A431-celler - dybdeanalyse av epidermoide karsinomceller i dermatologisk forskning

A431 er en human epidermoid kreftcellelinje. Den er mye brukt i biomedisinsk forskning, hovedsakelig innen kreftbiologi, immunonkologi og toksikologiske studier. I tillegg overuttrykker A431-celler EGFR (epidermal vekstfaktorreseptor), og brukes derfor som en verdifull in vitro-modell for å studere cellesyklusen og kreftassosierte cellesignaleringsveier.

Denne artikkelen vil forklare det grunnleggende om A431-kreftcellelinjen. Du vil lære følgende:

  1. A431-celler: Generelle egenskaper og opprinnelse
  2. A431-cellelinjen: Informasjon om dyrking
  3. Fordeler og ulemper med A431-cellelinjen
  4. Forskningsmessige anvendelser av A431-celler
  5. Forskningspublikasjoner med A431-celler
  6. Ressurser for A431-cellelinje: Protokoller, videoer og mer

1. A431-celler: Generelle egenskaper og opprinnelse

Denne delen av artikkelen vil hjelpe deg med å finne generell informasjon om A431-cellelinjen som du trenger å vite før du arbeider med den. For eksempel, hva er opprinnelsen til Hva er A431-cellelinjen? Hva er A431-cellelinjens egenskaper? Hva er morfologien til A431-celler? Hvor kommer A431-cellene fra?

  • A431, en human hudkreftcellelinje, ble hentet fra epidermis fra en 85 år gammel kvinnelig epidermoid karsinompasient [1]. Den ble etablert av D.J. Giard og medarbeidere, som har utviklet mange andre cellelinjer fra solide svulster.
  • A-431-celler har epitelmorfologi. De aggregerer og danner celleklynger.
  • Hudkreftcellelinjen a431 er hypertriploid. Det modale kromosomnummeret for denne cellelinjen er 74, noe som forekommer i rundt 36 % av cellene. Høyere ploidier finnes også i ca. 1 % av en cellepopulasjon.

Svulst som vokser under huden og infiltrerer det underliggende vevet.

2.a431 cellelinje: Informasjon om dyrking

Å kjenne til kravene og prosedyrene for dyrking av en cellelinje kan gjøre håndteringen av den problemfri. Denne delen av artikkelen vil hjelpe deg med å lære viktige punkter for dyrking av A431-cellelinjen. For eksempel vil du vite: Hva er fordoblingstiden for A431-celler? Er A431 kreftcellelinje adherent? Hvilket vekstmedium brukes til A431?

Nøkkelpunkter for dyrking av A431-celler

Fordoblingstid:

Populasjonsdoblingstiden for A431-celler varierer fra 80 til 100 timer.

Adherent eller i suspensjon:

A431 er en adherent cellelinje.

Utsåingstetthet:

1 x104 celler/cm2 celletetthet er ideell for A431-cellelinjen. Det tar nesten 4 dager før cellene blir konfluente ved denne tettheten. Adherente celler vaskes med PBS (1x) og inkuberes med Accutase-passiveringsløsning. Etterpå ble cellene resuspendert i et kulturmedium og sentrifugert. De høstede cellene ble resuspendert igjen og fordelt i nye kolber for vekst.

Vekstmedium:

DMEM-medium supplert med 10 % føtalt bovint serum, 4,5 g/l glukose, 1,0 mM natriumpyruvat, 1,5 g/l NaHCO3 og 4 mM L-glutamin brukes til dyrking av A431-cellelinjen. Mediet bør skiftes ut hver 2. til 3. dag i uken.

Vekstbetingelser:

A431-kreftceller dyrkes i en befuktet inkubator utstyrt med en 5 % CO2-kilde ved 37 °C temperatur.

Oppbevaring:

Cellelinjen kan oppbevares i en elektrisk fryser eller i dampfasen av flytende nitrogen ved temperaturer under -150 °C, da det bidrar til å beskytte cellenes levedyktighet.

Fryseprosess og medium:

CM-1 eller CM-ACF er de to sterkt anbefalte frysemediene som brukes til A431-celler. Cellene fryses ved hjelp av en langsom frysemetode som gjør at temperaturen bare synker med 1 grad per minutt.

Tineprosessen:

Frosne A431-celler tines i et 37 °C varmt vannbad som inneholder et antimikrobielt middel i 40 til 60 sekunder. Når det bare er en liten isklump igjen, tilsettes cellene med dyrkingsmedium og sentrifugeres. De høstede cellene resuspenderes og helles over i dyrkingskolber for vekst.

Biosikkerhetsnivå:

Biosikkerhetsnivå én anbefales for håndtering og vedlikehold av A431-kulturer.

A-431-sfæroider ved ulike celletettheter.

3.fordeler og ulemper med A431-cellelinjen

A431-cellelinjen har en rekke særtrekk og byr på flere fordeler og ulemper. Nedenfor har vi oppsummert noen av disse.

Fordeler og ulemper

De viktigste fordelene med A431-kreftcellelinjen er

Overuttrykk av EGFR

A431-celler overuttrykker epidermal vekstfaktorreseptor (EGFR). De fungerer som en positiv kontroll for å studere EGFR-signalering og dens betydning i kreft. De brukes også til å evaluere nye kreftbehandlinger.

Tumorigenisitet

A431-celler er tumorigeniske og har evnen til å danne svulster. De kan brukes til å utvikle xenograftmodeller for kreft, som er verdifulle verktøy for å studere tumorvekstdynamikk og vurdere nye kreftbehandlinger.

Ulemper

Ulempene med A431-celler er

Genetiske abnormiteter

A431 er en kreftcellelinje med genetiske mutasjoner og forandringer som kan skille den fra de opprinnelige tumoregenskapene.

Mikrobiell kontaminering

A431 er utsatt for mikrobiell kontaminering, først og fremst bakteriell kontaminering. Ved å opprettholde aseptiske standardbetingelser for dyrking kan man imidlertid forhindre slik kontaminering i A431-cellekulturer.


4. Anvendelser av A431-celler i forskning

A431-cellelinjen er mye brukt i kreftforskning. Her er noen lovende bruksområder for denne hudkreftcellelinjen listet opp. Kreftbiologi: Hudkreftcellelinjen A431 er et godt forskningsverktøy for å undersøke cellulære og molekylære mekanismer som driver kreftvekst, utvikling, metastasering og invasjon.
Forskere har brukt denne cellelinjen til å studere signalveiene som er involvert i ulike prosesser i kreftceller. For eksempel viste en studie fra 2018 at PI3K/AKT/mTOR-signalveien er involvert i spredning av kreftceller, og at inhibering av denne signalveien induserer apoptose i A431-celler fra hudkreft [2]. En annen studie rapporterte også at PI3K/AKT/mTOR-signalveien bidrar til metastasering av hudkreftceller og epitelial til mesenkymal overgang (EMT), noe som indikerer at den spiller en avgjørende rolle i utvikling og progresjon av kreft [3]. Testing og evaluering av legemidler: A431-celler brukes til å evaluere effekten og virkningen av potensielle legemidler mot kreft. Forskere har undersøkt effekten av legemidler på kreftcellers spredning, metastase, invasjon og apoptose ved å gjennomføre flere laboratorieeksperimenter - forskning utført av Nurhidayah Ab. Rahim og kollegene brukte A431-celler og vurderte det terapeutiske potensialet til biogent syntetiserte sølvnanopartikler fra Alstonia angustiloba-planten i 2022. Funnene viste at angustiloba-AgNPer hadde antiproliferative effekter på plateepitelkarsinomceller i huden [4]. Xenotransplantasjonsmodeller for svulster: A431-cellelinjen er tumorigenisk og kan danne svulster når den inokuleres i en musemodell. Den er derfor et nyttig verktøy for å utvikle xenotransplantasjonsmodeller for mus for å undersøke kreftbiologi in vivo. Flere studier har brukt A431-kreftcellelinjen til å utvikle xenotransplantasjonsmodeller. Yu Jin Lim og hans team utviklet for eksempel en xenotransplantasjonsmodell for hudsvulster ved hjelp av A431-celler for å vurdere de antitumor- og strålesensibiliserende effektene av eksogen epidermal vekstfaktor (EGF) in vivo [5]. 5. Forskningspublikasjoner med A431-celler Her er noen viktige forskningspublikasjoner med A431-cellelinjen for hudkreft. Effekten av biopolymeriske PVA-AuNPs og PCL-Curcumin-belastede elektrospunne nanofibre og deres antikreftaktivitet mot A431-cellelinjen for hudkreft Denne artikkelen ble publisert i Materials Today Communications i 2020. Studien evaluerte kreftpotensialet til poly-ε-kaprolakton-kurkuminbelastede elektrospunne nanofibre og polyvinylalkohol-AuNPs mot A431-kreftceller. miRNA-221 fremmer progresjon av kutan plateepitelkarsinom ved å målrette mot PTEN Denne studien publisert i Cellular & Molecular Biology Letters (2019) foreslo at mikroRNA-221 spiller en onkogen rolle i kutan plateepitelkarsinom ved å målrette mot PTEN-genet. Soppvincristin fra Eutypella spp-CrP14 isolert fra Catharanthus roseus induserer apoptose i human plateepitelkarsinomcellelinje A431 Denne forskningen i BMC Complementary Medicine and Therapies (2016) tyder på at vincristin, en sekundær metabolitt isolert fra en sopp, Eutypella spp - CrP14, induserer apoptose i A431-celler. Overuttrykk av CDC42SE1 i A431-celler reduserte celleproliferasjon ved å hemme Akt-stien Denne studien ble publisert i 2019 i tidsskriftet Cells. Denne forskningen foreslår CDC42SE1-genet som en viktig biomarkør for progresjon av hudkreft, ettersom nedregulering av genet fremmer tumorigenese. Metformin hemmer proliferasjonen av A431-celler ved å modulere PI3K/Akt-signalveien Denne forskningen ble publisert i Experimental and therapeutic medicine i 2015. Den foreslo at metformin undertrykte proliferasjonen av hudkreftcellelinjen a431 ved å regulere PI3K/Akt-signalveien. 6. Ressurser for A431-cellelinjen: Protokoller, videoer og mer Her er noen nettressurser som omhandler hudkreftcellelinjen A431. Transfeksjon av A-431-celler: Denne lenken gir en trinnvis veiledning i transfeksjon av A431-kreftceller. Følgende lenke inneholder informasjon om cellekultur for A431-celler. A431 kreftcellelinje: Denne lenken inneholder nødvendig informasjon om celledyrking av A431-cellelinjen. Den inneholder blant annet informasjon om dyrkningsmedier, celletetthet, håndtering av kryopreserverte og proliferative kulturer osv: Dette nettstedet inneholder en kort protokoll for dyrking av A431-cellelinjen.

Referanser

Quadri, M., et al, Investigating Cutaneous Squamous Cell Carcinoma in vitro and in vivo: Novel 3D Tools and Animal Models. Front Med (Lausanne), 2022. 9: p. 875517.
Zeng, N., et al., Anticanceraktivitet av koffeinsyre n-butylester mot A431 hudkarsinomcellelinje skjer via induksjon av apoptose og inhibering av mTOR / PI3K / AKT-signalveien Retraction in / 10.3892 / mmr. 2021.12011.
Molekylærmedisinske rapporter, 2018. 17(4): p. 5652-5657.
Rahaman, A., et al., Eukalyptol retter seg mot PI3K / Akt / MTOR-banen for å hemme metastase av hudkreft.
Karsinogenese, 2022. 43(6): s. 571-583. Rahim, N.A., et al., Undersøkelse av antiproliferative mekanismer av Alstonia angustiloba-sølv nanopartikler i plateepitelkarsinom i huden (A431 cellelinje).
Journal of Molecular Structure, 2022. 1250: s. 131814. Lim, Y.J., et al., Tumorvekstundertrykkelse og forbedret radiorespons av en eksogen epidermal vekstfaktor i xenograftmodeller med mus med A431-celler.
Cancer Research and Treatment: Official Journal of Korean Cancer Association, 2015. 47(4): p. 921-930.


Vi har oppdaget at du befinner deg i et annet land eller bruker et annet språk i nettleseren enn det som er valgt for øyeblikket. Vil du godta de foreslåtte innstillingene?

Lukk