RBL-2H3 šūnas - RBL-2H3 nozīme alerģiskās reakcijas un imunoloģiskajos pētījumos
RBL-2H3 šūnu līnija ir no žurkām iegūta bazofīlo leikēmijas šūnu līnija, ko izmanto imunoloģiskajos pētījumos. Tā kalpo kā modeļsistēma tuklo šūnu fizioloģijas, uzvedības un funkciju izpētei. Šīs šūnas izmanto arī alerģisko reakciju, imunoloģisko procesu, zāļu testēšanas un izstrādes pētījumiem.
Rakstā tiks sniegts ieskats par RBL-2H3 izcelsmi, vispārējām īpašībām, prasībām attiecībā uz kultūrām un pielietojumu pētniecībā.
RBL-2H3 šūnas: Izcelsme un vispārīgās īpašības
Pirms pētniecībā izmantot bazofīlo šūnu līniju, jāzina tās izcelsme un vispārīgās īpašības. Šajā raksta sadaļā jūs informēsim par RBL-2H3 šūnu pamatiem. Piemēram, kas ir RBL-2H3 mastocītu šūnas? Kāpēc izmantot RBL-2H3 šūnas? Kas ir RBL-2H3 šūnas žurku bazofīlajā leikēmijā? Kāda ir RBL-2H3 morfoloģija? Vai RBL-2H3 šūnas ir nemirstīgas?
- RBL-2H3 ir bazofīlas leikēmijas šūnas, kas iegūtas no Wistar žurku bazofīlajām šūnām 1978. gadā Nacionālajā zobu pētniecības institūta Imunoloģijas laboratorijā.
- RBL-2H3 šūnām piemīt c-kit receptoru tirozīnkināzes un tuklo šūnu proteāzes II (RMCP-II) receptori, tādējādi tās ir potenciāls tuklo šūnu modelis. Tāpēc tās parasti sauc par tuklajām šūnām, neraugoties uz to izcelsmi no žurku bazofiliem [1].
- Tās aktivizējoties izdala histamīnu un citus mediatorus un ekspresē augstas afinitātes IgE receptorus.
- RBL-2H3 šūnām ir fibroblastiem līdzīga morfoloģija.
RBL-2H3 šūnas: Kultivēšanas informācija
Šī sadaļa palīdzēs jums uzzināt dažus svarīgākos RBL-2H3 šūnu līnijas kultivēšanas aspektus. Jūs uzzināsiet: Kas ir RBL-2H3 šūnu dubultošanās laiks? Kāds ir RBL-2H3 šūnu izsējas blīvums? Kāds ir RBL-2H3 šūnu kultivēšanas protokols? Kas ir RBL-2H3 šūnu līnijas saldēšanas barotne?
RBL-2H3 šūnu kultivēšanas galvenie punkti
|
Populācijas dubultošanās laiks: |
RBL-2H3 tuklo šūnu dubultošanās laiks ir aptuveni 50-60 stundas. |
|
Adhēzijas vai suspensijas veidā: |
RBL-2H3 ir adherentu šūnu līnija. |
|
Subkultivācijas attiecība: |
RBL-2H3 šūnām dalīšanas attiecība ir no 1:2 līdz 1:4. Adherētās šūnas mazgā ar 1 x PBS šķīdumu bez magnija un kalcija. Pievieno pasāžas šķīdumu Accutase, un šūnas 10 minūtes tur istabas temperatūrā, lai atdalītos no kultivēšanas trauka dibena. Pievieno svaigu barotni, un šūnas centrifugē. Novāktās šūnas uzmanīgi resuspendē svaigā barotnē un ielej jaunās kolbās ar barotni. |
|
Augšanas barotne: |
RBL-2H3 šūnu kultivēšanai izmanto EMEM barotni, kas satur 10 % FBS, 2 mM L-glutamīnu, 2,2 g/L NaHCO3 un EBSS sāli. Barotne jāmaina 2 līdz 3 reizes nedēļā. |
|
Augšanas apstākļi: |
RBL-2H3 šūnas kultivē mitrinātā inkubatorā 37 °C temperatūrā un pieslēgtā 5 %CO2 avotam. |
|
Uzglabāšana: |
Šūnas uzglabā šķidrā slāpekļa tvaika fāzē vai temperatūrā zem -150 °C elektriskā saldētavā, lai ilgstoši aizsargātu šūnu dzīvotspēju. |
|
Saldēšanas process un vide: |
RBL-2H3 šūnu sasaldēšanai izmanto CM-1 vai CM-ACF sasaldēšanas barotni, izmantojot lēnu sasaldēšanas procesu. Īsumā šī metode ļauj samazināt temperatūru par 1 °C minūtē un pasargā šūnas no šoka. |
|
Atkausēšanas process: |
RBL-2H3 šūnas atkausē iepriekš iestatītā ūdens vannā (37 °C) apmēram 60 sekundes. Pēc tam šūnas pievieno svaigai barotnei un centrifugē. Šis posms ir svarīgs, lai atdalītu sasaldēšanas barotnes sastāvdaļas. Pēc tam šūnu granulas resuspendē barotnē, un šūnas iepilda kolbā kultivēšanai. |
|
Bioloģiskās drošības līmenis: |
RBL-2H3 šūnas jāuztur 1. bioloģiskās drošības līmeņa laboratorijās. |
RBL-2H3 bazofīlo šūnu līnijas priekšrocības un ierobežojumi
RBL-2H3 šūnas parasti izmanto imunoloģiskajos pētījumos. Šajā iedaļā izklāstītas to galvenās priekšrocības un ierobežojumi.
Priekšrocības
- Viegli kultivējamas: RBL-2H3 šūnas var viegli kultivēt un uzturēt laboratorijas vidē. Tas atvieglo rentablus un reproducējamus eksperimentus, padarot tās par populāru izvēli sākotnējiem pētījumiem imunoloģijā.
Ierobežojumi
- Necilvēcīga izcelsme: RBL-2H3 šūnas, kas iegūtas no žurku bazofiliem, var neprecīzi atdarināt cilvēka bioloģiskos procesus, un tas var ierobežot to pielietojamību specifiskos pētījumos ar cilvēkiem. Tādēļ ir nepieciešama piesardzīga datu interpretācija, ekstrapolējot rezultātus uz cilvēka sistēmām.
- Vienkāršots tuklo šūnu modelis: Lai gan šīs šūnas ir pamatmodelis tuklo šūnu funkciju izpētei, tās pilnībā neatspoguļo cilvēka imūnsistēmas tuklo šūnu mijiedarbības sarežģīto raksturu. Līdz ar to tie nevar adekvāti modelēt daudzpusīgās tuklo šūnu lomas imūnās reakcijās vai slimības apstākļos in vivo.
RBL-2H3 šūnu līnija: RBLH-2B-1: stūrakmens imunoloģiskajos pētījumos
Bazofilu un tuklo šūnu pētījumi, izmantojot RBL-2H3 šūnu līniju
RBL-2H3 šūnu līnija, kas iegūta no Rattus norvegicus, kalpo kā galvenais modelis bazofīlu un tuklo šūnu bioloģijas pētījumiem. Šīs žurku tuklās šūnas sniedz būtisku ieskatu tuklo šūnu mediatoru izdalīšanā, kas ir ļoti svarīgi, lai izprastu alerģiskas slimības, piemēram, alerģisku rinītu. Izmantojot šīs šūnas, pētnieki pēta šūnu receptoru dinamiku un imunoloģisko sinapsju veidošanos, kam ir galvenā nozīme imūnsistēmas reakcijā uz alergēniem. 2019. gadā publicētajā interesantajā pētījumā tika izmantota RBL-2H3 šūnu līnija un pētīti mehānismi, kas ir pamatā pseidoalerģiskām reakcijām, kuras izraisīja Qingkailing injekcijas. Pētījumā atklājās, ka PI3K-RAC1 signalizācijas kaskāde daļēji izraisa šo alerģisko reakciju šūnās [2]
Imunoloģisko sinapsju dinamika alerģijas pētījumos
RBL-2H3 šūnas, ko plaši izmanto imunoloģiskajos pētījumos, ir īpaši efektīvas, lai pētītu imunoloģisko sinapsju dinamiku. Tas palīdz noskaidrot imūnsistēmas komunikācijas procesus, un to var izmantot gan perifēro asiņu, gan peritoneālo tuklo šūnu izpētē. Šādi pētījumi ir ļoti svarīgi, lai iegūtu vispusīgu izpratni par imūnsistēmas reakciju gan sistēmiskā, gan lokālā kontekstā
Zāļu skrīnings un toksicitātes testēšana
Zāļu skrīningā un testēšanā tiek izmantota RBL šūnu reakcija uz dažādiem stimuliem, tostarp pētīts, kā H2O2 nomāc IgE mediētās atbildes reakcijas. Šīm šūnām ir būtiska nozīme tādu slimību ārstēšanas metožu izstrādē kā streptokoku infekcijas, kur mitis grupas streptokoki kavē tuklo šūnu aktivāciju. Papildus tam pētnieki novērtē dažādu vielu, tostarp ķīmisko vielu, zāļu un nanodaļiņu, toksisko iedarbību, izmantojot šo RBL 2H3 mc modeli. Piemēram, nesen veiktajā pētījumā (2022) tika novērtēta polistirola mikroplastmasas citotoksicitāte uz RBL 2H3 šūnām. Tika konstatēts, ka mikroplastmasa bojā RBL-2H3 šūnu organellas un veicina šūnu nāvi [3]. Citā 2021. gada pētījumā tika novērtēts dabiskā produkta - neferīna - antialerģiskais un pretiekaisuma potenciāls, izmantojot RBL 2H3 mc modeli. Pētījums atklāja savienojuma labas pretalerģiskās un pretiekaisuma īpašības [4]
Uzlabotas imunoloģisko mērījumu metodes
Konsekventa un izmērāma mediatoru izdalīšanās no RBL 2H3 šūnām padara tās ideāli piemērotas ērtai fluorimetrijai, veicinot precīzus un precīzus mērījumus, kas ir būtiski slimību izpētei un terapeitisko līdzekļu novērtēšanai.
RBL-2H3 šūnu līnija, kuras izcelsme ir Rattus norvegicus, ir nenovērtējama vērtība gan fundamentālajos, gan lietišķajos pētījumos imunoloģijas jomā. Tā piedāvā plašas iespējas uzlabot zināšanas par imunoloģiskām slimībām un to ārstēšanu
RBL-2H3 šūnu līnija progresīviem imunoloģiskiem pētījumiem
RBL-2H3 šūnas: Pētniecības publikācijas
Turpmāk uzskaitītas dažas aizraujošas pētniecības publikācijas par RBL-2H3 tuklajām šūnām:
Narirutīna inhibējošā aktivitāte attiecībā uz RBL-2H3 šūnu degranulāciju
Šis pētnieciskais darbs publicēts Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). Pētījumā ierosināts, ka dabīgs savienojums narirutīns inhibējoši iedarbojas uz RBL 2H3 degranulāciju, regulējot NF-κB, MAPK un tirozīnkināzes signalizācijas ceļu.
Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā International Journal of Molecular Sciences (2020), ierosināts, ka apigenīna savienojums būtiski nomāc RBL-2H3 un RAW264.7 šūnu alerģiskās un iekaisuma reakcijas. Tāpēc tas var kalpot kā potenciāls līdzeklis ar imūnsistēmu saistītu slimību apkarošanai.
Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā International Journal of Molecular Sciences (2021), novērtēta dabiskā produkta - saponarīna - pretalerģiskā un pretiekaisuma iedarbība, izmantojot dažādas šūnu līnijas, tostarp RBL-2H3.
Šajā uz pierādījumiem balstītā papildinošās un alternatīvās medicīnas (2014) pētījumā konstatēts, ka Benchalokawichian ekstrakti un dažas aktīvās sastāvdaļas potenciāli inhibē RBL 2H3 ß-heksosaminidāzes izdalīšanos.
Šis raksts publicēts 2018. gadā žurnālā International Journal of Biological Macromolecules. Pētījumā norādīts, ka spirulina maxima, dabīgs produkts, nomāc RBL 2H3 degranulāciju, novēršot MAPKs un AKT fosforilāciju.
RBL-2H3 šūnu līnijas resursi: Protokoli, videoklipi un citi resursi
RBL-2H3 ir plaši izmantota tuklo šūnu līnija. Šeit ir minēti pieejamie resursi par RBL-2H3 kultivēšanas un transfekcijas protokoliem:
- RBL 2H3 MC modelis: Šajā pētnieciskajā rakstā ietverti RBL-2H3 kultūru uzturēšanas un RBL-2H3 transfekcijas protokoli.
Šeit ir daži resursi, kuros izskaidrots RBL-2H3 šūnu kultūras protokols:
- RBL-2H3 šūnas: Šī tīmekļa vietne ir noderīga, lai uzzinātu šūnu kultūru protokolus RBL-2H3 šūnu līnijai. Turklāt tajā ir informācija par RBL 2H3 šūnu barotnēm un kultivēšanas apstākļiem.
RBL-2H3 šūnu līnija: Svarīgākie jautājumi un atbildes pētniekiem
Atsauces
- Passante, E. un N. Frankish, RBL-2H3 šūnu līnija: tās izcelsme un piemērotība kā tuklo šūnu modelis. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
- Li, Q., et al., Pseidoalerģiska reakcija, ko izraisa Qingkailing injekcija, daļēji izmantojot PI3K-Rac1 signalizācijas ceļu RBL-2H3 šūnās. Toxicology Research, 2019. 8(3): p. 353-360.
- Liu, L., et al. polistirola mikro (nano) plastmasa bojā RBL-2H3 šūnu organellas un veicina MOAP-1, lai izraisītu apoptozi. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M., et al., Anti-allergic and anti-inflammatory effects of neferine on RBL-2H3 cells. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): p. 10994.