PANC1 šūnas: To būtiskākā loma aizkuņģa dziedzera vēža pētniecībā
PANC1 ir cilvēka epitēlioīdā audzēja šūnu līnija, ko parasti izmanto vēža pētījumos. To izmanto kā in vitro modeli, lai pētītu aizkuņģa dziedzera vēža bioloģiju, kanceroģenēzi un tās pamatā esošos šūnu un molekulāros mehānismus, kā arī novērtētu iespējamās pretvēža terapijas.
PANC1 šūnu līnijas vispārīgās īpašības un izcelsme
Šajā raksta sadaļā sniegtas primārās zināšanas par PANC1 šūnu līniju. Piemēram, ko nozīmē PANC-1? Kas ir PANC-1 šūnas? Kāda ir panc1 izcelsme? Kāda ir PANC 1 morfoloģija? Kāds ir PANC 1 šūnu izmērs?
- PANC1 aizkuņģa dziedzera vēža šūnu līnija tika iegūta no 56 gadus veca vīrieša baltādainā dzimuma ar aizkuņģa dziedzera karcinomu. Šo nepārtraukto audzēja šūnu līniju 1975. gadā izveidoja Maikls Lībers un kolēģi [1].
- PANC1 šūnām ir vājas diferenciācijas spējas, bet tās potenciāli var metastāzēt.
- Šīm cilvēka aizkuņģa dziedzera vēža šūnām piemīt epitēlijšūnu morfoloģija.
- PANC 1 ir hipertriploīds kariotips. Modālais hromosomu skaits PANC 1 šūnu līnijai ir 63. Genomā ir maza gredzenveida hromosoma un trīs atšķirīgas marķieru hromosomas.
Informācija par PANC1 šūnu kultūrām
Šajā sadaļā ir sniegta informācija par PANC1 šūnu kultūrām. Zināšanas par šūnu līnijas kultivēšanas apstākļiem var atvieglot tās kultivēšanu. Mēs runāsim par šādiem jautājumiem: Kāds ir PANC-1 dubultošanās laiks? Kā kultivēt PANC1 šūnas? Vai PANC 1 šūnas ir adherentas? Kāda ir PANC 1 šūnu barotne?
PANC1 šūnu kultivēšanas galvenie punkti
|
Dubultošanās laiks: |
Aizkuņģa dziedzera šūnu līnija PANC 1 uzrāda mērenu proliferācijas ātrumu ar dubultošanās laiku 25,83 ± 2,03 stundas. |
|
Adhēzijas vai suspensijas veidā: |
PANC1 ir epitēlija adherentu šūnu līnija. |
|
Sēšanas blīvums: |
PANC1 šūnas tiek izsētas ar blīvumu 1 x104 šūnas/cm2. Sēšanai šūnas mazgā ar PBS (fosfātu buferšķīdumu) un inkubē ar disociācijas šķīdumu, t. i., Accutase 8 līdz 10 minūtes istabas temperatūrā. Atdalītās šūnas resuspendē svaigā barotnē un centrifugē. Šūnu granulas uzmanīgi resuspendē barotnē, un šūnas ielej jaunās kolbās audzēšanai. |
|
Augšanas barotne: |
PANC1 šūnu kultivēšanai izmanto DMEM ar 10 % fetālā liellopu seruma (FBS), 4,5 g/l glikozes, 4 mM L-glutamīna, 1,5 g/l NaHCO3 un 1,0 mM nātrija piruvāta. PANC 1 šūnu barotne jāmaina 2-3 reizes nedēļā. |
|
Augšanas apstākļi: |
PANC1 šūnas kultivē mitrinātā inkubatorā 37 °C temperatūrā un ar 5 % CO2 avotu. |
|
Uzglabāšana: |
PANC šūnas uzglabā šķidrā slāpekļa tvaika fāzē vai elektriskajā ultrozesaldētavā (temperatūrā zem -150 °C), lai aizsargātu šūnu dzīvotspēju. |
|
Saldēšanas process un vide: |
PANC1 šūnas sasaldē CM-1 vai CM-ACF barotnē. PANC1 šūnu sasaldēšanai izmanto lēnu sasaldēšanas metodi, kas pieļauj tikai 1 °C temperatūras kritumu minūtē. |
|
Atkausēšanas process: |
Šūnas atkausē 37 °C ūdens vannā, līdz paliek neliels ledus gabaliņš. Atkausētās šūnas atkārtoti suspendē barotnē un centrifugē, lai noņemtu sasaldēšanas barotnes saturu. Šūnu palete tiek uzmanīgi resuspendēta, un šūnas ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 tiek izkliedētas jaunās kolbās kultivēšanai. PANC1 šūnām ir nepieciešamas gandrīz 48 stundas, lai pieliptu. |
|
Bioloģiskās drošības līmenis: |
PANC1 šūnu kultivēšanai ieteicams 1. bioloģiskās drošības līmenis. |
PANC1 šūnu priekšrocības
Katra šūnu līnija ir saistīta ar noteiktiem plusiem un mīnusiem, kas to atšķir no citām. Šajā sadaļā tiks izskaidrotas ar PANC 1 šūnu līniju saistītās priekšrocības un trūkumi.
Priekšrocības
PANC1 šūnu līnijas galvenās priekšrocības ir šādas:
-
In vitro aizkuņģa dziedzera vēža modelis
PANC1 raksturo cilvēka aizkuņģa dziedzera adenokarcinomas īpašības. Tāpēc to izmanto kā in vitro modeli aizkuņģa dziedzera audzēja attīstības, augšanas un ar to saistīto molekulāro mehānismu izpētei.
-
Ģenētiskās mutācijas
PANC1 šūnām piemīt daudzas PANC1 mutācijas, kas sastopamas aizkuņģa dziedzera audzējos, tāpēc tās ir vērtīgas ar slimību saistīto ceļu izpētei. Šīs mutācijas galvenokārt ietver PANC1 KRAS un PANC1 P53.
Cilvēka vēža šūnu līniju PANC 1 bieži izmanto aizkuņģa dziedzera vēža pētījumos. Šeit mēs esam minējuši dažas izplatītākās pētniecības jomas.
- Vēža bioloģija: PANC1 šūnas izmanto, lai pētītu aizkuņģa dziedzera vēža attīstību, augšanu un daudzus citus šūnu procesus, tostarp proliferāciju, invaziju, migrāciju un šūnu nāvi. Turklāt tiek pētīti arī dažādi šūnu signalizācijas ceļi, ģenētiskās mutācijas un molekulārie mehānismi, kas saistīti ar aizkuņģa dziedzera kanceroģenēzi. Pētījumā, kas veikts 2018. gadā, tika izmantotas PANC 1 šūnas un konstatēts, ka omeprazols nomāc aizkuņģa dziedzera audzēja šūnu invaziju, izmantojot arila ogļūdeņraža receptoru mediētu JNK indukciju. Savukārt JNK aktivizācija modulē citus šūnu gēnus un izraisa proonkogēno faktoru inhibīciju [3]. Tāpat citā pētījumā atklājās, ka AKT un ERK signalizācijas ceļi ir iesaistīti cilvēka aizkuņģa dziedzera vēža PANC1 šūnu proliferācijā, invazīvošanās un migrācijā [4].
- Zāļu skrīnings: PANC1 šūnu līnija kalpo kā vērtīgs rīks potenciālo pretvēža zāļu vai terapiju skrīningam. Pētnieki parasti pēta zāļu rezistenci un pēta potenciālo zāļu kandidātvielu iedarbības mehānismus. Samira Alipour un kolēģu 2022. gadā veiktajā pētījumā tika ierosināts, ka Portulaca Oleracea ekstrakts iedarbojas apoptotiski un citotoksiski uz PANC 1 šūnām un tādējādi var būt potenciāls līdzeklis aizkuņģa dziedzera vēža ārstēšanai. Augs šo pretvēža iedarbību rada, regulējot CDK1 un P53 gēnus [5].
PANC-1 šūnu iegāde: CANC-1 CANCELES PANCELES CANCELES - jūsu vārti uz aizkuņģa dziedzera vēža pētījumiem
Publikācijas ar PANC1 šūnām
Šajā sadaļā ir minētas dažas interesantas un bieži citētas pētniecības publikācijas, kurās izmantotas PANC1 šūnas.
Šis pētījums tika publicēts starptautiskā žurnālā "Artificial Cells, Nanomedicine, and Biotechnology" 2019. gadā. Pētījumā ierosināts, ka no auga Scutellaria barbata sintezētas zaļas zelta nanodaļiņas iedarbojas pretvēža iedarbībā pret aizkuņģa dziedzera vēža šūnu līniju PANC1.
Šajā publikācijā žurnālā Toxicology and Environmental Health Sciences (2020) tika pētīts Delonix regia ekstrakta un sudraba nanodaļiņu pretvēža potenciāls divām cilvēka vēža šūnu līnijām, t. i., PANC1 un MCF7.
Šis raksts tika publicēts starptautiskajā žurnālā Artificial Cells, Nanomedicine, and Biotechnology 2019. gadā. Šajā pētījumā tika pētīta no Panax notoginseng augu lapu ekstrakta sintezētu zelta nanodaļiņu terapeitiskā iedarbība pret aizkuņģa dziedzera vēža šūnu līniju PANC1.
KS-58 kā pirmā K-Ras (G12D) inhibējoša peptīda, kam piemīt pretvēža aktivitāte in vivo, radīšana
Šis pētījums publicēts zinātniskajā žurnālā Nature scientific reports (2020). Pētnieki radīja peptīdu KS-58, kas in vitro selektīvi inhibē PANC 1 KRAS G12D mutāciju.
Izorhamnetīns nomāc PANC-1 aizkuņģa dziedzera vēža šūnu proliferāciju, apturot S fāzi
Šis pētījums tika publicēts žurnālā Biomedicine & Pharmacotherapy 2018. gadā. Pētījumā tika ierosināts, ka flavonoīds izorhamnetīns kavē PANC 1 šūnu proliferāciju, izmantojot S fāzes apstāšanos šūnu ciklā.
Jauns LIMK2 inhibitors bloķē Panc-1 audzēja augšanu peļu ksenogrāfta modelī
Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā Oncoscience (2014), ierosināts, ka jauns LIMK2 inhibitors nomāc audzēja augšanu PANC 1 peļu ksenografta modelī.
PANC1 šūnu līnijas resursi: PANCANC 2 PANCANC 2 resursu avoti: protokoli, videoklipi un citi materiāli
Daži pieejamie resursi par PANC 1 šūnām ir uzskaitīti turpmāk.
- PANC 1 transfekcija: Šis video ir pamācība, lai apgūtu PANC 1 transfekcijas protokolu.
- Šūnu līnijas subkultivēšana: Šajā videoklipā ir izskaidrots vispārīgs protokols adherentu šūnu līniju subkulturēšanai.
Šajās saitēs ir ietverts PANC 1 šūnu šūnu kultivēšanas protokols.
- PANC 1 šūnas: Šajā saitē sniegts PANC1 šūnu līnijas atkausēšanas un subkulturēšanas protokols.
- PANC 1 šūnu kultivēšana: Šajā tīmekļa vietnē var uzzināt visu svarīgāko informāciju par PANC 1 šūnu kultūru, tostarp PANC 1 šūnu barotni, šūnu atkausēšanas, šūnu sasaldēšanas un subkulturēšanas protokolu.
BIEŽI UZDOTIE JAUTĀJUMI: PANC-1 šūnu izpratne un pielietojums
Atsauces
- Lieber, M. un citi, Nepārtrauktas audzēja šūnu līnijas (PANC-1) izveide no cilvēka aizkuņģa dziedzera eksokrīnās karcinomas. International journal of cancer, 1975. 15(5): p. 741-747.
- Kim, Y., et al., Pankreatiskās aizkuņģa dziedzera duktālās adenokarcinomas šūnu līniju salīdzinošā proteomiskā profilēšana. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Jin, U.-H., et al., Inhibition of pancreatic cancer Panc1 cell migration by omeprazole is dependent on aryl hydrocarbon receptor activation of JNK. Biochemical and biophysical research communications, 2018. 501(3): p. 751-757.
- Yuetong, L., et al. salidrozīds inhibē cilvēka aizkuņģa dziedzera vēža PANC1 un SW1990 šūnu proliferāciju, migrāciju un invāziju, izmantojot AKT un ERK signalizācijas ceļu. Die Pharmazie-An International Journal of Pharmaceutical Sciences, 2020. 75(8): p. 385-388.
- Alipour, S., L. Pishkar, and V. Chaleshi, Portulaca Oleracea ekstrakta citotoksiskā ietekme uz CDK1 un P53 gēnu ekspresijas regulāciju aizkuņģa dziedzera vēža šūnu līnijā. Nutrition and Cancer, 2022. 74(5): p. 1792-1801.