BxPC-3-cellelinje
BxPC-3 er en cellelinje for kreft i bukspyttkjertelen som er avledet fra mennesker. Den brukes i stor grad i kreftstudier. Forskere bruker hovedsakelig disse cellene til å studere biologien til kreft i bukspyttkjertelen, identifisere terapeutiske mål og utvikle legemidler mot kreft.
Denne artikkelen inneholder viktig informasjon om BxPC-3-cellelinjen som kan hjelpe deg i arbeidet med den. Hovedsakelig vil den diskutere:
- Generell informasjon og opprinnelse til BxPC-3-cellelinjen
- Dyrking av BxPC-3-celler
- BxPC-3 cellelinje: Fordeler og begrensninger
- Anvendelser av BxPC-3-celler i forskning
- Forskningspublikasjoner om BxPC-3-celler
- Ressurser for BxPC-3 cellelinje: Protokoller, videoer og mer
1. generell informasjon og opprinnelsen til BxPC-3-cellelinjen
Det er avgjørende å kjenne til opprinnelsen til en cellelinje for at den skal kunne brukes i forskning. Kjennskap til cellelinjens egenskaper, inkludert morfologi, cellestørrelse og ploidi, gjør det enklere og mer praktisk å bruke den. Her vil du lære om BxPC-3-cellenes opprinnelse og generelle egenskaper: Hva er BxPC-3-celler? Hva er BxPC-3-cellelinjen? Hva er opprinnelsen til BxPC-3-cellelinjen? Hva er BxPC-3-morfologien?
- BxPC-3, humane pankreaskarsinomceller ble avledet fra en 61 år gammel europeisk kvinne med adenokarsinom i bukspyttkjertelen i 1986. Disse cellene ble bekreftet tumorigeniske selv etter at pasienten hadde gjennomgått flere radio- og cellegiftbehandlinger. Den etablerte cellelinjen er derfor en uvurderlig modell for å studere kreftutvikling og -progresjon.
- BxPC-3-celler har en epitelcellelignende morfologi.
- Det modale kromosomnummeret for BxPC-3 er 59. Disse cellene har en homozygot delesjon på kromosom 18q, som koder for SMAD4/DPC4-proteinet. Dessuten mangler cellelinjen BxPC-3 kras-mutasjonen som er vanlig blant bukspyttkjertelsvulster. BxPC-3 braf-delesjon finnes også i disse bukspyttkjertelkreftcellene.
Hva er forskjellen mellom BxPC3 og PANC-1?
BxPC-3 PADC (pancreatic ductal adenocarcinoma) og PANC-1-celler er primære cellelinjer for bukspyttkjertelkreft med epitelmorfologi. De førstnevnte cellene har mer epitel-lignende egenskaper, mens de sistnevnte har mer mesenkymale attributter [1].
2.dyrking av BxPC-3-celler
BxPC-3-cellelinjen er mye brukt i kreftforskningslaboratorier. Du må kjenne til følgende viktige punkter for effektiv dyrking av denne cellelinjen for kreft i bukspyttkjertelen. Du vil lære mer om dette: Hva er fordoblingstiden for bxpc3? Hvordan dyrker du BxPC-3-cellelinjen?
Nøkkelpunkter for dyrking av BxPC-3-celler
|
Populasjonsdoblingstid: |
Fordoblingstiden for BxPC-3-celler varierer mellom 48 og 60 timer. |
|
Adherent eller i suspensjon: |
BxPC-3 er en adherent cellelinje. |
|
Delingsforhold: |
BxPC-3-celler subkultiveres i forholdet 1:2 til 1:4. Cellene vaskes med 1 x PBS og inkuberes med en passasjeløsning som kalles accutase. Etter 8-10 minutter tilsettes nytt medium til cellene, og cellene sentrifugeres. Pelleten resuspenderes igjen i mediet, og cellene helles over i et nytt dyrkingskar for vekst. |
|
Vekstmedium: |
RPMI 1640-medium brukes til dyrking av BxPC-3-cellelinjen. Det er supplert med 10 % føtalt bovint serum, 2,1 mM stabilt glutamin og 2,0 g/L NaHCO3 for å oppnå ideell cellevekst. Mediet bør skiftes ut 2 til 3 ganger per uke. |
|
Vekstbetingelser: |
BxPC-3-cellekulturer holdes i en 37 °C befuktet inkubator koblet til 5 % CO2-tilførsel. |
|
Oppbevaring: |
Frosne celler oppbevares vanligvis ved temperaturer under -150 °C eller i dampfasen av flytende nitrogen for å beskytte cellenes levedyktighet. |
|
Fryseprosess og medium: |
CM-1 eller CM-ACF kan brukes til å fryse BxPC-3-cellekulturer. En langsom fryseprosess som bare tillater et temperaturfall på 1 °C, følges for å hindre at cellene får sjokk. |
|
Tineprosess: |
Frosne BxPC-3-celler tines i et forhåndsinnstilt vannbad på 37 °C i 40 til 60 sekunder. Etter at en liten isklump er igjen, tilsettes cellene ferskt dyrkingsmedium og sentrifugeres for å fjerne elementer fra frysemediet. Deretter resuspenderes cellepelleten, og cellene doseres i kolben for vekst. |
|
Biosikkerhetsnivå: |
BxPC-3-cellekulturer holdes i laboratorier på biosikkerhetsnivå 1. |
3. bxPC-3 cellelinje: Fordeler og begrensninger
BxPC-3 er en velkjent cellelinje for adenokarsinom i bukspyttkjertelen, og den er forbundet med flere fordeler og begrensninger. De viktigste fordelene og ulempene med cellelinjen er listet opp her.
Fordeler og ulemper
De viktigste fordelene med BxPC-3-celler er
-
In vitro-modell for bukspyttkjertelkreft
BxPC-3-celler, som stammer fra pasienter med adenokarsinom i bukspyttkjertelen, har relevante egenskaper som gjør dem til en egnet modell for in vitro-studier av bukspyttkjertelkreft.
-
Tumorogen cellelinje
BxPC-3-celler har tumorogene egenskaper og kan danne svulster når de injiseres i nakne eller immunkompromitterte mus. Disse svulstene ligner på primære adenokarsinomsvulster i bukspyttkjertelen, noe som gjør BxPC-3-xenograftmodellen ideell for å studere kreftvekst og -progresjon.
Begrensninger
Begrensningene knyttet til BxPC-3-cellelinjen er
-
Krysskontaminering
BxPC-3-cellelinjen innebærer, som alle andre cellelinjer, en risiko for krysskontaminering. Forskere bør utvise forsiktighet og følge strenge protokoller for forebygging av kontaminering ved håndtering av disse cellene.
-
Langsom veksthastighet
BxPC-3-celler har en relativt langsom proliferasjonshastighet, med en fordoblingstid på mellom 48 og 60 timer. Denne egenskapen kan kreve lengre inkubasjonsperioder for spesifikke eksperimenter, noe som kan føre til forsinkelser i forskningen.
4. bruksområder for BxPC-3-celler i forskning
BxPC-3-celler har mange bruksområder innen kreftforskning. De vanligste bruksområdene er
- Forskning på kreft i bukspyttkjertelen: BxPC-3-celler imiterer adenokarsinom i bukspyttkjertelen og brukes derfor til å utforske de genetiske og molekylære mekanismene som ligger til grunn for tumorutvikling og -vekst. I tillegg avdekker forskerne nye biomarkører og terapeutiske mål ved hjelp av disse cellene. BxPC-3-celler uttrykker dessuten angiogenetiske faktorer i betydelig grad, f.eks. interleukin-8 (IL-8), prostaglandin E2 (PGE2) og vaskulær endotelial vekstfaktor (VEGF), noe som gjør dem egnet til å studere angiogenese. Angiogenese er en viktig prosess i forbindelse med kreftvekst og metastasering. En studie publisert i 2022 viste at overuttrykk av laminin-5 gamma-2 (LAMC2) i BxPC3 PDAC (duktalt adenokarsinom i bukspyttkjertelen) forsterker tumorigenesen via regulering av BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/ mTOR-signalveien [2].
- Oppdagelse og utvikling av legemidler: BxPC-3-cellelinjen fungerer som en uvurderlig modell for testing av legemidler mot kreft. Forskere undersøker potensielle legemidlers cytotoksiske, anti-metastatiske og apoptotiske effekter på BxPC3 PDAC. En studie utført av Alexandria Turner og kolleger i 2020 undersøkte de apoptotiske egenskapene til fruktekstrakter fra Elaeocarpus reticulatus i BxPC-3-pankreaskreftceller [3]. I 2020 ble det også utført forskning som undersøkte det krefthemmende potensialet til et metanolisk ekstrakt av en plante kalt Oxialis obtriangulata i BxPC-3-celler. Forskerne studerte også den cellemekanistiske ruten som planteekstraktet utøvde terapeutiske effekter gjennom [4].
5.forskningspublikasjoner om BxPC-3-celler
Denne delen viser noen av de mest siterte og interessante publikasjonene som omhandler BxPC-3-cellelinjen.
Licocoumarone induserer BxPC-3-pankreasadenokarsinomcelledød ved å hemme DYRK1A
Denne publikasjonen i Chemico-Biological Interactions (2020) undersøkte de apoptotiske effektene av et naturprodukt, licocoumarone, på BxPC-3 bukspyttkjertelkreftceller.
Denne forskningsartikkelen ble publisert i Anticancer Research (2022). Studien foreslo at hydroksyklorokin forårsaker BxPC3-celledød ved å hemme BCL-XL-genet.
Denne forskningen ble publisert i 2020 i Journal of Cellular Biochemistry. Studien viser at en naturlig forbindelse, salidroside, har krefthemmende effekt i BxPC-3-celler ved å regulere HIF-1α (hypoksiinduserbar faktor) og LOXL2-signalkaskaden.
Denne artikkelen i Biomedicine & Pharmacotherapy tyder på at ibrutinib kan brukes som et godt strålesensitiviserende middel hos pasienter med bukspyttkjertelkreft. In vitro-studier i BxPC-3-celler indikerer at ibrutinib reduserer EGFR-fosforyleringen i BxPC3 og uttrykket av pAKT og nedstrømsgener som oppreguleres av strålebehandling.
Chelidonin induserer apoptose via GADD45a-p53-regulering i humane bukspyttkjertelkreftceller
Denne studien i Integrative Cancer Therapies foreslår at et naturprodukt, chelidonin, utøver apoptotisk aktivitet i humane bukspyttkjertelceller BxPC-3 via regulering av BxPC3 p53- og GADD45a-signalering.
6. ressurser for BxPC-3 cellelinje: Protokoller, videoer og mer
BxPC-3-cellelinjen har mange fengslende fordeler som gjør den egnet for forskningsbruk. Mange nettressurser om BxPC-3-cellelinjen nevner håndtering, vedlikehold og transfeksjonsprotokolls.
- BxPC3-transfeksjon: Denne videoen er en trinnvis veiledning for å lære transfeksjonsprotokoll for BxPC-3-celler.
Denne delen av artikkelen inneholder noen lenker som forklarer protokoller for dyrking av BxPC3-celler.
- BxPC3-celledyrking: Dette nettstedet hjelper deg med å lære protokoller for subkulturering og håndtering av kryopreserverte og proliferative BxPC-3-kulturer.
Referanser
- Kim, Y., et al., Comparative proteomic profiling of pancreatic ductal adenocarcinoma cell lines. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Overekspresjon av laminin-5 gamma-2 fremmer tumorigenese av adenokarsinom i bukspyttkjertelen gjennom EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR-kaskaden. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al., Elaeocarpus reticulatus fruktekstrakter reduserer levedyktigheten og induserer apoptose i kreftceller i bukspyttkjertelen in vitro. Molekylærbiologiske rapporter, 2020. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Anti-kreftpotensialet til Oxialis obtriangulata i kreftceller i bukspyttkjertelen gjennom regulering av ERK / Src / STAT3-mediert vei. Molekyler, 2020. 25(10): p. 2301.