MX-1 šūnu līnija

MX-1 ir cilvēka krūts adenokarcinomas šūnu līnija, kas iegūta no krūts vēža ksenotransplantāta modeļa atimiskās pelēs. Cilvēka krūts adenokarcinomas šūnas tika iegūtas no 29 gadus vecas kaukāziešu izcelsmes sievietes krūts audzēja. MX-1 šūnas ir trīskārši negatīvā krūts vēža (TNBC) šūnas, kuras plaši izmanto pētījumos par zāļu rezistenci, šūnu signālu pārraidi, zāļu iedarbības mehānismiem utt.

MX-1 šūnu izcelsme un vispārīga informācija

Pirms sākat darbu ar šo šūnu līniju, jums jāiepazīstas ar tās pamata īpašībām. Mēs apskatīsim gandrīz visu vispārīgo informāciju par MX-1 šūnu līniju.

Nemirstīgā MX-1 šūnu līnija ir tumorogēna šūnu līnija, kas izveidota no audzēja ksenotransplantāta. MX-1 šūnas tiek uzskatītas par trīskārši negatīva krūts vēža (TNBC) veidu [1]. Turklāt šīs šūnas ir estrogēna receptoru un p53 negatīvas, jo tās neekspresē šos gēnus.

MX-1 šūnas — trīskārši negatīvā krūts vēža modelis

MX-1 šūnu līnijas kultivēšanas apstākļi nav sarežģīti. Šīs šūnas var viegli pavairot un izmantot dažādās pētniecības laboratorijās transfekcijas pētījumiem. Pagaidu transfekcijas metode parasti tiek izmantota, lai pētītu šīs šūnu līnijas pamatā esošos šūnu mehānismus un gēnu ekspresijas modeļus [2, 3].

Šī šūnu līnija ir uzticama modelisistēma krūts karcinomām. To var izmantot, lai izprastu slimības progresēšanas molekulāros mehānismus, kā arī lai atlasītu un izstrādātu zāles slimības apkarošanai. Konkrētāk, cilvēka MX-1 krūts adenokarcinomas šūnu līnija var būt alternatīva TNBC šūnām, jo tā ir estrogēnu receptoru negatīva [4].

Publicēts: 2023 | Pēdējā pārskatīšana: 2026. gada maijs

MX-1 šūnu līnija: informācija par kultivēšanu

• Pārošanās laiks: INS-1 šūnu populācijas pārošanās laiks ir aptuveni 44 stundas.
• Adherējošas vai suspensijā: INS-1 šūnas aug gan suspensijā, gan adherējošā formā.
• Subkultivācijas attiecība: INS-1 šūnas subkultivē ar sadalīšanas attiecību 1:3. Īsumā — suspendētās šūnas savāc. Adhēzijas šūnas noskalo ar PBS un inkubē ar Accutase šķīdumu. Pēc atdalīšanās šūnām pievieno svaigu barotni. Pēc tam gan suspensijas, gan adhezīvās šūnas tiek centrifugētas un savāktas. Šūnas tiek rūpīgi atkārtoti suspendētas un sadalītas jaunās kolbās turpmākai augšanai.
• Augšanas barotne: INS-1 žurku insulīnomas šūnu līnijas kultivēšanai izmanto RPMI 1640. Barotne tiek papildināta ar 10 % termiski inaktivētu liellopu embriju serumu, 2,1 mM stabilu glutamīnu, 10 mM HEPES, 2,0 g/l NaHCO₃ un 1 mM nātrija piruvātu.
• Augšanas apstākļi: INS-1 šūnas tiek turētas mitrinātā inkubatorā, kas iestatīts uz 37 °C temperatūru un ar nepārtrauktu 5 % CO₂ pievadi.
• Uzglabāšana: INS-1 beta šūnas var ilgtermiņā uzglabāt šķidrā slāpekļa tvaika fāzē vai elektriskajā saldētavā temperatūrā zem -150 °C.
• Sasaldēšanas process un barotne: INS-1 šūnu lēnai sasaldēšanai izmanto CM-1 vai CM-ACF barotnes. Tas ļauj temperatūrai pazemināties tikai par 1 °C minūtē, lai saglabātu šūnu dzīvotspēju.
• Atkausēšanas process: Sasaldētās INS-1 šūnas atkausē ūdens vannā, kas iepriekš iestatīta uz 37 grādiem pēc Celsija skalas, 40–60 sekundes. Pēc atkausēšanas šūnām pievieno svaigu barotni un tās tieši ielej jaunā kolbā audzēšanai. Pēc 24 stundām barotni nomaina, lai izvadītu sasaldēšanas barotnes sastāvdaļas.
• Bioloģiskās drošības līmenis: INS-1 žurku insulīnomas šūnu kultivēšanai ir nepieciešama 1. bioloģiskās drošības līmeņa laboratorija.

MX-1 šūnas: pielietojums pētniecībā

Šo cilvēka krūts adenokarcinomas MX-1 šūnu līniju parasti izmanto pētījumos par krūts vēzi tādu šūnu kā MDA-MB-231 vai MCF-7 vietā. Šeit ir minēti daži šīs šūnu līnijas īpašie pielietojumi vēža pētniecībā.  

Zāļu rezistences mehānismi

MX-1 šūnas izmanto, lai pētītu molekulāros faktorus, kas ietekmē rezistences veidošanos pret krūts vēža zālēm. Pētījumos plaši izmantotas MX-1 šūnas, lai izveidotu zāļu rezistences modeļus. 2021. gadā publicētā pētījumā tika ziņots par MX-1 šūnu izmantošanu, lai izveidotu doksorubicīnam rezistentu krūts vēža šūnu līniju. Izstrādātais šūnu modelis apstiprināja ABC transportētāja ABCB1 un epitēlija-mezenhīmas pārejas (EMT) līdzdalību ķīmijterapijas rezistences iegūšanā [5].

Gēnu ekspresija/šūnu signālceļi

MX-1 šūnu līniju var īslaicīgi transfektēt, lai noskaidrotu gēnu ekspresijas modeļus un šūnu signālceļus. Pētījumos MX-1 šūnas ir izmantotas shRNA (īsās matu adatas formas RNS) un nekodējošās RNS transfekcijai, lai izpētītu to ietekmi uz krūts vēža šūnu proliferāciju un augšanu. Turklāt tiek noskaidroti saistītie gēnu signālceļi [2, 6].

Potenciālo inhibitoru skrīninga veikšana

MX-1 šūnas var izmantot potenciālo zāļu pret krūts vēzi skrīningam, jo tās imitē vēža šūnu mikrovidē. Pētījumā ir pierādīta mikrotubulu toksīna vinorelbīna terapeitiskā aktivitāte, kas MX-1 šūnās izraisīja šūnu nāvi un poliploīdiju [4].

Pasūtiet savu MX-1 šūnu līniju jau šodien

MX-1 šūnu līnija — resursi: protokoli, video un cits materiāls

Par kultivēšanas un transfekcijas metodēm pieejamie resursi ir ierobežoti, taču mēs esam apkopojuši jums pēc iespējas vairāk informācijas.

Šūnu kultivēšanas protokoli

MX-1 šūnas tiek izmantotas daudzos pētījumos par pārejošo transfekciju. Šeit mēs esam uzskaitījuši dažus resursus, kas palīdzēs jums transfekcijas protokolu izstrādē.

• MX-1 šūnu transfekcija: Šajā publikācijā ir aprakstīts protokols par siRNA transfekciju MX-1 šūnās, lai izstrādātu gēna izslēgšanas modeli.
• Zīdītāju šūnu transfekcija: Šajā rakstā ir apkopota visa būtiskā informācija par transfekcijas metodēm, ko izmanto zīdītāju šūnu līnijās.

Mēs ceram, ka šis raksts jums ir sniedzis vērtīgas zināšanas par MX-1 šūnu līniju un ka jūs esat ieguvuši labāku izpratni par to, kā šīs šūnas kultivēt, uzturēt un izmantot savos pētījumos. Ja jūs esat ieinteresēti strādāt ar MX-1 šūnu līniju, nevilcinieties pasūtīt to pie mums, lai sāktu savu pētniecības ceļojumu!

Biežāk uzdotie jautājumi par krūts karcinomas šūnu līniju MX-1

Atsauces

1. Stefanski, C.D. un J.R. Prosperi, Cīņa pret CHK1 rezistenci trīskārši negatīvā krūts vēža gadījumā: EGFR inhibīcija kā potenciāla kombinētā terapija. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): 229. lpp.
2. Vasiyani, H. u.c., cGAMP analogs c-di-AMP aktivizē STING mediēto šūnu nāves ceļu estrogēnu receptoru negatīvās krūts vēža šūnās. Apoptosis, 2021. 26: 293.–306. lpp.
3. Xiang, S., et al., Apoptozes inhibitoriem līdzīgā proteīna-2 proteomiskā analīze attiecībā uz krūts vēža šūnu proliferāciju. Molecular Medicine Reports, 2022. 25(3): 1.–11. lpp.
4. Nakajima, H., C. Furukawa un J. Magae, „Vinorelbīns, mikrotubulu toksīns, inducē apoptozi un poliploīdiju cilvēka trīskārši negatīvās krūts vēža šūnu līnijā MX-1”. Gan to Kagaku ryoho. Cancer & Chemotherapy, 2019. 46(3): 447.–451. lpp.
5. Kubiliute, R. u.c., Negenotoksiskais ABCB1 aktivators tetrafenilfosfonijs var veicināt doksorubicīna rezistenci MX-1 krūts vēža šūnu līnijā. Scientific reports, 2021. 11(1): 1.–11. lpp.
6. Jiang, R., et al., Krūts vēža mikomikas analīze: gara nekodējošā RNS linc01561 darbojas kā ceRNA, kas iesaistīta krūts vēža progresēšanā. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2018. 102: 1.–9. lpp.