BEWO-cellelinje
BeWo er en cellelinje avledet fra humant koriokarsinom som er mye brukt i biomedisinsk forskning. Den fungerer som en verdifull in vitro-modell for å utforske den komplekse prosessen med utvikling av morkaken og syncytialisering av humane trofoblaster. Forskere bruker også disse cellene til å studere trofoblastcellers atferd, hormonproduksjon og transport av stoffer gjennom morkaken. I tillegg har BeWo-celler også anvendelser innen toksikologi, infeksjon og studier av smitteoverføring.
Denne artikkelen omfatter grunnleggende kunnskap om BeWo-cellene som kan hjelpe deg med å håndtere dem i din forskning. Den vil omfatte:
- Generelle egenskaper og opprinnelse til BeWo-celler
- BeWo-cellelinje: Informasjon om dyrking
- Fordeler og ulemper ved BeWo-cellelinjen
- Forskningsanvendelser av BeWo-celler
- Forskningspublikasjoner om BeWo-celler
- Ressurser for BeWo-cellelinjen: Protokoller, videoer og mer
Generelle egenskaper og opprinnelse til BeWo-celler
Forhåndskunnskap om en cellelinjes opprinnelse og generelle egenskaper er avgjørende for bruken av den i din forskning. Denne delen av artikkelen utforsker BeWo-cellelinjens opprinnelse, karakteristiske trekk og mye mer. Her vil du lære: Hva er BeWo-koriokarsinomcellelinjen? Hva er BeWo-syncytialisering? Hvor kommer BeWo-celler fra? Hva er BeWo-cellens morfologi? Hva er BeWo-ploidien?
- Placentacellelinjen BeWo stammer fra et ondartet gestasjonelt koriokarsinom i en mannlig fosterplacenta i 1968 [1]. Den fungerer dermed som en uvurderlig modell for placentaforskning.
- BeWo-celler har en epitel-lignende morfologi.
- BeWo-celler er relativt små, med en størrelse på mellom 20 og 30 µm [2].
- BeWo-celler har en stabil karyotype. Stamlinjenummeret deres er hypotetraploid. Det modale kromosomtall for BeWo-celler er 86. Det kan variere fra 71 til 178.
- BeWo-celler produserer flere hormoner, dvs. humant korionisk somatomammotropin, humant korionisk gonadotropin (hCG) og steroidhormoner.
- BeWo-celler uttrykker molekylære markører, inkludert CK 7, E-kadherin og VE-kadherin.
B30-underlinje
B30 er en sublinje av BeWo-celler. Den brukes til å undersøke opptak og transport av næringsstoffer. Dette tilskrives deres kraftige vekst på porøse membraner.
BeWo og JEG-3
BeWo- og JEG-3-cellelinjer er avledet fra koriokarsinomer og brukes i forskning på morkaken. BeWo-celler produserer hormoner i lavere nivåer enn JEG-3, for eksempel humant koriongonadotropin (hCG) og østradiol.
BeWo-cellelinje: Informasjon om dyrking
Det kan være vanskelig å opprettholde en cellekultur hvis man ikke kjenner til viktige detaljer. For eksempel: Hva er doblingstiden for BeWo? Hva er BeWo-cellemedium? Hvordan dyrker man BeWo-cellelinjen? Og hvordan fryser man ned BeWo-celler?
Viktige punkter for dyrking av BeWo-celler
Fordoblingstid:
Fordoblingstiden for BeWo-cellene er omtrent 30 timer.
Adherente eller i suspensjon:
BeWo er en vedheftende cellelinje.
Celleutsåingstetthet:
Den anbefalte utsåingstettheten for BeWo-celler er 1 x 10⁴ celler/cm². Før utsåing fjernes gammelt dyrkningsmedium fra cellene, og cellene skylles med 1× PBS. Deretter tilsettes Accutase (passasjeløsning), og cellene inkuberes i 8 til 10 minutter ved romtemperatur. Deretter tilsettes løsrevne celler til dyrkningsmediet og sentrifugeres. De høstede cellene resuspenderes deretter og helles over i en ny kolbe.
Vekstmedium:
Ham's F12K-medium som inneholder 10 % FBS, 2,0 mM L-glutamin, 2,0 mM natriumpyruvat og 2,5 g/L NaHCO₃ brukes til å dyrke BeWo-celler. BeWo-cellemediet bør skiftes ut 2 til 3 ganger per uke.
Vekstbetingelser:
BeWo-celler holdes i en fuktet inkubator innstilt på 37 grader Celsius og med en CO₂-tilførsel på 5 %.
Oppbevaring:
Frosne BeWo-celler oppbevares ved temperaturer under -150 °C i en elektrisk ultralavtemperaturfryser eller i dampfasen av flytende nitrogen.
Fryseprosess og medium:
Det anbefales å fryse BeWo-celler i CM-1- eller CM-ACF-frysemedium. Cellene fryses ved hjelp av en langsom frysemetode. Denne metoden tillater kun en temperaturnedgang på 1 grad per minutt, noe som forhindrer at cellene utsettes for sjokk og dermed beskytter cellenes levedyktighet.
Tineprosess:
Frosne celler tines ved å senke dem ned i et forhåndsinnstilt vannbad på 37 °C i 40 til 60 sekunder, til det kun gjenstår en liten isklump. Deretter tilsettes ferskt vekstmedium, og cellene sentrifugeres for å fjerne komponentene i frysemediet. Den oppsamlede cellepelleten resuspenderes og overføres til en kulturkolbe for vekst.
Biosikkerhetsnivå:
Et laboratorium med biosikkerhetsnivå 1 er nødvendig for håndtering og vedlikehold av BeWo-cellekulturer.
Publisert: 2023 | Sist oppdatert: mai 2026
Fordeler og ulemper ved BeWo-cellelinjen
BeWo-celler har unike egenskaper og kommer med spesifikke fordeler og ulemper. I denne delen vil vi utforske noen av de mest bemerkelsesverdige.
Fordeler
De viktigste fordelene med BeWo-koriocarcinom-cellelinjen er:
-
In vitro-modell for placentaceller
BeWo-celler gir en in vitro-modell for å studere trofoblastcellers atferd og syncytiodannelse i morkaken, og replikerer prosesser som er vanskelige å observere in vivo.
-
Hormonproduksjon
BeWo-celler utskiller hormoner, som hCG og placentalaktogen, noe som gjør dem verdifulle for studier av hormonregulering og forskning innen reproduksjonsbiologi.
Ulemper
Ulempene ved BeWo-trofoblastceller er:
-
Kreftcellelinje
BeWo-celler stammer fra koriokarsinom, som er en svulst i morkaken. Denne opprinnelsen representerer kanskje ikke fullt ut normal morkakecellefunksjon.
Forskningsanvendelser av BeWo-celler
BeWo-cellelinjen brukes mye i forskning på morkaken. Her nevnes noen spesifikke anvendelser av denne cellelinjen:
- Forskning på morkaken og graviditet: BeWo-celler spiller en sentral rolle i forskning på morkaken og graviditet. Forskere bruker for eksempel disse cellene til å studere transporten av stoffer, inkludert medisiner, næringsstoffer og giftstoffer, gjennom morkakebarrieren. I tillegg undersøker de også produksjonen og reguleringen av hormoner, inkludert humant koriongonadotropin (hCG), placentalaktogen og steroidhormoner. Dette er viktig for å forstå hormonelle endringer under graviditet. Forskning utført i 2018 undersøkte effekten av bromerte flammehemmere (BFR) på aktiviteten til sulfotransferase i den humane trofoblastiske cellelinjen (BeWo). Dette enzymet er involvert i reguleringen av de intracellulære nivåene av skjoldbruskkjertelhormonet [3].
- Forskning på infeksjoner og sykdommer: BeWo-celler brukes også til å undersøke samspillet mellom patogener og placentaceller. Denne forskningen er verdifull for å forstå sykdommer som kan overføres fra mor til foster og for å utvikle strategier for å beskytte fosterets helse. Dessuten hjelper denne cellelinjen forskere med å undersøke komplikasjoner som oppstår under svangerskapet, slik som preeklampsi. For eksempel benyttet en studie utført av Michalina Bralewska i 2023 BeWo-trofoblastcellemodellen og fant at både kromogranin A (CgA) og peptidet avledet fra det, catestatin (CST), kan spille en rolle i den komplekse prosessen med preeklampsi (PE)-patogenese [4]. Videre undersøkte en annen studie trichosanthins potensial mot kreft ved hjelp av BeWo-koriokarsinomcellelinjen. Forskningen gjorde også en ekstra innsats for å oppdage biomarkører ved å utføre komparativ proteomisk analyse før og etter eksperimentet [5].
5. Forskningspublikasjoner om BeWo-celler
Her er noen viktige forskningspublikasjoner om BeWo-trofoblastcellene.
Denne studien i Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) foreslo at AMPK-signalering aktiverer mitofagi i BeWo-trofoblastceller via FUNDC1- og PRKN-faciliterte mitofagiveier. Som et resultat bidrar mitofagi til å opprettholde ATP-produksjon og mitokondriell membranpotensial.
Etylparaben induserer apoptotisk celledød i humane BeWo-celler fra morkaken via Caspase-3-banen
Denne artikkelen ble publisert i Animal Cells and Systems (2020). Studien foreslo at etylparaben medierer BeWo-cellers apoptose via regulering av caspase 3-banen.
Denne studien i tidsskriftet Drug Metabolism and Disposition (2023) benyttet placentacellelinjer, inkludert BeWo, JAR, JEG-3 og HTR-8/SVneo, for å undersøke avsetningen av xenobiotika og steroider i celler.
Denne forskningsartikkelen i International Journal of Molecular Medicine (2020) foreslo at Apelin, liganden til APJ-reseptoren, fremmer BeWo-celleproliferasjon gjennom APJ- og ERK1/2-, stat3- og AMPK-signalering. Dermed kan det være et essensielt adipokin som regulerer utviklingen av morkaken.
Denne studien i Epilepsia (2021) undersøkte effekten av foster næringsstoffer og antiepileptika på kolintransportører i den menneskelige trofoblastcellelinjen BeWo.
Ressurser for BeWo-cellelinjen: Protokoller, videoer og mer
Her er noen online ressurser tilgjengelig om BeWo-cellene:
- In vitro-transfeksjon: Denne videoen vil hjelpe deg med å lære protokollen for in vitro-plasmid-DNA-transfeksjon for vedheftende celler.
Følgende lenke inneholder informasjon om cellekultur for BeWo-celler:
- BeWo-celler: Dette nettstedet inneholder viktig informasjon om cellekulturer for BeWo-cellelinjen. Dette inkluderer informasjon om cellemedier og dyrkingsforhold. Det har også protokoller for subkultivering og håndtering av kryokonserverte og proliferative kulturer.
Referanser
- Weber, M., et al., Cytogenomics of six human trophoblastic cell lines. Placenta, 2021. 103: s. 72-75.
- Kolokol'tsova, T., et al., Characteristics of trophoblasts in long-term culture. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2017. 164: s. 259–265.
- Leonetti, C.P., C.M. Butt og H.M. Stapleton, Forstyrrelse av skjoldbruskhormonsulfotransferaseaktivitet ved bromerte flammehemmende kjemikalier i den humane koriokarsinom-placentacellelinjen, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: s. 81–88.
- Bralewska, M., T. Pietrucha og A. Sakowicz, Reduksjon i CgA-avledet CST-proteinnivå i HTR-8/SVneo- og BeWo-trofoblastiske cellelinjer forårsaket av preeklampsi-miljøet. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): s. 7124.
- Hu, Y., et al., Sammenlignende proteomisk analyse av tilsetning av legemidlet trikosantin til BeWo-cellelinjen. Molecules, 2022. 27(5): s. 1603.