Endotelceller fra menneskelig navlestreng (HUVEC)
HUVEC er primære endotelceller som fungerer som et viktig verktøy i biomedisinsk forskning. De hjelper forskere med å studere angiogenese, vaskulær biologi og sykdommer som aterosklerose og kreft. HUVEC brukes til å utforske endotelcellers atferd, cellulære signaleringsmekanismer og legemiddeltesting, og gir verdifull innsikt i potensielle terapier eller behandlinger for hjerte- og karsykdommer og kreft. De fungerer også som et modellsystem for studier av vaskulærbiologi.
Opprinnelse og generelle egenskaper ved HUVEC-celler
Kunnskap om en cellelinjes opprinnelse og generelle egenskaper er avgjørende for å avgjøre om den er egnet for din studie. Denne delen vil hjelpe deg med å lære denne viktige informasjonen om HUVEC-endotelceller: Hva brukes HUVEC-celler til? Hva er den fullstendige formen for HUVEC-celler? Hva er de karakteristiske egenskapene til HUVEC? Hva er HUVEC-morfologien? Hva er diameteren på HUVEC-celler? Hva er størrelsen på HUVEC-celler?
- HUVEC-celler ekstraheres fra endotelet i den menneskelige navlestrengsvenen.
- HUVEC-morfologien er endotel-lignende. De er vanligvis polygonale i form og har en rund kjerne i sentrum.
- HUVEC-cellestørrelsen er 17 μm i diameter.
- Disse endotelcellene er diploide. De har et modalt kromosomtall på 46.
HUVEC TERT2
HUVEC TERT2 er en immortalisert cellelinje avledet fra primære humane navlestrengsvenendotelceller (HUVEC). Den ble utviklet ved å introdusere det humane telomerase-revers-transkriptase (TERT)-genet i HUVEC-cellens genom. Denne modifikasjonen bidro til å forlenge levetiden deres i kultur, noe som muliggjorde langvarige eksperimenter uten de begrensningene som er forbundet med primære HUVEC-celler.
Hva er forskjellen mellom HUVEC og HMEC-1?
Strukturen og kompleksiteten til HUVEC- og HMEC-1-endotelcellelinjene er sammenlignbare. HMEC-1-cellene utviser imidlertid en mer homogen populasjon enn HUVEC-cellene når det gjelder cellestørrelse og granularitet. Dette kan redusere variasjonene i eksperimentelle data.
Informasjon om dyrking av HUVEC-cellelinjen
Denne delen av artikkelen fokuserer på å gi deg viktig kunnskap om HUVEC-cellekultur. Dette vil være til stor hjelp i arbeidet ditt med dem. Her finner du svar på følgende vanlige spørsmål: Hva er doblingstiden for HUVEC? Hva er utsåingstettheten for HUVEC? Hvor mange passasjer finnes det i HUVEC-celler? Hva er HUVEC-cellemedier? Hvordan dyrker man HUVEC-celler?
Viktige punkter for dyrking av HUVEC-celler
Fordoblingstid:
HUVEC-doblingstiden er omtrent 23,5 timer. Den kan imidlertid variere avhengig av cellekulturforholdene og antall passasjer.
Adherent eller i suspensjon:
HUVEC er en vedheftende cellelinje. Cellene vokser og danner monolag.
Delingsforhold:
Subkultiveringsforholdet for HUVEC er 1:2 til 1:4. For såing vaskes cellene med 1x fosfatbuffersaltvann og tilsettes en dissosiasjonsløsning (Accutase) i 8 til 10 minutter ved romtemperatur. Deretter tilsettes dyrkningsmedium, og løsrevne celler sentrifugeres. Supernatanten kastes, og cellepelleten resuspenderes forsiktig. Cellene dispenseres i en ny dyrkningskolbe for vekst.
Vekstmedium:
Endotelcellevekstmedium brukes til å dyrke HUVEC-celler. Mediet skiftes ut hver 2.–3. dag. HUVEC-celler kan brukes i opptil 8–10 passasjer.
Vekstbetingelser:
Den humane endotelcellelinjen (HUVEC) oppbevares i en fuktet inkubator med 5 % CO2 ved 37 °C.
Oppbevaring:
HUVEC-celler oppbevares vanligvis ved temperaturer under -150 °C i en fryser med ultralav temperatur eller i dampfasen av flytende nitrogen. Dette beskytter cellenes levedyktighet over lengre tid.
Fryseprosess og medium:
For å bevare HUVEC-celler anbefales frysemediet CM-1 eller CM-ACF. Generelt anbefales en langsom fryseprosess, da denne kun tillater en temperaturreduksjon på 1 °C per minutt, noe som forhindrer cellene fra å få et sjokk og opprettholder levedyktigheten.
Tineprosess:
For å tine frosne celler, plasser dem i et forvarmet vannbad ved 37 °C i 40 til 60 sekunder til det kun er en liten isklump igjen. Deretter tilsettes ferskt medium i cellene og sentrifugeres. Dette trinnet er nødvendig for å fjerne eventuelle rester av frysemediet fra cellene. Resuspender cellepelleten og overfør cellene til en ny kolbe med dyrkningsmedium.
Biosikkerhetsnivå:
Et laboratorium med biosikkerhetsnivå 1 er påkrevd for å håndtere HUVEC-cellekulturer på riktig måte.
Publisert: 2023 | Sist oppdatert: mai 2026
Fordeler og begrensninger
I likhet med andre humane cellelinjer har HUVEC-celler sine egne fordeler og begrensninger. I dette avsnittet vil vi se nærmere på noen viktige av disse som har betydelig innvirkning på bruken av dem i forskning.
Fordeler
De viktigste fordelene med HUVEC-cellene er:
-
Endotelcellemodell
Svært relevante modeller for å studere angiogenese, vaskulær biologi og sykdommer relatert til endotelfunksjon.
-
Enkel å dyrke
Relativt enkle å isolere fra menneskelige navlestrenger. Har ikke krevende krav til cellekultur og er enkle å vedlikeholde i forskningslaboratorier.
Begrensninger
Begrensningene knyttet til HUVEC-endotelcellelinjen er:
-
Begrenset levetid
HUVEC-celler har en begrenset levetid, vanligvis 8 til 10 passasjer, noe som er en begrensning for langvarige eksperimenter. De kan gjennomgå senesens når antall passasjer øker.
Anvendelser av HUVEC-celler i forskning
HUVEC-celler har et betydelig potensial for ulike anvendelser innen biomedisinsk forskning. Her vil vi fremheve noen viktige forskningsanvendelser av HUVEC-celler.
- Studier av hjerte- og karsykdommer: HUVEC-cellelinjen er en verdifull endotelcellemodell som gir innsikt i mekanismene bak hjerte- og karsykdommer som aterosklerose, trombose og hypertensjon. Forskere bruker disse cellene til å undersøke mekanismene bak endotelial dysfunksjon, oksidativt stress og betennelse. For eksempel brukte en studie gjennomført i 2020 HUVEC-celler og undersøkte at det lange ikke-kodende RNA-et TTTY15 spiller en sentral rolle i å lindre hypoksi-mediert vaskulær endotelcelleskade ved å målrette miRNA-186-5p-aksen [1].
- Kreftforskning: HUVEC-celler er ideelle for å studere vaskulær biologi. Derfor brukes de til å undersøke tumorangiogenese og interaksjoner mellom endotelceller. Dette hjelper forskere med å forstå hvordan svulster oppnår overskudd av blodtilførsel og sprer seg. For eksempel fant Hui Wang og kolleger ut at eksosomer frigitt av celler fra oralt plateepitelkarsinom (OSCC) øker miRNA-210-3p-nivåene og reduserer ephrin A3-ekspresjonen i HUVEC-celler og fremmer rørdannelse via regulering av PI3K/AKT-kaskaden, som bekreftet gjennom HUVEC-rørdannelsesanalyse [2].
- Legemiddeltesting: HUVEC-endotelceller brukes mye til legemiddeltesting. Forskere kan vurdere legemidlets effekt, toksisitet og potensielle bivirkninger av naturlige forbindelser, nanopartikler og andre terapeutiske midler in vitro ved hjelp av HUVEC-celler. For eksempel evaluerte en studie toksisiteten til sølvnanopartikler syntetisert fra Rheum ribes-ekstrakt ved hjelp av HUVEC-celler [3].
Publikasjoner om HUVEC-celler
Denne delen av artikkelen vil liste opp noen ofte siterte og interessante forskningspublikasjoner som omhandler HUVEC-celler.
Denne studien ble publisert i Comparative Biochemistry and Physiology Part C: Toxicology & Pharmacology (2019). Den fastslo at gamma-aminosmørsyre (GABA), en nevrotransmitter, hemmer H2O2-indusert oksidativt stress i HUVEC-celler; dermed kan det være et effektivt farmakologisk middel mot oksidativ skade-relaterte hjerte- og karsykdommer.
Denne studien i Biochemical and Biophysical Research Communications (2020) undersøkte hvordan østrogen regulerer en signaltransduser, glykoprotein130 (gp130) i HUVEC-celler.
Substratstivhet regulerte migrasjon og angiogenese-potensialet til A549-celler og HUVEC-celler
Denne forskningsartikkelen i Journal of Cellular Physiology (2017) undersøkte effektene av varierende substratstivhet på migrasjon og angiogenese hos endotelceller (A549 og HUVEC-celler). De utførte HUVEC-migrasjons- og HUVEC-angiogenese-assayer for å evaluere disse effektene.
Lysosomal avleiring av kobberoksid-nanopartikler utløser HUVEC-celledød
Denne forskningen i Biomaterials (2018) undersøker de potensielle mekanismene som er ansvarlige for toksisiteten til kobberoksid-nanopartikler i vaskulære endotelceller.
Denne studien i Medicine (2020) foreslo at et naturlig stoff, quercetin, undertrykker TNF-alfa-mediert HUVEC-apoptose og betennelse ved å regulere AP-1- og NF-kB-signalveiene.
6. Ressurser for HUVEC-cellelinjen: Protokoller, videoer og mer
Følgende er noen nettressurser om HUVEC-celler.
- HUVEC-transfeksjon: Denne lenken gir omfattende kunnskap om HUVEC-transfeksjon. Den inneholder blant annet informasjon om transfeksjonsreagenser og en protokoll for in vitro HUVEC-transfeksjon.
Følgende lenke inneholder protokollen for HUVEC-cellekultur.
- HUVEC-cellekultur: Dette dokumentet vil hjelpe deg med å lære HUVEC-cellekulturprotokoller for subkultivering og håndtering av kryokonserverte kulturer.
Referanser
- Zheng, J., et al., LncRNA TTTY15 regulerer hypoksi-indusert skade på vaskulære endotelceller ved å målrette miR-186-5p ved hjerte- og karsykdommer. European Review for Medical & Pharmacological Sciences, 2020. 24(6).
- Wang, H., et al., OSCC-ekosomer regulerer miR-210-3p som retter seg mot EFNA3 for å fremme angiogenese ved munnhulekreft gjennom PI3K/AKT-signalveien. BioMed research international, 2020. 2020.
- Unal, İ. og S. Egri, Biosyntese av sølvnanopartikler ved bruk av det vandige ekstraktet av Rheum ribes, karakterisering og evaluering av dets toksisitet på HUVECs og Artemia salina. Inorganic and Nano-Metal Chemistry, 2022: s. 1-14.