NCI-H460 šūnas - virzība plaušu vēža pētniecībā, izmantojot NCI-H460 ieskatu
NCI-H460 ir no cilvēka iegūtas nesmalto šūnu plaušu vēža šūnas, ko parasti izmanto plaušu karcinomas un toksikoloģijas pētījumos. Šī šūnu līnija ir vērtīgs rīks, lai pētītu dažādus vēža bioloģijas aspektus, kas saistīti ar audzēja attīstību, augšanu un rezistenci pret zālēm. Turklāt NCI-H460 šūnas ir piemērots modelis pretvēža reaģentu izstrādei.
NCI-H460 šūnas: Izcelsme un vispārīgas īpašības
Šūnu līnijas izcelsme un vispārīgās īpašības lielā mērā ietekmē tās lietojumu pētniecībā. Šī raksta sadaļa palīdzēs jums uzzināt par NCI-H460 plaušu vēža šūnu izcelsmi un galvenajām īpašībām. Jūs uzzināsiet: Kas ir NCI-H460 šūnas? Kas ir NCI-H460 šūnu līnijas tips? Kāda ir NCI-H460 morfoloģija?
- NCI-H460 šūnu līnija ir iegūta no pleiras izplūdes no Eiropas vīrieša ar lielšūnu plaušu vēzi. To 1982. gadā izveidoja A. F. Gazdar un kolēģi.
- NCI-H460 plaušu vēža šūnām ir epitēlija morfoloģija.
- NCI-H460 ir audzēja šūnu līnija ar hipotriploīdu kariotipu. Modālais hromosomu skaits šīm šūnām ir 57. NCI-H460 šūnām ir arī 58 modālais hromosomu skaits salīdzināmā daudzumā.
- Šīm plaušu vēža šūnām ir daudzas NCI-NCI-H460 mutācijas, piemēram, NCI-H460 KRAS mutācija, kas ir saistīta ar šūnu proliferāciju, augšanu, invāziju un metastāzēm.
NCI-H460 šūnu kultivēšanas informācija
Lai pareizi rīkotos ar NCI-H460 šūnu līniju un to uzturētu, jums jāzina šādi galvenie punkti. Jūs uzzināsiet par NCI-H460 dubultošanās laiku, NCI-H460 barotni un pamata šūnu kultivēšanas procedūrām NCI-H460 plaušu vēža šūnām.
NCI-H460 šūnu kultivēšanas galvenie punkti
|
Dubultošanās laiks: |
NCI-H460 dubultošanās laiks ir aptuveni 33 stundas. |
|
Adhēzijas vai suspensijas veidā: |
NCI-H460 plaušu vēža šūnas ir adherentas. |
|
Subkultivēšanas attiecība: |
NCI-H460 šūnu līnijai ieteicamā dalīšanas attiecība ir 1:2 un 1:4. Pēc vecās barotnes izņemšanas adherētās šūnas skalo ar 1 x fosfātu buferšķīdumu. Pēc tam šūnas inkubē ar Accutase pasāžas šķīdumu 8 līdz 10 minūtes istabas temperatūrā. Disociētās šūnas resuspendē barotnē un centrifugē. Novāktās šūnas atkal resuspendē un ielej jaunā kolbā kultivēšanai. |
|
Augšanas barotne: |
Kā NCI-H460 barotni izmanto RPMI 1640. To papildina ar 10 % fetālā liellopu seruma, 2,1 mM stabila glutamīna un 2,0 g/l NaHCO3. Barotne jāmaina 2 līdz 3 reizes nedēļā. |
|
Augšanas apstākļi: |
NCI-H460 kultūras uztur 37 °C temperatūrā mitrinātā inkubatorā ar nepārtrauktu 5% CO2 pieplūdi. |
|
Uzglabāšana: |
NCI-H460 plaušu vēža šūnas var ilgstoši uzglabāt šķidrā slāpekļa tvaika fāzē vai zem -150 °C temperatūrā elektriskā īpaši zemas temperatūras saldētavā. |
|
Saldēšanas process un vide: |
NCI-H460 šūnu sasaldēšanai un uzglabāšanai izmanto CM-1 vai CM-ACF barotni. Ieteicams izmantot lēnas sasaldēšanas metodi, lai aizsargātu maksimālu šūnu dzīvotspēju. |
|
Atkausēšanas process: |
Sasaldētās NCI-H460 šūnas atkausē iepriekš uzsildītā ūdens vannā (37 °C temperatūrā) 40 līdz 60 sekundes, līdz paliek neliels ledus gabaliņš. Atkausētajām šūnām pievieno svaigu barotni un centrifugē, lai atdalītu sasalušās barotnes sastāvdaļas. Savākto šūnu granulu atkal resuspendē, un šūnas iepilda jaunās kolbās ar barotni augšanai. NCI-H460 šūnām var būt nepieciešamas gandrīz 24 stundas, lai piestiprinātos pie kolbas virsmas. |
|
Bioloģiskās drošības līmenis: |
NCI-H460 plaušu vēža šūnas apstrādā un uztur 1. bioloģiskās drošības līmeņa laboratorijās. |
NCI-H460 šūnu priekšrocības un trūkumi
NCI-H460 ir plaši izmantota šūnu līnija plaušu vēža pētījumos. Šajā iedaļā tiks aplūkotas vispārīgās priekšrocības un trūkumi, kas saistīti ar NCI-H460 plaušu vēža šūnām.
Priekšrocības
NCI-H460 nedaliklo šūnu plaušu vēža šūnu līnijas NCI-H460 priekšrocības ir šādas:
-
Audzēja izcelsme
NCI-H460 šūnu līnija ir iegūta no plaušu lielšūnu karcinomas pacienta, kas pārstāv šo konkrēto plaušu vēža veidu. Tās izmanto kā modeli plaušu vēža bioloģijas izpētei un jaunu un efektīvu ārstēšanas metožu izstrādei. NCI-H460 šūnām piemīt audzēja potenciāls, un tās var injicēt imūndeficētām pelēm, lai izveidotu in vivo audzēja modeļus audzēja augšanas, attīstības un potenciālo zāļu efektivitātes izpētei.
-
Augsts proliferācijas līmenis
NCI-H460 augšanas ātrums ir augstāks nekā citām plaušu bezdrumšūnu vēža šūnu līnijām, piemēram, A549. Šī priekšrocība palielina to pieejamību un palīdz pētniekiem veikt reproducējamus un laikietilpīgus eksperimentus.
Trūkumi
Ar NCI-H460 plaušu vēža šūnām saistītie trūkumi ir šādi:
-
Homogenitāte
NCI-H460 šūnas ir homogēnas, jo tās iegūtas no viena pacienta audzēja. Tāpēc tām parasti trūkst sarežģītības un heterogenitātes, kas vērojama pacientu audzējos.
NCI-H460 šūnu izmantošana pētniecībā
NCI-H460 plaušu vēža šūnas plaši izmanto pētījumos, kas saistīti ar plaušu karcinomu. Šeit ir minēti daži svarīgi NCI-H460 šūnu izmantošanas veidi pētniecībā:
- Plaušu vēža pētījumi: NCI-H460 šūnas ir nenovērtējams modelis, lai pētītu šūnu un molekulāros mehānismus, kas saistīti ar audzēju attīstību, augšanu un metastāzēm. Turklāt tās izmanto, lai pētītu obligātos signalizācijas ceļus, molekulāros mērķus un dažādas ģenētiskās mutācijas, kas saistītas ar plaušu vēža progresēšanu. Lai efektīvi pētītu šos faktorus, ar NCI-H460 šūnām ir veikti vairāki pētījumi. Pētījumā, kas tika veikts 2019. gadā, tika ierosināts, ka pārmērīgi ekspresēts kodola visur klātesošā kazeīna un ciklīnneatkarīgo kināžu substrāts (NUCKS) ir iesaistīts audzēja šūnu augšanā, regulējot PI3K/AKT signalizācijas ceļu [1]. Tāpat in vitro un in vivo pētījumā tika izmantotas NCI-H460 šūnas, lai pētītu eIF4E gēna lomu. Rezultāti atklāja, ka eIF4E gēns ir iesaistīts plaušu karcinomas augšanā un angioģenēzē, un to var izmantot, lai izstrādātu daudzsološus pretplaušu vēža ārstēšanas līdzekļus [2].
- Zāļu atklāšana un izstrāde: NCI-H460, cilvēka plaušu vēža šūnu līnija, tiek plaši izmantota zāļu atklāšanas un izstrādes pētījumos. Pētnieki izmanto šīs šūnas, lai pētītu jaunu zāļu kandidātvielu, mērķterapiju un ārstēšanas veidu, kas galvenokārt vērsti pret NCI-H460 KRAS mutācijām, toksicitāti un efektivitāti. Haoyue Hu un kolēģu 2023. gadā veiktajā pētījumā tika izmantotas NCI-H460 šūnas, lai pētītu anlotiniba zāļu pretvēža iedarbību. Rezultāti parādīja, ka anlotinibs daļēji ietekmē KRAS mutantu plaušu vēža šūnu augšanu, kavējot MEK/ERK signalizācijas kaskādi [3]. Līdzīgi, izmantojot NCI-H460 šūnas, tika pārbaudīta fenolu savienojuma, karnozīnskābes, antiproliferatīvā un proapoptētiskā aktivitāte [4].
- Rezistence pret zālēm: NCI-H460 šūnu līnija ir ideāli piemērota plaušu karcinomas rezistences pret zālēm mehānisma izpētei. Pētnieki izmanto šīs šūnas, lai izstrādātu rezistences pret zālēm modeļus, lai noteiktu pamatā esošos gēnus, molekulāros faktorus un signalizācijas ceļus. Piemēram, pētījumā tika izstrādātas NCI-H460 NCI-H460 šūnas, kas ir rezistentas pret daudzmērķīgu antifolātu līdzekli pemetreksedu, lai pētītu pemetreksedu rezistences pamatā esošos molekulāros mehānismus nesmalto šūnu plaušu vēža šūnās [5].
NCI-H460 šūnu līnijas iegāde: Jūsu vārti plaušu vēža pētījumiem
Pētniecības publikācijas ar NCI-H460 šūnām
Šeit ir dažas interesantas pētniecības publikācijas par plaušu karcinomas šūnu līniju NCI-H460.
Dabiskais glikāns no melnajām pupiņām kavē vēža šūnu proliferāciju, izmantojot PI3K-Akt un MAPK ceļu
Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā Molecules (2023), ierosināts, ka dabiskais α-1,6-glikāns BBWPW no melnajām pupiņām inhibē NCI-H460 šūnu proliferāciju, regulējot PI3K/AKT/MAPK ceļu.
Šajā rakstā žurnālā Phytomedicine (2019) pētīts, ka dioscīna-6′-O-acetāts, jauns dabīgs savienojums, iedarbojas antiproliferatīvi uz NCI-H460 plaušu vēža šūnām.
miRNA-425-5p veicina plaušu vēža augšanu, izmantojot PTEN/PI3K/AKT signalizācijas asi
BMC Pulmonary Medicine (2020) pētījumā teikts, ka mikroRNA-425-5p veicina plaušu karcinomas audzēju veidošanos, izmantojot PTEN/PI3K/AKT ceļu.
Šajā rakstā Molecular Medicine Reports (2017) ierosināts kvinalizarīna savienojuma pretvēža potenciāls un pamatā esošie mehānismi NCI-H460 un citās plaušu vēža šūnās.
Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā Food and Function (2019), uzsvērts Eucalyptus globulus labill. ekstrakta potenciālais pretvēža efekts, izmantojot NCI-H460 šūnas. Iegūtie rezultāti liecina, ka augu ekstrakts uzrādīja šādu iedarbību, palielinot NCI-H460 p53 ekspresiju un modulējot šūnu cikla profilu.
NCI-H460 šūnu līnijas resursi: N-HI-HI-HI resursu avoti: protokoli, videoklipi un citi materiāli
Šeit ir daži tiešsaistes resursi, kuros aprakstītas NCI-H460 plaušu vēža šūnas.
- NCI-H460 šūnu transfekcija: Šajā videomācību materiālā ir soli pa solim aprakstīta NCI-H460 šūnu transfekcija ar plazmīdu DNS.
Šajās saitēs ir sniegta obligāta informācija par H460 šūnu kultūru.
- NCI-H460 šūnas: Šī tīmekļa vietne sniegs svarīgu informāciju par NCI-H460 šūnu barotnēm, subkulturēšanas, sasaldēšanas un atkausēšanas procedūrām.
- NCI-H460 šūnu pasāža: Šajā dokumentā atradīsiet norādījumus par NCI-H460 šūnu līnijas pasēšanu un subkulturēšanu. Turklāt tas arī palīdzēs apgūt NCI-H460 šūnu transfekcijas protokolu.
NCI-H460 šūnu līnijas izpēte: Biežāk uzdotie jautājumi un ieskats
Atsauces
- Hu, C., et al., NUCKS veicina plaušu vēža šūnu proliferāciju, migrāciju un invāziju, izmantojot Pi3k/Akt signalizācijas ceļu. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): p. E55-61.
- Qi, X., et al, EGPI-1, jauns eIF4E/eIF4G mijiedarbības inhibitors, inhibē plaušu vēža šūnu augšanu un angiogenezi, izmantojot Ras/MNK/ERK/eIF4E signalizācijas ceļu. Chemico-Biological Interactions, 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H., et al., Anlotinibs iedarbojas pretvēža iedarbībā uz KRAS mutētu plaušu vēža šūnu, nomācot MEK/ERK ceļu. Cancer Management and Research, 2020: p. 3579-3587.
- Corveloni, A.C., et al., Carnosic acid exhibits antiproliferative and proapoptotic effects in tumoral NCI-H460 and nontumoral IMR-90 lung cells. Journal of Toxicology and Environmental Health, A daļa, 2020. 83(10): p. 412-421.
- Xu, Y.-L., et al., Pret pemetreksedu rezistentu NCI-H460/PMT šūnu izveide un raksturošana. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (agrāk Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): p. 731-739.