A431-celler - dybdeanalyse av epidermoide karsinomceller i dermatologisk forskning
A431 er en human epidermoid kreftcellelinje. Den er mye brukt i biomedisinsk forskning, hovedsakelig innen kreftbiologi, immunonkologi og toksikologiske studier. I tillegg overuttrykker A431-celler EGFR (epidermal vekstfaktorreseptor), og brukes derfor som en verdifull in vitro-modell for å studere cellesyklusen og kreftassosierte cellesignaleringsveier.
Denne artikkelen vil forklare det grunnleggende om A431-kreftcellelinjen. Du vil lære følgende:
- A431-celler: Generelle egenskaper og opprinnelse
- A431-cellelinjen: Informasjon om dyrking
- Fordeler og ulemper med A431-cellelinjen
- Forskningsmessige anvendelser av A431-celler
- Forskningspublikasjoner med A431-celler
- Ressurser for A431-cellelinje: Protokoller, videoer og mer
1. A431-celler: Generelle egenskaper og opprinnelse
Denne delen av artikkelen vil hjelpe deg med å finne generell informasjon om A431-cellelinjen som du trenger å vite før du arbeider med den. For eksempel, hva er opprinnelsen til Hva er A431-cellelinjen? Hva er A431-cellelinjens egenskaper? Hva er morfologien til A431-celler? Hvor kommer A431-cellene fra?
- A431, en human hudkreftcellelinje, ble hentet fra epidermis fra en 85 år gammel kvinnelig epidermoid karsinompasient [1]. Den ble etablert av D.J. Giard og medarbeidere, som har utviklet mange andre cellelinjer fra solide svulster.
- A-431-celler har epitelmorfologi. De aggregerer og danner celleklynger.
- Hudkreftcellelinjen a431 er hypertriploid. Det modale kromosomnummeret for denne cellelinjen er 74, noe som forekommer i rundt 36 % av cellene. Høyere ploidier finnes også i ca. 1 % av en cellepopulasjon.
2.a431 cellelinje: Informasjon om dyrking
Å kjenne til kravene og prosedyrene for dyrking av en cellelinje kan gjøre håndteringen av den problemfri. Denne delen av artikkelen vil hjelpe deg med å lære viktige punkter for dyrking av A431-cellelinjen. For eksempel vil du vite: Hva er fordoblingstiden for A431-celler? Er A431 kreftcellelinje adherent? Hvilket vekstmedium brukes til A431?
Nøkkelpunkter for dyrking av A431-celler
|
Fordoblingstid: |
Populasjonsdoblingstiden for A431-celler varierer fra 80 til 100 timer. |
|
Adherent eller i suspensjon: |
A431 er en adherent cellelinje. |
|
Utsåingstetthet: |
1 x104 celler/cm2 celletetthet er ideell for A431-cellelinjen. Det tar nesten 4 dager før cellene blir konfluente ved denne tettheten. Adherente celler vaskes med PBS (1x) og inkuberes med Accutase-passiveringsløsning. Etterpå ble cellene resuspendert i et kulturmedium og sentrifugert. De høstede cellene ble resuspendert igjen og fordelt i nye kolber for vekst. |
|
Vekstmedium: |
DMEM-medium supplert med 10 % føtalt bovint serum, 4,5 g/l glukose, 1,0 mM natriumpyruvat, 1,5 g/l NaHCO3 og 4 mM L-glutamin brukes til dyrking av A431-cellelinjen. Mediet bør skiftes ut hver 2. til 3. dag i uken. |
|
Vekstbetingelser: |
A431-kreftceller dyrkes i en befuktet inkubator utstyrt med en 5 % CO2-kilde ved 37 °C temperatur. |
|
Oppbevaring: |
Cellelinjen kan oppbevares i en elektrisk fryser eller i dampfasen av flytende nitrogen ved temperaturer under -150 °C, da det bidrar til å beskytte cellenes levedyktighet. |
|
Fryseprosess og medium: |
CM-1 eller CM-ACF er de to sterkt anbefalte frysemediene som brukes til A431-celler. Cellene fryses ved hjelp av en langsom frysemetode som gjør at temperaturen bare synker med 1 grad per minutt. |
|
Tineprosessen: |
Frosne A431-celler tines i et 37 °C varmt vannbad som inneholder et antimikrobielt middel i 40 til 60 sekunder. Når det bare er en liten isklump igjen, tilsettes cellene med dyrkingsmedium og sentrifugeres. De høstede cellene resuspenderes og helles over i dyrkingskolber for vekst. |
|
Biosikkerhetsnivå: |
Biosikkerhetsnivå én anbefales for håndtering og vedlikehold av A431-kulturer. |
3.fordeler og ulemper med A431-cellelinjen
A431-cellelinjen har en rekke særtrekk og byr på flere fordeler og ulemper. Nedenfor har vi oppsummert noen av disse.
Fordeler og ulemper
De viktigste fordelene med A431-kreftcellelinjen er
|
Overuttrykk av EGFR |
A431-celler overuttrykker epidermal vekstfaktorreseptor (EGFR). De fungerer som en positiv kontroll for å studere EGFR-signalering og dens betydning i kreft. De brukes også til å evaluere nye kreftbehandlinger. |
|
Tumorigenisitet |
A431-celler er tumorigeniske og har evnen til å danne svulster. De kan brukes til å utvikle xenograftmodeller for kreft, som er verdifulle verktøy for å studere tumorvekstdynamikk og vurdere nye kreftbehandlinger. |
Ulemper
Ulempene med A431-celler er
|
Genetiske abnormiteter |
A431 er en kreftcellelinje med genetiske mutasjoner og forandringer som kan skille den fra de opprinnelige tumoregenskapene. |
|
Mikrobiell kontaminering |
A431 er utsatt for mikrobiell kontaminering, først og fremst bakteriell kontaminering. Ved å opprettholde aseptiske standardbetingelser for dyrking kan man imidlertid forhindre slik kontaminering i A431-cellekulturer. |