelsestemperatur resuspenderes cellene i media og sentrifugeres. De oppsamlede cellene fordeles deretter i nytt medium og helles over i nye kolber for dyrking. |
|
Vekstmedium: |
EMEM eller Eagles minimal essential medium brukes til dyrking av Hep 2-celler. Dette mediet er supplert med 10 % FBS, 1,0 g/l glukose, 2,2 g/l NaHCO3, 2,0 mM L-glutamin, 1 % NEAA og 1 mM natriumpyruvat for ideell cellevekst. Mediet bør fornyes 2 til 3 ganger i uken. |
|
Vekstbetingelser: |
I likhet med andre pattedyrcellelinjer dyrkes Hep 2 også i en befuktet inkubator med en temperatur på 37 °C og kontinuerlig tilførsel av 5 % CO2. |
|
Oppbevaring: |
Hep 2-celler kan oppbevares i elektriske frysere med ultralave temperaturer (under -150 °C) eller i flytende nitrogendampfase for langtidslagring. |
|
Fryseprosess og medium: |
De anbefalte frysemediene for Hep 2-celler er CM-1 eller CM-ACF. Cellene bør fryses ved hjelp av en langsom fryseprosess som tillater et gradvis temperaturfall på 1 °C og beskytter cellenes levedyktighet. |
|
Tineprosess: |
Det frosne celleglasset tines raskt ved å røre det i et vannbad ved37 °Ctil det bare er en liten isklump igjen. Cellene tilsettes deretter til ferske medier og sentrifugeres for å fjerne komponenter fra frysemediet. Senere resuspenderes cellepelleten i mediet, og cellene fordeles i dyrkingsflasker. Cellene må hvile i nesten 24 timer for å feste seg. |
|
Biosikkerhetsnivå |
For håndtering og vedlikehold av Hep 2-cellekulturer anbefales et laboratorium på biosikkerhetsnivå 1. |
Fordeler og begrensninger ved Hep 2-celler
Nesten alle cellelinjer har en unik kombinasjon av fordeler og begrensninger som bidrar til at de kan brukes i forskning. I dette avsnittet beskrives noen av de viktigste fordelene og ulempene knyttet til Hep 2-cellelinjen.
Fordeler og ulemper
De viktigste fordelene med Hep 2-cellelinjen er
- Humant opp hav: Hep 2 er avledet fra humane epitelceller, noe som gjør den til en verdifull in vitro-modell for studier av humane sykdommer og virusinfeksjoner
- ANA-deteksjon: Hep 2-cellelinjen har en nativ proteinoppstilling som inneholder en rekke antigener, noe som gjør den til et utmerket substrat for påvisning av antinukleære antistoffer (ANA). Denne egenskapen muliggjør spesifikk og svært sensitiv screening av ANA i serum, noe som gjør det til et viktig diagnostisk verktøy for å identifisere bindevevssykdommer
Begrensninger
- Kromosomale abnormiteter: Hep 2-celler har flere numeriske og strukturelle kromosomavvik. Disse avvikene kan påvirke cellenes oppførsel og kan begrense deres anvendelighet i visse laboratorieeksperimenter
- Tumorigenisitet: Hep 2, som er en tumoravledet human epitelcellelinje, kan ha genetiske abnormaliteter som vanligvis ikke finnes i epitelceller. Derfor kan bruken av Hep 2-celler være begrenset i spesifikke studier som fokuserer på normal cellefysiologi.
Utvidede bruksområder for Hep 2-cellelinjen i biomedisinsk forskning
Hep 2-cellelinjen fremstår som en eksemplarisk modell for en rekke bruksområder innen biomedisinsk forskning. Disse cellene er kjent for sin allsidighet og spiller en viktig rolle i in vitro-eksperimenter, som spenner fra reseptoranalyse til studier av komplekse sykdommer.
Utforskning av tumorgenetiske mekanismer og terapeutiske mål med Hep 2-celler
Hep 2-celler er tumorogene og er derfor sentrale for å utforske kreftbiologiens forviklinger. De gir innsikt i kreftsignalveier, mekanistiske studier og er en bærebjelke i screening og evaluering av kreftmedisiner. For eksempel ble Hep 2 brukt i en innsiktsfull studie for å kartlegge hvordan miRNA-33a påvirker spredningen av kreftceller. Funnene belyste de antiproliferative effektene av miRNA-33a gjennom dets interaksjon med PIM1, et kjent onkogen, noe som tyder på et nytt terapeutisk mål [4]. I et annet tilfelle ble Hep 2 brukt til å vurdere det terapeutiske potensialet til nanopartikler av sinkoksid fra Marsdenia tenacissima, noe som fremhevet deres antiproliferative og apoptotiske effekt [5].
Virologisk forskning med innsikt i Hep 2-celler
Hep 2-cellenes mottakelighet for ulike humane virus gjør dem til en uvurderlig ressurs i virologisk forskning. De har blitt brukt effektivt til å uttrykke SARS-CoV-2-virusgener for å avdekke det komplekse samspillet mellom viruset og vertscellens mekanismer [6]. Denne anvendelsen er spesielt viktig i vår tid, der det å forstå og bekjempe virusinfeksjoner som covid-19 er en global prioritet.
Dekryptering av cellulære funksjoner: Genmanipulering i Hep 2-celler
Hep 2-cellelinjens tilpasningsdyktighet til genmanipulering understreker dens anvendelighet i mekanistiske studier. Forskere utnytter denne egenskapen til å modulere genuttrykket og belyse spesifikke geners rolle i cellefunksjonene. En bemerkelsesverdig studie involverte overuttrykk av det RNA-bindende proteinet RBM6 i Hep 2-celler, noe som gjorde det mulig å undersøke dets tumorsuppressorpotensial og gi verdifull innsikt i det molekylære grunnlaget for kreft [7].
Forbedret sykdomsdiagnostisering ved hjelp av Hep 2-cellelinjer
Utover disse forskningsområdene er Hep 2-celler anerkjent for sine diagnostiske egenskaper, spesielt når det gjelder påvisning av ANA, som er avgjørende for diagnostisering av autoimmune sykdommer som systemisk lupus erythematosus. Hep 2-celler kan påvise ANA med stor presisjon, noe som bidrar til diagnostisering og utvikling av målrettede behandlinger, øker vår forståelse av autoimmune sykdommer og forbedrer pasientbehandlingen.
Gjennom disse ulike bruksområdene har Hep 2-celler bidratt betydelig til fremskritt innen translasjonsforskning på kreft, studier av virusinfeksjoner og utforskning av cellulære mekanismer. Deres bidrag til generering av klinisk relevante data er uvurderlig, noe som bekrefter deres uunnværlige rolle både i laboratoriet og i klinikken. Hep 2-cellelinjen vil helt sikkert fortsette å ligge i forkant av forskningen, bidra til oppdagelsen av nye behandlingsmetoder og utvide vår kunnskap om menneskers helse og sykdom.
Sikre din HEp-2-cellelinje i dag
Hep 2-celler: Forskningspublikasjoner
Her følger noen interessante og mest siterte forskningspublikasjoner om Hep 2-celler.
- Syntese av sinkoksid nanopartikler fra Marsdenia tenacissima hemmer celleproliferasjon og induserer apoptose i strupehodekreftceller (Hep-2)
Denne artikkelen publisert i Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2019) undersøkte antikreftpotensialet til biosyntetiserte sinkoksid-nanopartikler fra Marsdenia tenacissima i Hep-2-cellelinjen. - Bioformulerte hesperidin-belastede PLGA-nanopartikler motvirker den mitokondriemedierte intrinsiske apoptotiske veien i kreftceller
Denne artikkelen ble publisert i Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials i 2021. Denne studien undersøkte antikreftegenskapene til bioformulerte hesperidin-belastede Poly (lactic-co-glycolic acid) (PLGA) nanopartikler i Hep 2-celler. - Antiviral aktivitet av etanolekstrakt av Lophatherum gracile mot respiratorisk syncytialvirusinfeksjon
I denne publikasjonen i Journal of Ethnopharmacology i 2019 ble Hep 2-celler brukt til å studere respiratorisk syncytialvirusinfeksjon og screene antivirale legemidler mot det. Studien rapporterte det lovende antivirale potensialet til etanolekstrakt av en medisinplante, dvs. Lophatherum gracile, mot respiratorisk syncytialvirusinfeksjon. - Evaluering av vandige ekstrakter fra fire aromatiske planter med tanke på deres aktivitet mot Candida albicans-adhesjon til humane HEp-2-epitelceller
Denne forskningen er publisert i Gene Reports (2020). Denne studien undersøkte det hemmende potensialet til vandige ekstrakter av fire aromatiske planter mot adhesjonen av Candida albicans til humane Hep 2-epitelceller. - Wnt1-inducerbart signalprotein 1 regulerer glykolyse og kjemoresistens ved laryngeal plateepitelkarsinom via YAP1/TEAD1/GLUT1-veien
Denne studien ble publisert i Journal of Cellular Physiology i 2019. Studien viser at Wnt1-inducible signalling protein 1 (WISP1) interagerer med YAP1/TEAD1/GLUT1-veien og regulerer glukosemetabolismen og kjemoresistens i Hep 2-cellelinjen.
Ressurser for Hep2-cellelinje: Protokoller, videoer og mer
Hep 2 er en velkjent cellelinje. Det finnes flere tilgjengelige ressurser med Hep 2-cellelinjen.
- Subkultur av Hep2-cellelinjen: Denne videoen er en trinnvis veiledning til subkulturering av Hep 2-celler.
- ANA-screening av Hep 2-celler: Denne videoen forklarer ANA-screening (anti-nukleære antistoffer) ved bruk av Hep 2-cellelinjen.
- Hep 2-dyrking: Denne lenken inneholder grunnleggende informasjon om Hep 2-celler. Den inkluderer celledeling, nedfrysing og tining av celler.
Ofte stilte spørsmål om HEp-2-celler i biomedisinsk forskning
Referanser
- Fusi, M. og S. Dotti, Adaptation of the HEp-2 cell line to totally animal-free culture systems and real-time analysis of cell growth. Biotechniques, 2021. 70(6): p. 319-326.
- Gorphe, P., En omfattende gjennomgang av Hep-2-cellelinjen i translasjonsforskning for strupehodekreft. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): p. 644-649.
- Wang, M., et al., Cancer-associated fibroblasts in a human HEp-2 established laryngeal xenografted tumor are not derived from cancer cells through epithelial-mesenchymal transition, phenotypically activated but karyotypically normal. PLoS One, 2015. 10(2): s. e0117405.
- Karatas, O.F., Antiproliferativt potensial av miR-33a i strupehodekreft Hep-2-celler via målretting mot PIM1. Head Neck, 2018. 40(11): p. 2455-2461.
- Wang, Y., et al, Syntese av sinkoksid nanopartikler fra Marsdenia tenacissima hemmer celleproliferasjon og induserer apoptose i strupehodekreftceller (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: p. 111624.
- Zhang, J., et al., En systemisk og molekylær studie av subcellulær lokalisering av SARS-CoV-2-proteiner. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): p. 269.
- Wang, Q., et al., RNA-bindende protein RBM6 som et tumorundertrykkende gen undertrykker vekst og progresjon i laryngokarsinom. Gene, 2019. 697: p. 26-34.