MX-1 šūnu līnija

MX-1 ir cilvēka krūts adenokarcinomas šūnu līnija, kas iegūta, izmantojot krūts vēža ksenogrāfta modeli atimiskām pelēm. Cilvēka krūts adenokarcinomas šūnas tika iegūtas no 29 gadus vecas baltādainas sievietes krūts audzēja. MX1 šūnas ir trīskārši negatīva krūts vēža (TNBC) šūnas, ko plaši izmanto zāļu rezistences, šūnu signalizācijas, atbildes reakcijas uz zālēm mehānisma u. c. pētījumiem.

Izcelsme un vispārīga informācija par MX-1 šūnām

Pirms strādāt ar šo šūnu līniju, jums vajadzētu uzzināt tās būtību. Mēs apskatīsim gandrīz visu vispārējo informāciju par MX-1 šūnu līniju.

Nemirstīgā MX-1 šūnu līnija ir audzēja šūnu līnija, kas izveidota no audzēja ksenotransplantāta. MX-1 šūnas tiek uzskatītas par trīskārši negatīva krūts vēža (TNBC) paveidu [1]. Turklāt šīs šūnas ir estrogēnu receptoru un p53 negatīvas, jo tās neekspresē šos gēnus.

MX-1 šūnas - trīskārši negatīva krūts vēža modeļa sistēma

MX-1 šūnu līnijas kultivēšanas apstākļi nav izvēlīgi. Šīs šūnas var viegli pavairot un izmantot dažādās pētniecības laboratorijās transfekcijas pētījumiem. Ar transientās transfekcijas metodi šajā šūnu līnijā parasti tiek pētīti šūnas pamatmehānismi un gēnu ekspresijas modeļi [2, 3].

Šī šūnu līnija ir piemērota krūts karcinomu modeļa sistēma. To var izmantot, lai izprastu slimības progresēšanas molekulāros mehānismus, kā arī lai veiktu slimības apkarošanas zāļu skrīningu un izstrādātu zāles. Konkrētāk, cilvēka MX-1 krūts adenokarcinomas šūnu līnija var būt alternatīva TNBC šūnām, jo tā ir estrogēnu receptoru negatīva [4].

MX-1 šūnu līnija: Informācija par kultivēšanu

• Dubultošanās laiks: INS-1 šūnu populācijas dubultošanās laiks ir aptuveni 44 stundas.
• Adhēzijas vai suspensijas veidā: INS-1 šūnas aug gan suspensijas, gan adhēzijas formā.
• Subkultivēšanas attiecība: INS-1 šūnas subkultivē ar dalījuma attiecību 1:3. Īsumā, suspendētās šūnas savāc. Adherētās šūnas skalo ar PBS un inkubē ar Accutase šķīdumu. Pēc atdalīšanas šūnām pievieno svaigu barotni. Pēc tam gan suspendētās, gan adherētās šūnas centrifugē un savāc. Šūnas uzmanīgi resuspendē un iepilda jaunās kolbās audzēšanai.
• Augšanas barotne: INS-1 žurku insulinoma šūnu līnijas kultivēšanai izmanto RPMI 1640. Barotni papildina ar 10 % termiski inaktivēta liellopu augļa seruma, 2,1 mM stabila glutamīna, 10 mM HEPES, 2,0 g/l NaHCO3 un 1 mM nātrija piruvāta.
• Augšanas apstākļi: INS-1 šūnas tiek turētas mitrinātā inkubatorā 37 °C temperatūrā ar pastāvīgu 5 % CO2 pieplūdi.
• Uzglabāšana: INS-1 beta šūnas var ilgstoši uzglabāt šķidrā slāpekļa tvaika fāzē vai zem -150 °C temperatūrā elektriskā saldētavā.
• Saldēšanas process un vide: INS-1 šūnu sasaldēšanai izmanto CM-1 vai CM-ACF barotni, izmantojot lēnu sasaldēšanas procesu. Lai aizsargātu šūnu dzīvotspēju, temperatūra minūtē pazeminās tikai par 1 °C.
• Atkausēšanas process: Sasaldētās INS-1 šūnas atkausē ūdens vannā, kas iepriekš iestatīta 37 °C temperatūrā, 40 līdz 60 sekundes. Pēc atkausēšanas šūnām pievieno svaigu barotni un tieši ielej jaunā kolbā augšanai. Pēc 24 stundām barotni nomaina, lai likvidētu sasalušās barotnes sastāvdaļas.
• Bioloģiskās drošības līmenis: INS-1 žurku insulinoma šūnu kultivēšanai nepieciešama 1. bioloģiskās drošības līmeņa laboratorija.

MX-1 šūnas: Lietojumi pētniecībā

Šo cilvēka krūts adenokarcinomas MX-1 šūnu līniju parasti izmanto krūts vēža pētījumos tādu šūnu kā MDA-MB-231 vai MCF-7 vietā. Šeit ir minēti daži īpaši šīs šūnu līnijas lietojumi vēža pētījumos.

Rezistences pret zālēm mehānismi

MX-1 šūnas izmanto, lai pētītu molekulāros faktorus, kas veicina rezistences veidošanos pret krūts vēža zālēm. Pētījumos plaši izmanto MX-1 šūnas, lai izveidotu pret zālēm rezistentus modeļus. Pētījumā, kas publicēts 2021. gadā, tika ziņots par MX-1 šūnu izmantošanu, lai izveidotu pret doksorubicīnu rezistentu krūts vēža šūnu līniju. Izstrādātais šūnu modelis apstiprināja ABC transportiera ABCB1 un epitēlija-mezenhimālās pārejas (EMT) iesaisti ķīmorezistences iegūšanā [5].

Gēnu ekspresija/šūnu signālu ceļš

MX-1 šūnu līniju var transfekēt transiēntermiski, lai noskaidrotu gēnu ekspresijas modeļus un šūnu signalizācijas ceļus. Pētījumos ir izmantotas MX-1 šūnas shRNA (īsas matiņu RNA) un nekodējošas RNA transfekcijai, lai izpētītu to ietekmi uz krūts vēža šūnu proliferāciju un augšanu. Turklāt ir noskaidroti saistītie gēnu signalizācijas ceļi [2, 6].

Potenciālo inhibitoru skrīnings

MX-1 šūnas var izmantot potenciālo zāļu pret krūts vēzi skrīningam, jo tās imitē vēža šūnu mikrovidi. Pētījumā ir pierādīta mikrotubulu toksīna vinorelbīna terapeitiskā aktivitāte, kas izraisīja šūnu nāvi un poliploīdiju MX-1 šūnās [4].

Pasūtiet savu MX-1 šūnu līniju jau šodien

MX-1 šūnu līnija Resursi: Protokoli, videoklipi un citi resursi

Pieejamie resursi par kultivēšanas un transfekcijas metodēm ir ierobežoti, taču mēs apkopojām pēc iespējas vairāk informācijas.

Šūnu audzēšanas protokoli

MX-1 šūnas tiek izmantotas daudzos pārejošas transfekcijas analīzes pētījumos. Šeit mēs esam uzskaitījuši dažus resursus, kas palīdzēs jums ar transfekcijas protokoliem.

• MX-1 šūnu transfekcija: Šajā publikācijā aprakstīts protokols transfekcijai ar siRNA MX-1 šūnās, lai izstrādātu gēnu izslēgšanas modeli.
• Zīdītāju šūnu transfekcija: Šajā rakstā ir visa būtiskākā informācija par zīdītāju šūnu līnijām izmantotajām transfekcijas metodēm.

Mēs ceram, ka šis raksts ir sniedzis jums vērtīgas zināšanas par MX-1 šūnu līniju un ka esat guvuši labāku izpratni par to, kā šīs šūnas audzēt, uzturēt un izmantot savos pētījumos. Ja jūs interesē darbs ar MX-1 šūnu līniju, nevilcinieties un pasūtiet pie mums, lai sāktu savu pētniecības ceļu!

Biežāk uzdotie jautājumi par krūts karcinomas šūnu līniju MX-1

Atsauces

1. Stefanski, C.D. un J.R. Prosperi, Cīņa ar CHK1 rezistenci pret trīskārši negatīvu krūts vēzi: EGFR inhibīcija kā potenciāla kombinētā terapija. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): p. 229.
2. Vasiyani, H., et al., The analog of cGAMP, c-di-AMP, activates STING mediated cell death pathway in estrogen-receptor negative breast cancer cells. Apoptosis, 2021. 26: p. 293-306.
3. Xiang, S., et al., Proteomic analysis of inhibitor of apoptosisprotein-likeprotein-2on breast cancer cell proliferation ( Apoptozes olbaltumvielu inhibitora līdzīgāproteīna-2ietekme uz krūts vēža šūnu proliferāciju ). Molecular Medicine Reports, 2022. 25(3): p. 1-11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa, and J. Magae, Vinorelbine, a Microtubule Toxin, Induces Apoptosis and Polyploidy in MX-1, a Triple-Negative Human Breast Cancer Cell Line. Gan to Kagaku ryoho. Cancer & Chemotherapy, 2019. 46(3): p. 447-451.
5. Kubiliute, R. un citi, Nongenotoksiskais ABCB1 aktivators tetrafenilfosfonijs var veicināt rezistenci pret doksorubicīnu MX-1 krūts vēža šūnu līnijā. Scientific reports, 2021. 11(1): p. 1-11.
6. Jiang, R., et al., Mixomics analysis of breast cancer: Ilgi nekodējošā RNS linc01561 darbojas kā krūts vēža progresēšanā iesaistītā ceRNA. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2018. 102: p. 1-9.