RAW 264.7 šūnu līnija makrofāgu un imunoloģijas pētījumos

RAW 264.7 šūnu līnija kalpo kā izturīgs in vitro modelis peļu makrofāgiem, kas ir būtisks imunoloģisko pētījumu jomā. Šīs šūnas, kas iegūtas no BALB/c peļu tēviņiem, tika transformētas ar Abelsona peļu leikēmijas vīrusu, tādējādi iegūstot makrofāgiem līdzīgu šūnu līniju. Pateicoties to funkcionālajai stabilitātei un raksturīgajai spējai veikt gan fagocitozi, gan pinocitozi, RAW 264.7 šūnas ir būtiskas saimnieka un patogēna mijiedarbības pētījumiem, padarot tās par stūrakmeni imunoloģisko pētījumu veikšanā [1,2].

Morfoloģiskās īpašības un augšanas uzvedība

Pārbaudot RAW 264.7 šūnas, tām piemīt daļēji adherenta augšana ar tendenci veidot gan vārpstas formas adherentas šūnas, gan sfēriskas peldošas dzīvotspējīgas šūnas, kuru šūnu diametrs ir no 10 līdz 20 µm. Šī polimorfā daba un kultūras apstākļu pielāgojamība padara RAW 264.7 šūnas par daudzpusīgu instrumentu eksperimentālām manipulācijām un novērojumiem.

Imunoloģiskā funkcija un antigēna prezentācija

RAW 264.7 šūnām kā antigēnu prezentējošām šūnām ir būtiska nozīme imūnsistēmā. To funkcijas sniedzas tālāk par vienkāršu patogēnu atpazīšanu, un tās apstrādā un pasniedz antigēnus T-šūnām, tādējādi organizējot visaptverošu imūnreakciju. Šī dinamika palīdz labāk izprast, kā imūnsistēma identificē un neitralizē svešķermeņus.

Makrofāgu polarizācija: M0, M1 un M2 paradigma

RAW 264.7 šūnām to pamatstāvoklī kā M0 makrofāgiem piemīt ievērojama spēja polarizēties M1 proiekaisuma vai M2 pretiekaisuma fenotipā. Šī polarizācijas spēja nodrošina pētniekiem modeli, lai pētītu dažādu citokīnu un vides faktoru ietekmi un iedarbību uz makrofāgu funkciju un imūnās atbildes reakciju [3,4].

Osteoklastoģenēze un kaulu pārbūve

Lai gan RAW 264.7 šūnas pašas par sevi nav osteoklasti, tās ir bijušas noderīgas osteoklastigenēzes - osteoklastu veidošanās procesa - izpētē. Šīs šūnas atvieglo osteoklastisko gēnu ekspresijas izpēti un to reakciju uz receptoru aktivāciju. Šiem pētījumiem ir liela nozīme, lai izprastu tādu slimību kā osteoporoze, kuru raksturīga iezīme ir neregulēta kaulu pārbūve, patofizioloģiju.

RAW 264.7 šūnu priekšrocības un trūkumi

Priekšrocības

• Viegla kultivēšana: RAW 264.7 šūnu līniju ir viegli audzēt un uzturēt laboratorijā bez sarežģītām prasībām.
• Labi raksturojamas: RAW 264.7 ir labi raksturota šūnu līnija, kas nozīmē, ka tai ir stabilas fenotipiskās un funkcionālās īpašības.
• Makrofāgu in vitro modelis: Tā kā RAW 264.7 šūnas ir makrofāgi, tām piemīt būtiskas makrofāgiem līdzīgas funkcijas, piemēram, fagocitoze un pinocitoze. Tāpēc tās bieži izmanto kā makrofāgu in vitro modeli.
• Diferenciācija uz osteoklastiem: RAW 264.7 šūnas var diferencēt par osteoklastiem, izmantojot īpašus molekulāros faktorus. Šīs diferencētās šūnas spēj veikt kaulu pārbūvi līdzīgi osteoklastiem.

Trūkumi

• Vāja primāro makrofāgu pārstāvība: RAW 264.7 ir pārveidota šūnu līnija, tāpēc tā var neprecīzi atspoguļot primāro makrofāgu īpašības, un tai var būt dažas atšķirības gēnu ekspresijā, fenotipā un funkcijās.
• Ierobežojumi zāļu skrīningā: RAW 264.7 šūnas var nebūt piemērotas visu veidu zāļu skrīninga testiem, un to reakcija uz dažām zālēm var atšķirties no primāro makrofāgu reakcijas.
• Spēcīga šūnu adhēzija: RAW 264.7 šūnas stipri pieķeras pie barotnes virsmas, un dažkārt tās var būt sarežģīti atdalīt.

RAW 264.7 šūnu lietojumi makrofāgu imitācijas un imunoloģiskajos pētījumos

Šūnu imunoloģisko reakciju modelēšana

RAW 264.7 šūnu līnija, kas atspoguļo autentisku makrofāgu funkcijas, ir galvenais modelis, lai pētītu šūnu atbildes reakcijas uz patogēniem un imunoloģiskiem stimuliem. Pētījumā, kurā izcelts šis aspekts, tika novērtēta karstumā nogalinātu pienskābes baktēriju imūnmodulējošā un antioksidatīvā iedarbība uz šīm šūnām, sniedzot nozīmīgus secinājumus par imūnsistēmas regulāciju[5]

Papildinot šo pētījumu, 2019. gadā veiktajā pētījumā noskaidrota RAW 264.7 imūnsistēmas iedarbības ietekme uz polisaharīdiem no auga Polygonatum sibiricum. Pētījumā secināts, ka šie savienojumi izraisa imūnsistēmas atbildes reakciju, aktivizējot NF-κB/MAPK signalizācijas ceļus, piedāvājot dziļu molekulāro izpratni[6]

Osteoklastigenēzes izpēte

Funkcionējot kā osteoklastu diferenciācijas pētījumu aizstājējs, RAW 264.7 šūnas palīdz noskaidrot osteoklastu uzvedību un diferenciācijas ceļus. Šādi pētījumi paplašina mūsu zināšanas par kaulu resorbcijas mehānismiem un osteoporozes patoģenēzi. Šajās šūnās bieži izmanto progresīvas attēlveidošanas metodes, lai uzraudzītu intracelulārās izmaiņas un analizētu hema metabolismu

Molekulāro ieskatu gūšana osteoklastogēnāzē

Neraugoties uz to, ka RAW 264.7 šūnas galvenokārt ir makrofāgu modelis, tās tiek izmantotas arī osteoklastogēzes pētījumos in vitro. Šīm šūnām inducējot osteoklastiem līdzīgas īpašības, pētnieki gūst ieskatu diferenciācijas procesā un pirmsosteoklastu uzvedībā, lai gan šajos pētījumos ir būtiski ņemt vērā šūnu līnijas raksturīgās īpašības un izcelsmi

Dabisko produktu bioloģiskās aktivitātes skrīnings

Vēl viens no lietojumiem, kur RAW 264.7 šūnas ir izcils, ir dabisko produktu bioloģiskās aktivitātes skrīnings. Piemēram, to izmantošana Korejas pētījumā, kurā tika pētītas augu maisījuma imunostimulējošās īpašības, parādīja šūnu līnijas efektivitāti bioloģiski aktīvu savienojumu noteikšanā dabiskās vielās[7]

Pioneer jūsu pētījumi ar mūsu RAW 264.7 šūnām

Pētniecības publikācijas, kurās izmantotas RAW 264.7 šūnas

Par peļu makrofāgu šūnu līniju RAW 264.7 ir pieejamas daudzas zinātniskās publikācijas:

• RAW264. 7 šūnu līnijā polisaharīdi no Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute inducē imūnreakciju, izmantojotNF-κB/MAPKceļu: Šajā pētījumā ierosināts, ka polisaharīdi, kas iegūti no Polygonatum sibiricum auga, var izraisīt imūnreakciju peļu makrofāgu šūnu līnijā RAW 264.7, regulējot NF-κB/MAPK signalizācijas kaskādi.
• Tinospora crispa ekstrakta un tā galveno savienojumu imūnmodulējošā ietekme uz RAW 264.7 makrofāgu imūnfunkcijām: Šajā rakstā, kas publicēts žurnālā International Immunopharmacology, aprakstīts, ka Tinosporacrispa augu ekstraktam un tā galvenajām sastāvdaļām ir imūnmodulējoša un imūnstimulējoša ietekme uz RAW 264.7 makrofāgu šūnu līniju.
• Karstumā nogalinātas pienskābes baktērijas inhibē slāpekļa oksīda veidošanos caur inducējamo slāpekļa oksīda sintēzi un ciklooksigenāzi-2 RAW 264.7 šūnās: Šajā pētījumā ierosināts, ka termiski nogalinātas pienskābes baktērijas potenciāli var izmantot probiotiku sintēzē, jo tām piemīt imūnmodulējošas un antioksidatīvas īpašības. Pētnieki izmantoja RAW 264.7 šūnas, lai pētītu šīs bioloģiskās aktivitātes.
• Augu preparāta ietekme uz imūnās atbildes reakcijas pastiprināšanu RAW 264.7 makrofāgos: Šajā pētījumā tika izmantotas RAW 264.7 šūnas, lai pētītu augu preparāta KM1608 imūnstimulējošo iedarbību. Pētījumā tika ierosināts, ka KM1608 ir potenciāls imūnsistēmas atbildes reakciju pastiprinošs līdzeklis.
• Kolumbijas tradicionālajā medicīnā izmantoto augu skrīnings atklāja Physalis angulata calyces pretiekaisuma potenciālu: Šajā rakstā, kas publicēts Saudi Journal of Biological Sciences, tika pētīts 10 plaši izmantoto Kolumbijas tradicionālo augu pretiekaisuma potenciāls, izmantojot LPS stimulētas RAW 264.7 šūnas.

RAW 264.7 šūnas: Raugi, protokoli, videomateriāli un citi resursi, protokoli, videomateriāli un citi

RAW 264.7 šūnas bieži izmanto transfekcijas pētījumos. Turpmākajos resursos izskaidrotas dažādas transfekcijas metodes, ko izmanto RAW 264.7 šūnu līnijai.

• RAW 264.7 šūnu transfekcija: Šajā tīmekļa vietnē ir sniegts protokols RAW 264.7 makrofāgu transfekcijai, izmantojot lipofektamīna reaģentu.
• Transfekcijas protokols: Šajā publicētajā rakstā aprakstīts detalizēts protokols RAW 264.7 šūnu transfekcijai.
• Efektīva RAW 264.7 šūnu transfekcijas metode: Šajā dokumentā aprakstīta vēl viena praktiska transfekcijas metode, izmantojot RAW 264,7 šūnas.

Videoklipi, kas saistīti ar RAW 264.7 šūnu līniju

• RAW 264.7 šūnu kultivēšana: Šajā videoklipā izskaidrots RAW 264.7 šūnu pasāžas protokols.
• Transfekcijas metode: Šajā videoklipā ir aprakstīta RAW 264.7 šūnu transfekcija ar reportiera gēnu.

Būtiskākie bieži uzdotie jautājumi par RAW 264.7 šūnu līniju: Maķrofāgu imitācijas un osteoklastigenēzes pētījumu ieskats

Atsauces

1. Taciak, B., et al., RAW 264.7 šūnu līnijas fenotipiskās un funkcionālās stabilitātes novērtēšana, veicot sērijveida pasāžas. PloS one, 2018. 13(6): p. e0198943.
2. Wang, S., et al., Inflammatory macrophages interrupt osteocyte maturation and mineralization via regulating the Notch signaling pathway. Molecular Medicine, 2022. 28(1): p. 102.
3. Orekhov, A.N., et al., Monocītu diferenciācija un makrofāgu polarizācija. Vessel Plus, 2019. 3: p. 10.
4. Khabipov, A., et al., RAW 264.7 makrofāgu polarizācija ar aizkuņģa dziedzera vēža šūnām - modelis audzēju veicinošu makrofāgu izpētei. Anticancer Research, 2019. 39(6): p. 2871-2882.
5. Kang, C.-H., et al., Heat-killed lactic acid bacteria inhibit nitric oxide production via inducible nitric oxide synthase and cyclooxygenase-2 in RAW 264.7 cells. Probiotics and Antimicrobial Proteins, 2021. 13(6): p. 1530-1538.
6. Zhang, J., et al., Polysaccharides from Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute induce an immune response in the RAW264. 7 cell line via an NF-κB/MAPK pathway. RSC advances, 2019. 9(31): p. 17988-17994.
7. Trinh, T.A., et al. augu izcelsmes preparāta ietekme uz imūnās atbildes reakcijas pastiprināšanu RAW 264.7 makrofāgos. Biomolekulas, 2020. 10(3): p. 424.