U87MG šūnas - Glioblastomas pētījumi, izmantojot U87MG, un to ietekme uz smadzeņu vēža pētījumiem
Cilvēka primārā glioblastomas šūnu līnijaU87MG tiek plaši izmantota bioloģiskajos pētījumos. Īpaši šīs šūnas izmanto neirozinātnēs un imūnonkoloģijā.
U-87 MG šūnu līnijas vispārīgās īpašības un izcelsme
Šajā iedaļā tiks aplūkota U-87 šūnu līnijas izcelsme un vispārīgās īpašības. Jūs uzzināsiet, kas ir U-87 MG šūnas? No kurienes nāk U87 šūnas? Kāda ir U-87 MG pilna forma? Cik lielas ir U87 šūnas? Kāda ir U87 šūnu līnijas morfoloģija?
- U87 šūnu līnija ir glioblastomas, astrocitomas šūnu līnija. Tā tika izveidota 1966. gadā Upsalas Universitātē. Šūnas tika iegūtas no 44 gadus veca baltādaina vīrieša, kas slimoja ar glioblastomas slimību. Šo šūnu līniju oficiāli sauc par U 87 MG, kas nozīmē Uppsala 87 Malignant Glioma.
- U 87 MG šūnām ir epitēlijšūnu morfoloģija.
- U 87 MG šūnu diametrs ir no 12 līdz 14 µm.
- Šī cilvēka glioblastomas šūnu līnija ir hipodiploīda, un aptuveni 48 % šūnu populācijas modālais hromosomu skaits ir 44 hromosomas. Tomēr 5,9 % šūnu populācijas ir arī lielāki ploidi.
U-87 MG šūnu kultivēšanas informācija
Pirms darba ar U-87 MG šūnām, jums vajadzētu uzzināt par šādiem galvenajiem šo glioblastomas šūnu kultivēšanas aspektiem. Īpaši jāzina: Kāds ir U 87 MG šūnu populācijas dubultošanās laiks? Kādu barotni izmanto U87 šūnu kultivēšanai? Kāds ir U 87 MG šūnu līnijas izsējas blīvums?
Galvenie punkti U 87 MG šūnu kultivēšanai
|
Populācijas dubultošanās laiks: |
U 87 MG šūnu populācijas dubultošanās laiks ir 18-38 stundas. |
|
Adhēzijas vai suspensijas veidā: |
U 87 MG ir adherentu šūnu līnija. Šūnām ir iegarena forma, un tās aug kā monoslāņi. |
|
Sēšanas blīvums: |
Glioblastomas šūnu līniju U 87 MG ieteicams sēt ar šūnu blīvumu 1 x104 šūnas/cm2. Adherētās U 87 šūnas mazgā, izmantojot 1 x PBS, un inkubē ar Accutase šķīdumu. Pēc tam disociētās šūnas centrifugē un reģenerē. Šūnas uzmanīgi resuspendē un pievieno jaunām kolbām ar barotni. |
|
Augšanas barotne: |
U 87 MG šūnu līniju kultivē EMEM (Eagle's minimal essential medium), kas papildināts ar 1,0 g/l L-glikozes, 2,0 mM L-glutamīna, 2,2 g/l NaHCO3, 1 % NEAA, 1 mM nātrija piruvāta un 10 % FBS šķīdumu. Barotne jāatjauno ik pēc 2 līdz 3 dienām. |
|
Augšanas apstākļi: |
U-87 MG šūnām optimālai augšanai nepieciešams mitrināts inkubators ar 5 % CO2 pieplūdi un 37 °C temperatūru. |
|
Uzglabāšana: |
Lai saglabātu maksimālu glioblastomas šūnu dzīvotspēju, U87 šūnas glabā vai nu šķidrā slāpekļa tvaika fāzē, vai arī temperatūrā, kas zemāka par -150 °C. |
|
Sasaldēšanas process un vide: |
U 87 MG šūnu sasaldēšanai ir piemērota CM-1 vai CM-ACF sasaldēšanas barotne. Ieteicams lēns sasaldēšanas process, jo tas pasargā šūnas no jebkāda šoka un aizsargā šūnu dzīvotspēju. |
|
Atkausēšanas process: |
U-87 MG šūnu līnijas sasaldētos flakonus atkausē 37 °C ūdens vannā. Šūnām pievieno barotni, atkārtoti suspendē un izšķīdina, lai kultivētu jaunās kolbās. Pretēji tam U87 šūnas var centrifugēt, lai atdalītu sasaldēšanas barotni, un tad kultivēt. |
|
Bioloģiskās drošības līmenis: |
Darbam ar U 87 MG šūnu kultūrām ir nepieciešams 1. bioloģiskās drošības līmenis. |
U-87 MG šūnu priekšrocības un trūkumi
Kad mēs domājam par šūnu līniju, pirmais, kas mums nāk prātā, ir jautājums: kādas ir U-87 MG šūnu izmantošanas priekšrocības? Kādi ir U87 šūnu trūkumi?
Priekšrocības
U 87 MG šūnu līnijas tiek plaši izmantotas pētniecībā. Dažas ar šo šūnu līniju saistītās priekšrocības ir šādas:
Priekšrocības
- Viegli audzējamas: U 87 MG šūnas ir viegli uzturēt kultūrā. Tās neprasa pārgalvīgas vai sarežģītas šūnu kultivēšanas prasības
- Homogenitāte: U 87 MG ir homogēna šūnu līnija. Lielākajai daļai šūnu populācijā ir vienāds ģenētiskais sastāvs un līdz ar to līdzīgas īpašības. Šīs šūnas izmanto šūnu procesu izpētei, zāļu skrīningam un testēšanai
- Labi raksturojamas: Šī glioblastomas šūnu līnija ir labi raksturota pēc augšanas īpašībām, morfoloģijas un gēnu ekspresijas, kas padara to par vērtīgu pētniecības instrumentu
Trūkumi
- Ierobežota pielietojamība: U 87 MG ir glioblastomas šūnu līnija, tāpēc tās pielietojums galvenokārt aprobežojas ar glioblastomas un tās pamatā esošo molekulāro mehānismu izpēti. Tā var nebūt piemērota citu vēža veidu izpētei.
Pētniecības lietojumi, kuros izmanto U 87 MG šūnas
U87MG glioblastomas šūnu līniju plaši izmanto vēža pētījumos, jo īpaši glioblastomas pētījumos. Daži no U 87 MG šūnu izmantošanas veidiem pētniecībā ir šādi:
- Vēža bioloģijas pētījumi: U87 šūnu līniju izmanto, lai pētītu vēža augšanu un attīstību, pamatā esošos molekulāros mehānismus, signalizācijas ceļus un audzēja mikrovidi. Pētījumā, kas publicēts 2020. gadā, tika izmantots glioblastomas in vitro modelis - U 87 MG šūnu līnija, lai pētītu BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) gēnu kā terapeitisku mērķi. Iegūtie rezultāti parādīja, ka BMAL1 gēns kavē glioblastomas šūnu proliferāciju, migrāciju un invaziju, nomācot ciklīna B1, metaloproteināzes-9 un fosfo-AKT gēna ekspresiju [1]. Citā 2019. gadā veiktā pētījumā tika izmantota U87šūnu līnija un tika pētīts, ka lipopolisaharīda izraisītā audzēja nekrozes faktora alfa transkripcijas faktora (LITAF) pazemināta ekspresija var palielināt gliomas šūnu radiojutīgumu, izmantojot FOXO-1 ceļa augšupregulāciju. LITAF ir pazīstams arī kā p53 inducētais gēns 7 (PIG7) [2].
- Zāļu atklāšana un izstrāde: U-87 MG šūnas var izmantot zāļu skrīninga un testēšanas nolūkos, ļaujot pētniekiem identificēt jaunas potenciālās pretvēža zāles un novērtēt to efektivitāti un toksicitāti. Kā pētījumā tika izmantota U 87 MG glioblastomas šūnu līnija, lai novērtētu Inula helenium (L.) ekstrakta pretvēža un pretvēža aktivitātes antioksidatīvo un antioksidatīvo potenciālu [3]. Līdzīgi citā publikācijā minēts, ka augu ekstraktu citotoksiskās un apoptozes iedarbības testēšanai izmantota U87 šūnu līnija [4]. Turklāt 2018. gadā publicētajā pētījumā tika pētīta no Nuphar augiem iegūtu seskviterpēnu alkaloīdu citotoksiskā iedarbība uz jutīgām un pret zālēm rezistentām U 87 MG šūnu līnijām [5].
Pasūti savu U87 MG Glioma šūnu līniju jau šodien
U-87 MG šūnu līnija: Pētnieciskās publikācijas
Šeit ir dažas ievērojamas zinātniskās publikācijas, kurās iekļauta U-87 MG šūnu līnija.
Šajā rakstā, kas 2018. gadā publicēts žurnālā Neuroreport, ierosināts, ka hipoksija var palielināt cilvēka glioblastomas šūnu migrāciju un invaziju, regulējot PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α signalizācijas ceļu.
Šis pētījums publicēts žurnālā Frontiers in Pharmacology 2020. gadā. Pētījuma rezultāti liecina, ka flavonoīds eriodiktils iedarbojas pretvēža iedarbībā uz U87 šūnu līniju un nomāc šūnu proliferāciju un metastāzes. Savienojums nodrošina pretvēža īpašības, modulējot PI3K/Akt/NF-κB ceļu.
Šis pētījums, kas publicēts izdevumā Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018), liecina, ka ķīniešu augu formula Xihuang pill var inducēt apoptozi U87 šūnās, iedarbojoties uz ROS aktivizētu Akt/mTOR/FOXO1 kaskādi.
LITAF uzlabo cilvēka gliomas šūnu radiojutīgumu, izmantojot FoxO1 ceļu
Šis pētnieciskais darbs tika publicēts žurnālā Cellular and Molecular Neurobiology 2019. gadā. Pētījumā ierosināts, ka transkripcijas faktors LITAF pazemina un palielina gliomas šūnu radiojutīgumu, regulējot FOXO-1 signalizācijas ceļu.
Šis raksts publicēts Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). Pētnieki izmantoja U 87 MG šūnas, lai izpētītu ar kurkumīnu pildītu PLGA nanodaļiņu citotoksisko iedarbību.
Resursi par U-87 MG šūnām: U-87 gūlu monoksīda U-87 gūlu pētījumi: protokoli, videomateriāli un citi resursi
U87MG glioblastomas šūnu līniju izmanto daudzās vēža pētniecības laboratorijās. Daži resursi ar šo šūnu līniju ir šādi:
- U87 šūnu līnijas transfekcija: Šajā dokumentā ir aprakstīts U 87 MG šūnu transfekcijas protokols.
- U 87 MG šūnu līnijas transfekcija: Šis video ir pamācība, kurā soli pa solim izskaidrots U87 šūnu transfekcijas protokols.
Turpmāk ir uzskaitīti resursi U87 šūnu šūnu kultūras protokolam:
- U87 MG šūnas: Šajā saitē ir pamatinformācija par U 87 MG šūnu līniju. Tā ietver īsus šūnu sadalīšanas, sasaldēšanas un atkausēšanas protokolus.
Ieskats U87 MG gliomas pētniecībā: Biežāk uzdotie jautājumi
Atsauces
- Gwon, D.H., et al., BMAL1 nomāc U87MG šūnu proliferāciju, migrāciju un invāziju, samazinot ciklīna B1, fosfo-AKT un metaloproteināzes-9 līmeni. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al., LITAF Enhances Radiosensitivity of Human Glioma Cells via the FoxO1 Pathway. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al., Inula helenium (L.) ekstrakta antioksidatīvā un pretvēža aktivitāte cilvēka U-87 MG glioblastomas šūnu līnijā. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh, and A. Ghasempour, Cytotoxicity and apoptosis induction in breast cancer, skin cancer and glioblastoma cells by plant extracts. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al., Cytotoxicity of sesquiterpene alkaloids from Nuphar plants towards sensitive and drug-resistant cell lines (Nuphar augu seskviterpēnu alkaloīdu citotoksicitāte pret jutīgām un pret zālēm izturīgām šūnu līnijām ). Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.