SiHa šūnas - izgaismojam dzemdes kakla vēža pētījumus

SiHa šūnas ir dzemdes kakla vēža šūnas, ko plaši izmanto biomedicīnas pētījumos. Tās ir lieliskas transfekcijas saimnieces, tāpēc ir piemērotas gēnu ekspresijas pētījumiem. Tā kā šīs šūnas ir cilvēka izcelsmes un ir nozīmīgas dzemdes kakla vēža pētījumiem, tās galvenokārt izmanto vēža bioloģijā, virusoloģijā un zāļu izstrādes pētījumos.

SiHa šūnu vispārīgās īpašības un izcelsme

Izpratne par šūnu līnijas izcelsmi un vispārējām īpašībām ir ļoti svarīga, jo tā ietekmē tās izmantošanu pētniecībā. Šajā raksta sadaļā jūs uzzināsiet par SiHa šūnu līnijas izcelsmi, raksturīgajām īpašībām un daudz ko citu: Kas ir SiHa vēža šūnu līnija? Kas ir SiHa šūnu HPV? Kāda ir SiHa šūnu līnijas izcelsme? Kāda ir SiHa morfoloģija?

Dzemdes kakla karcinomas šūnu līnija SiHa tika iegūta no primārās dzemdes biopsijas fragmentiem, kas iegūti no aziātes (55 gadus vecas sievietes) ar plakanšūnu vēzi [1].
SiHa šūnu līnijai ir hipertriploīds kariotips. Lielākajai daļai šūnu vidējais hromosomu skaits ir no 69 līdz 72. Tomēr aptuveni 24 % šūnu ir 71 hromosomu skaits.
SiHa šūnas ir pozitīvas uz 16. cilvēka papilomas vīrusu. Tajās ir integrētas aptuveni 1 līdz 2 HPV genoma kopijas uz šūnu [2].
Šīm dzemdes kakla vēža šūnām ir epitēlija morfoloģija.

HeLa dzemdes kakla vēža šūnu dalīšanās mikroskopā.

SiHa šūnu līnija: Informācija par kultivēšanu

Šūnu līnijas kultūru uzturēšana nav vienkārša, kamēr nezināt visus svarīgākos jautājumus par tās kultivēšanu. Jums jāzina: Kāds ir SiHa līnijas dubultošanās laiks? Kas ir SiHa šūnu barotne? Kā kultivēt SiHa šūnu līniju?

SiHa šūnu kultivēšanas galvenie punkti

Dubultošanās laiks:	SiHa šūnu dubultošanās laiks ir aptuveni 17 stundas.
Adhēzijas vai suspensijas veidā:	SiHa ir adherentu šūnu līnija.
Subkultivēšanas attiecība:	SiHa šūnu subkultivācijas attiecība ir no 1:2 līdz 1:4. Lai veiktu pasāžu, adherētās šūnas skalo ar 1x PBS. Pievieno akutāzes šķīdumu, un šūnas inkubē 8 līdz 10 minūtes istabas temperatūrā. Pēc tam pievieno barotni, un šūnas centrifugē. Šūnu granulas resuspendē, un šūnas ielej jaunā kolbā kultivēšanai.
Augšanas barotne:	SiHa šūnu ideālai augšanai izmanto Eagle's minimum essential medium (EMEM), kas satur 10 % FBS, 2 mM L-glutamīnu, 2,2 g/L NaHCO3 un Earle's Balanced Salt Solution Solution (EBSS). Barotni nomaina 2 līdz 3 reizes nedēļā.
Augšanas apstākļi:	SiHa šūnas tiek uzturētas 37 °C mitrinātā inkubatorā ar 5 % CO2 pieplūdi.
Uzglabāšana:	SiHa dzemdes kakla vēža šūnu līnijas sasaldētās SiHa flakonus ilgāku laiku glabā elektriskā saldētavā temperatūrā zem -150 °C vai šķidrā slāpekļa tvaika fāzē.
Saldēšanas process un vide:	SiHa šūnu sasaldēšanai izmanto CM-1 vai CM-ACF sasaldēšanas vidi. Šūnas sasaldē, izmantojot lēnas sasaldēšanas metodi, kas ļauj samazināties tikai par 1 °C minūtē, lai aizsargātu šūnu dzīvotspēju.
Atkausēšanas process:	Sasaldētās šūnas 40 līdz 60 sekundes tur 37 °C ūdens vannā, līdz paliek neliels ledus gabaliņš. Pēc tam pievieno svaigu barotni, un šūnas centrifugē, lai atdalītu sasaldēšanas barotnes sastāvdaļas. Šūnu granulas resuspendē, un šūnas iepilda audzēšanas kolbā.
Bioloģiskās drošības līmenis:	SiHa šūnu kultūru apstrādei un uzturēšanai nepieciešama 1. bioloģiskās drošības līmeņa laboratorija.

SiHa šūnu adherēts slānis 10× un 20× palielinājumā.

SiHa šūnu līnijas priekšrocības un trūkumi

Tāpat kā citām cilvēka karcinomas šūnu līnijām, arī SiHa piemīt dažas atšķirīgas īpašības, kas saistītas ar noteiktām priekšrocībām un trūkumiem. Šeit mēs esam aplūkojuši dažas būtiskas no tām.

SiHa dzemdes kakla vēža šūnu līnijas priekšrocības

Dzemdes kakla vēža modelis
- Iegūta no dzemdes kakla plakanšūnu karcinomas.
- Izmanto dzemdes kakla vēža mehānismu, augšanas un attīstības izpētei.
- Ekspresē gēnus p53+ un pRB+, kas ir saistīti ar DNS atjaunošanu, šūnu cikla regulāciju un audzēja nomākšanu.
Audzēju potenciāls
- SiHa šūnas ir tumorogēnas un var izraisīt vāji diferencētus III pakāpes epidermoīdos audzējus nude pelēm.
- Izmanto in vivo vēža pētījumiem un pretvēža ārstēšanas testēšanai.

SiHa šūnu trūkumi

Proliferācijas ātrums
- SiHa šūnas strauji vairojas, izraisot pārmērīgu augšanu.
- Nepieciešama bieža pasāža, kas palielina ģenētiskās nestabilitātes risku, kas var ietekmēt šūnu uzvedību laika gaitā.

SiHa šūnu pētniecības lietojumi

SiHa šūnu līniju plaši izmanto dzemdes kakla vēža pētījumos. Šeit ir aplūkoti daži konkrēti šīs šūnu līnijas lietojumi.

Ar cilvēka papilomas vīrusu (HPV) saistīti pētījumi: SiHa šūnas ir HPV 16 pozitīvas, tāpēc tās ir vērtīgas vienības, lai pētītu cilvēka papilomas vīrusa infekciju, tās molekulāros mehānismus un lomu dzemdes kakla vēža attīstībā un progresēšanā. Pētnieki izmanto šīs šūnas arī vīrusa replikācijas, integrācijas un tā ietekmes uz saimnieka šūnas procesiem izpētei. Pētījumā, kas tika veikts 2020. gadā, tika izmantota SiHa šūnu līnija, lai izpētītu HPV E6/E7 onkoproteīnu lomu dzemdes kakla vēža attīstībā, mērķējot to ar CRISPR tehnoloģiju. Rezultāti atklāja, ka E6/E7 gēnu nojaukšana izraisīja SiHa šūnu augšanas kavēšanu un apoptozi. Tāpēc šie vīrusu gēni var kalpot par būtiskiem zāļu mērķiem, lai izstrādātu terapiju pret dzemdes kakla kakla vēzi, kas saistīts ar HPV [3].
Vēža bioloģija: SiHa šūnas kalpo kā nenovērtējams modelis dzemdes kakla vēža bioloģijas, tostarp vēža attīstības, progresēšanas, metastāžu veidošanās un invazijas, izpētei. Pētnieki izmanto šīs šūnas, lai izpētītu ģenētiskās mutācijas un molekulāros ceļus, kas veicina dzemdes kakla vēža attīstību un augšanu, piemēram, pētījumā tika izmantotas SiHa šūnas un konstatēts, ka paaugstināta SEC61G (SEC61 translocon subunit gamma) veicina dzemdes kakla vēža šūnu proliferāciju, aktivējot MAPK kaskādi [4].
Zāļu skrīnings un testēšana: SiHa ir plaši izmantota dzemdes kakla vēža līnija, lai novērtētu potenciālo pretvēža zāļu efektivitāti, kas ir specifiskas ar HPV saistītam dzemdes kakla vēzim. Pētnieki, izmantojot šīs šūnas, pēta zāļu antiproliferatīvo, apoptozes un antimetastātisko potenciālu. Piemēram, 2019. gadā veiktajā pētījumā, kurā tika pētīts Vatica diospyroides Symington Type SS augļu ekstraktu citotoksiskais potenciāls uz SiHa dzemdes kakla vēža šūnu līniju [5].

SiHa šūnas jūsu pētījumiem!

430,00 €*

Saturs: 1.5 milliliter

Cenas bez nodokļiem un piegādes izmaksām

cryovial

Produkta numurs: 305023

Pētniecības publikācijas ar SiHa šūnām

Dažās nozīmīgās un bieži citētās pētnieciskajās publikācijās ir izmantota SiHa dzemdes kakla plakanā karcinoma šūnu līnija.

Aloe-emodīna pretvēža iedarbība uz dzemdes kakla vēža šūnām ir saistīta ar cilvēka papilomas vīrusa E6/E7 un glikozes metabolismu

Šajā publikācijā žurnālā OncoTargets and Therapy (2019) ierosināts, ka dabiskais savienojums aloe-emodīns rada ar HPV E6/E7 un glikozes metabolismu saistītu apoptozes iedarbību SiHa dzemdes kakla vēža šūnās.

Excoecaria agallocha (L.) lapu ekstrakta pretvēža potenciāla novērtēšana uz cilvēka dzemdes kakla vēža (SiHa) šūnu līniju un darbības mehānisma novērtēšana

Šis raksts tika publicēts žurnālā Future Journal of Pharmaceutical Sciences 2022. gadā. Šajā pētījumā tika pētīta Excoecaria agallocha (L.) augu lapu ekstrakta pretvēža darbība SiHa dzemdes kakla vēža šūnu līnijā.

1, 10-fenantrolīna savienojuma ar sulfātētām ZnO nanodaļiņām antiproliferatīvā iedarbība SiHa dzemdes kakla vēža šūnu līnijā

Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā "Journal of Sol-Gel Science and Technology" (2022), ierosināts, ka 1, 10-fenantrolīna molekula pēc savienošanas ar cinka sulfāta nanodaļiņām rada būtisku antiproliferatīvu iedarbību SiHa šūnās.

Astragalozīds IV kavē SiHa dzemdes kakla vēža šūnu invaziju un metastāzes, izmantojot TGF-β1 mediētus PI3K un MAPK ceļus

Šis pētījums tika publicēts 2019. gada žurnālā Oncology Reports. Pētījumā atklāts, ka dabīgais produkts Astragalozīds IV nomāc SiHa šūnu migrāciju un invaziju, modulējot TGF-β1 mediētos PI3K un MAPK signalizācijas ceļus.

IFI16 veicina dzemdes kakla vēža progresēšanu, paaugstinot PD-L1 regulāciju imunomikrovidē, izmantojot STING-TBK1-NF-kB ceļu

Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā Biomedicine & Pharmacotherapy (2020), atklāts, ka IFI16 (interferona gammas inducējamais proteīns 16) regulē PD-L1 gēnu, aktivizējot STING-TBK1-NF-kB ceļu, lai veicinātu SiHa dzemdes kakla vēža šūnu augšanu.

SiHa šūnu līnijas resursi: Protokoli, videoklipi un citi resursi

Šeit ir daži tiešsaistes resursi par SiHa šūnām.

SiHa šūnu transfekcija: Šajā pētnieciskajā rakstā ir iekļauts SiHa dzemdes kakla vēža šūnu uzturēšanas un SiHa šūnu transfekcijas protokols.

Šajā saitē sniegta informācija par SiHa šūnu kultūru.

SiHa šūnu līnija: Šajā tīmekļa vietnē ir daudz vērtīgu datu par SiHa šūnu līniju. Tā ietver informāciju par augšanas barotnēm, kultivēšanas apstākļiem, SiHa šūnu subkultivēšanas protokoliem un darbībām ar tās proliferatīvajām un kriokonservētajām kultūrām.

Biežāk uzdotie jautājumi par SiHa dzemdes kakla karcinomas šūnām

Atsauces

Melzer, C., J. von der Ohe, and R. Hass, Concise review: crosstalk of mesenchymal stroma/stem-like cells with cancer cells provides therapeutic potential. Stem cells, 2018. 36(7): p. 951-968.
Ostrowska, K.M., et al, Augsta riska cilvēka papilomas vīrusa ietekmes uz dzemdes kakla vēža šūnu bioķīmisko sastāvu izpēte, izmantojot vibrācijas spektroskopiju. Analītiķis, 2010. 135(12): p. 3087-3093.
Chen, Y., et al., In vitro and in vivo growth inhibition of human cervical cancer cells via human papillomavirus E6/E7 mRNAs' cleavage by CRISPR/Cas13a system. Antiviral Research, 2020. 178: p. 104794.
Fan, Y., et al., SEC61G veicina dzemdes kakla vēža proliferāciju, aktivizējot MAPK signalizācijas ceļu. Disease Markers, 2022. 2022.
Chothiphirat, A., et al., Anticancer potential of fruit extracts from Vatica diospyroides symington type SS and their effect on program cell death of cervical cancer cell lines. The Scientific World Journal, 2019. 2019.