T98G šūnu līnija
T98G šūnas ir cilvēka glioblastomas šūnu līnija, ko parasti izmanto biomedicīnas pētījumos. Īpaši šīs šūnas izmanto smadzeņu vēža pētījumos, lai izpētītu svarīgākās šūnas un to izraisošos molekulāros faktorus. Turklāt tās palīdz pētniekiem pārbaudīt un testēt jaunas pretvēža zāles, kas var palīdzēt zāļu izstrādē.
Šajā rakstā būs iekļauta visa būtiskākā informācija par T98G šūnu līniju, kas jums būs nepieciešama pirms darba uzsākšanas ar to, piemēram:
- T98G šūnu līnijas vispārīgās īpašības un izcelsme
- Informācija par T98G šūnu līnijas kultivēšanu
- T98G šūnu līnija: Priekšrocības un trūkumi
- T98G šūnu izmantošana
- Pētniecības publikācijas ar T98G šūnām
- Resursi par T98G šūnām: Protokoli, videomateriāli un citi resursi
1. T98G šūnu līnijas vispārīgās īpašības un izcelsme
Šī raksta sadaļa palīdzēs jums izpētīt T98G šūnu līnijas pamatīpašības. Tajā būs iekļauta informācija par šūnu līnijas izcelsmi, morfoloģiju, izmēru un ploidiju. Turklāt tajā tiks sniegta visaptveroša informācija par šādiem jautājumiem: Kas ir T98G šūnas? Kāda tipa šūnas ir T98G? No kurienes nāk T98G? Kādas ir T98G šūnu līnijas īpašības? Kas ir glioblastomas šūnu līnija T98G U87?
- T98G šūnu līniju izveidoja GH Stein. Tā sastāv no fibroblastiem līdzīgām šūnām, kas iegūtas no 61 gadu veca vīrieša no Kaukāza dzimtas ar multiformu glioblastomu smadzeņu audiem [1].
- T98G šūnas nav tumorogēnas; injicējot nude pelēm, tās nerada audzējus. Tomēr tām ir tendence vairoties, ja šūnu kultūrā tās ir piemēroti nostiprinātas.
- Šīm šūnām piemīt fibroblastiem līdzīga morfoloģija.
- Glioblastomas šūnu līnija T98G ir hiperpentaploīdija. Modālais hromosomu skaits svārstās no 128 līdz 132. Augstāka ploidija var būt 1,39 % šūnu populācijas.
T98 pret T98G
Abas ir cilvēka glioblastomas šūnu līnijas, un tām ir līdzīga izcelsme. Vienīgā atšķirība starp šīm šūnu līnijām ir hromosomu skaits. T98G ir gandrīz divreiz vairāk hromosomu nekā T98. Tāpēc T98G sauc par T98 poliploīdu variantu.
T98G pret U87
U87 un T98G ir cilvēka glioblastomas šūnu līnijas, ko izmanto smadzeņu vēža pētījumos. U87 uzrāda agresīvāku fenotipu salīdzinājumā ar T98G GBM.
2. Informācija par T98G šūnu līnijas kultivēšanu
Informācija par šūnu līnijas kultivēšanu ir ļoti svarīga, lai to zinātu, pirms sākat ar to strādāt. Tā palīdzēs jums viegli un ērti strādāt ar šūnu līniju laboratorijā. Jums jāzina: Kāds ir T98G šūnu līnijas dubultošanās laiks? Kāda barotne ir vispiemērotākā T98G šūnām? Kādas ir T98G augšanas īpašības? Kāds ir T98G šūnu izsējas blīvums? Kā sasaldēt T98G šūnas?
Galvenie punkti T98G šūnu kultivēšanai
|
Dubultošanās laiks: |
T98G šūnu aptuvenais dubultošanās laiks ir 40 stundas. Tas var atšķirties atkarībā no kultivēšanas apstākļiem. |
|
Adhēzijas vai suspensijas veidā: |
T98G šūnas ir adherentas. Tās piestiprinās pie kultivēšanas trauku dibena un veido monoslānīšus. |
|
Sadalījuma attiecība: |
T98G šūnas subkultivē ar dalījuma attiecību no 1:2 līdz 1:5. Šim nolūkam šūnas vispirms mazgā ar 1 X PBS buferšķīdumu un pēc tam inkubē ar pasāžas šķīdumu (Accutase) 8 līdz 10 minūtes istabas temperatūrā. Pēc inkubācijas atdalītās šūnas pievieno svaigai barotnei un centrifugē. Pēc tam savākto šūnu granulu uzmanīgi resuspendē, un šūnas iepilda barotnē ar augšanas barotni. |
|
Augšanas barotne: |
T98G šūnu kultivēšanai izmanto EMEM barotni, kas satur 10 % fetālā liellopu seruma, 2 mM L-glutamīnu, 2,2 g/l NaHCO3 un EBSS. Barotne jāmaina 3 līdz 4 reizes nedēļā. |
|
Augšanas apstākļi: |
T98G šūnas tiek turētas mitrinātā inkubatorā, kas ir iestatīts 37 °C temperatūrā un pieslēgts CO2 padevei. |
|
Uzglabāšana: |
Lai ilgāku laiku aizsargātu šūnu dzīvotspēju, sasaldētas šūnas var uzglabāt temperatūrā zem -150 °C vai šķidrā slāpeklī tvaika fāzē. |
|
Sasaldēšanas process un vide: |
T98G šūnas ieteicams sasaldēt CM-1 vai CM-ACF šūnu sasaldēšanas vidē. Šim nolūkam ieteicams lēns sasaldēšanas process, kas ļauj samazināt temperatūru tikai par 1 °C minūtē. Tas pasargā šūnas no jebkāda šoka un saglabā to dzīvotspēju. |
|
Atkausēšanas process: |
Saldētas šūnas viegli atkausē, ievietojot tās iepriekš uzsildītā ūdens vannā 37 °C temperatūrā uz 40 līdz 60 sekundēm. Pēc tam tās atkārtoti suspendē svaigā barotnē un pārnes uz jaunu kolbu. Pēc 24 inkubācijas stundām barotni nomaina, lai likvidētu sasalšanas barotnes sastāvdaļas. |
|
Bioloģiskās drošības līmenis: |
T98G kultūras tiek uzturētas pirmā bioloģiskās drošības līmeņa laboratorijā. |
3. T98G šūnu līnija: Priekšrocības un trūkumi
T98G ir plaši izmantota cilvēka glioblastomas šūnu līnija. Tai ir vairāki plusi un mīnusi, kas to atšķir no citām. Šajā raksta sadaļā ir aplūkotas dažas no tām.
Priekšrocības
T98G šūnu priekšrocības ir šādas:
-
Labi raksturotas
Labi izveidota un labi raksturota šūnu līnija. Plaši pētīta un dokumentēta literatūrā.
-
In vitro modelis
Atspoguļo glioblastomas, visagresīvākā smadzeņu audzēja, īpašības. Vērtīgs instruments slimības izpētei, bioloģijas izpratnei un ārstēšanas attīstībai.
Trūkumi
Ar T98G šūnām saistītie trūkumi ir šādi:
-
Heterogenitāte
T98G šūnu populācijas ģenētiskā neviendabība var radīt nekonsekvenci eksperimentu rezultātos un sarežģīt datu interpretāciju.
4. T98G šūnu lietojumi
T98G šūnu līnija ir vērtīgs instruments, ko izmanto vēža pētījumos. Šeit ir uzskaitīti daži galvenie T98G šūnu izmantošanas veidi pētniecībā:
- Vēža pētījumi: T98G šūnu līnija ir vērtīgs instruments glioblastomas audzēju bioloģijas izpētei. Šīs šūnas galvenokārt izmanto, lai pētītu sarežģītos molekulāros ceļus, kas ir glioblastomas slimības attīstības un progresēšanas pamatā. Turklāt tās izmanto, lai noteiktu ģenētiskās mutācijas, kas veicina audzēja augšanu, un citus vēža šūnu mehānismus. Jangs Čens (Yang Chen) un kolēģi strādāja ar šīm šūnām un atklāja, ka miRNA-21 pārmērīga ekspresija samazina PDCD4 (Programmed cell death protein 4) līmeni T98G šūnās. Tas noved pie PDCD4 mediētās T98G šūnu apoptozes kavēšanas. Tādējādi pētījums liecina, ka miRNa-21 ir potenciāls mērķis terapiju izstrādei [2]. Līdzīgi kā šajā pētījumā Fanqiang Kong un kolēģi pētīja mikroRNA-15a lomu T98G glioblastomas šūnu proliferācijā un invadīcijā. Viņi atklāja, ka miRNA-15a-5p veicina šos šūnu procesus, mērķējot uz šūnu adhēzijas molekulu 1 (CADM1) [3].
- Zāļu testēšana un terapeitiskā izstrāde: T98G kalpo kā lielisks glioblastomas in vitro modelis jaunu zāļu skrīningam un nodrošina platformu potenciālo vēža terapiju efektivitātes novērtēšanai. Pētnieki arī testē dažādus savienojumus un terapijas veidus, lai noteiktu un atklātu zāļu kandidātus ar visdaudzsološākajām antiglioblastomas īpašībām. Tā rezultātā tiek izstrādātas jaunas zāles un ārstēšanas stratēģijas, kas sniedz cerību glioblastomas pacientiem. Šādā pētījumā tika pētīts dabiska savienojuma, ko sauc par korilagīnu, pretvēža potenciāls pret temozolomīdu rezistentā T98G GBM šūnu līnijā. Pētījuma rezultāti liecina, ka korilagīns kombinācijā ar temozolomīdu šūnās izraisa augstāku antiproliferatīvo un antiapoptozes iedarbību [4].
5. Pētniecības publikācijas ar T98G šūnām
Turpmāk uzskaitītas dažas interesantas un bieži citētas pētniecības publikācijas par glioblastomas šūnu līniju T98G.
REV-ERB agonista SR9009 ķīmijterapeitiskā iedarbība uz cilvēka glioblastomas T98G šūnām
Šajā publikācijā žurnālā ASN Neuro (2019) tika pētīta REV-ERB agonista SR9009 pretvēža iedarbība uz T98G glioblastomas šūnām.
Šajā pētnieciskajā rakstā, kas publicēts izdevumā Neurochemical research (2019), ierosināts, ka nātrija butirāts un kvercetīns sinerģiski inhibē T98G šūnu aizsargājošo autofagiju un palielina šūnu apoptozi.
Šajā pētījumā Genes (2023) tika veikta T98G hipoksijai pielāgotas šūnu līnijas RNA sekvencēšana un ierosināts IRE1 (inositolu pieprasošais enzīms 1) kā daudzsološs terapeitiskais mērķis.
MikroRNA-548c-3p kavē T98G gliomas šūnu proliferāciju un migrāciju, pazeminot c-Myb regulāciju
Šis raksts publicēts Oncology Letters (2017). Pētījumā tika pētīts, ka miRNA-548c-3p ir vērsta pret T98G onkogēnu (c-Myb), lai kavētu T98G šūnu proliferāciju un migrāciju.
Šajā rakstā žurnālā Journal of Medicinal Plants Research (2011) ierosināts, ka Dracocephalum tanguticum hloroforma ekstrakts iedarbojas antiproliferatīvi uz T98G šūnām, modulējot kaspāzes-3, Bax un P21 gēnus.
6. T98G šūnu resursi: Protokoli, videomateriāli un citi resursi
Šeit ir minēti pieejamie resursi, kas ietver T98G šūnu kultivēšanas un transfekcijas protokolus.
- T98G transfekcija: Šajā pētnieciskajā rakstā sniegts T98G transfekcijas protokols. Tajā īsi izskaidrota metode un nepieciešamie reaģenti.
Turpmākās saites ievērojami palīdzēs apgūt T98G šūnu kultivēšanas protokolu un atvieglos darbu ar to.
- T98G šūnas: Šajā tīmekļa vietnē ir būtiska informācija par T98G šūnu kultūru protokoliem, tostarp par subkultivēšanu un darbu ar proliferatīvām un kriokonservētām kultūrām. Turklāt tā arī palīdzēs jums uzzināt šūnu audzēšanas barotnes, apstākļus un dubultošanās laiku.
Atsauces
- Haehl, E., Endotēlija šūnu izraisīta radiorezistence glioblastomā. 2021, Tībingenes Universitāte.
- Chen, Y., et al., MicroRNA-21 down-regulates the expression of tumor supressor PDCD4 in human glioblastoma cell T98G. Cancer letters, 2008. 272(2): p. 197-205.
- Kong, F., et al., MicroRNA-15a-5ppromotes the proliferation and invasion of T98G glioblastoma cells via targeting cell adhesion molecule 1. Oncology Letters, 2021. 21(2): p. 1-1.
- Milani, R., et al., Corilagin Induces High Levels of Apoptosis in the Temozolomide-Resistant T98G Glioma Cell Line. Oncol Res, 2018. 26(9): p. 1307-1315.