MCF-7 šūnu līnija: Krūts vēža pētījumu un zāļu testēšanas stūrakmens
MCF-7 šūnu līnija, kas izveidota 1973. gadā no cilvēka krūts adenokarcinomas šūnām, ir krūts vēža pētījumu avangardā, nodrošinot kritiski svarīgu modeli, lai atklātu estrogēnu un progesterona receptoru pozitīvu krūts vēžu sarežģīto bioloģiju. Šīs šūnas kalpo kā cilvēka krūts vēža mikrokosms, kam piemīt īpašības, kas ir būtiskas gan no hormoniem atkarīgas, gan neatkarīgas audzēja augšanas izpētei. Pētnieki izmanto MCF-7 šūnas, lai izpētītu tādu hormonu kā estrogēns un tamoksifēns sarežģīto deju vēža šūnu proliferācijas regulēšanā, iedziļinoties molekulārajās niansēs no sferoīdu veidošanās līdz klīniskā krūts vēža progresēšanai
Pētījumos par metastātisku krūts vēzi MCF-7 šūnas ir izšķirošas, un tās tiek izmantotas modernās pieejās, piemēram, iestrādājot mikrotīklos skeletos vai brīvos hidrogēlos, kas imitē audzēja dabisko vidi. Tas palīdz rūpīgi izpētīt metastātisku slimību, jo īpaši sievietēm pēc menopauzes, un atšķirīgo ietekmi uz kreiso un labo krūti. Šā pētījuma pamatā ir farmakogēniskie un farmakoepigenētiskie apsvērumi, un MCF-7 šūnas izgaismo stadijai specifiskās slimības īpašības un atbildes reakciju uz ārstēšanu in vivo.
MCF-7 šūnas kalpo arī kā pamats onkoloģiskajos pētījumos, lai pārbaudītu inovatīvas terapijas, piemēram, augstsprieguma elektroķīmijterapiju, un dzīvnieku modeļos, kas precīzi atdarina cilvēka krūts audzēja šūnas. Vēl viens rūpīgi pētīts aspekts ir mezenhimālo cilmes šūnu loma šo audzēja šūnu uzvedības modulēšanā. Turklāt izpratne par estrogēnu, androgēnu un krūts vēža šūnu augšanas mijiedarbību, izmantojot MCF-7, sniedz nenovērtējamas atziņas, veicinot nepārtrauktu zināšanu gūšanu arvien augošajā vēža pētniecības jomā.
MCF-7 šūnu līnija: Izcelsme un vispārīga informācija
Pirms sākt strādāt ar MCF-7 šūnu līniju, ir svarīgi izprast tās morfoloģiju, šūnu izmēru un citas vispārīgas īpašības.
Nosaukums "MCF-7" apzīmē Michigan Cancer Foundation - 7 (Mičiganas vēža fonds - 7). To izveidoja Dr. Soule Mičiganas Vēža fondā Detroitā, Mičiganas štatā. Šī šūnu līnija tika izolēta 1970. gadā no 69 gadus vecas baltādainas sievietes ar metastātisku krūts adenokarcinomu pleiras izplūdumu. MCF-7 ir krūts vēža Luminal A apakštipa krūts vēzis, kas ekspresē estrogēnu, progesterona un glikokortikoīdu receptorus [1, 2].
MCF-7 šūnas ir hormonāli atkarīgas krūts vēža šūnas. Šīm krūts epitēlija šūnām ir zems metastātisks potenciāls, un tās ir mazāk agresīvas salīdzinājumā ar hormonāli neatkarīgajām MDA-MB-231 šūnām [3].
- MCF-7 šūnu morfoloģija:epitēlijveidīga morfoloģija; šūnas aug kā monoslāņi ar spēcīgām šūnu saaugumiem; bruģakmens izskats
- Šūnu izmērs: No 19,9 μm līdz 33,9 μm
- Genoms un ploidija: Modālais hromosomu skaits: 82; plojīdijas diapazons: no 66 līdz 87
- MCF-7 šūnu līnijas varianti: ir vairāki KO varianti, kam ir atšķirīgi ģenētiskie profili un gēnu ekspresija salīdzinājumā ar oriģinālajām MCF-7 šūnām [4]
Informācija par MCF-7 šūnu kultūru
MCF-7 ir plaši kultivēta šūnu līnija krūts vēža pētniecības laboratorijās. Pirms šo šūnu kultivēšanas jums var rasties daudz jautājumu, piemēram, kāds ir MCF-7 šūnu dubultošanās laiks? Vai MCF-7 šūnas ir adherentas? Kāda ir MCF-7 šūnu barotne? Šajā sadaļā mēs runāsim par šādiem galvenajiem jautājumiem:
|
Aspekts |
Apraksts |
|
Dubultošanās laiks |
MCF-7 šūnu vidējais dubultošanās laiks ir 24 stundas |
|
Adhēzijas vai suspensijas veidā |
MCF-7 šūnas ir adherentas šūnas, kas aug kā monoslāņi un veido šūnu agregātus |
|
Sēšanas blīvums |
Lēni augošās MCF-7 šūnas izsēj ar blīvumu 3 x 10^4 šūnas/cm^2. Pēc barotnes noņemšanas adherētās MCF-7 šūnas mazgā ar 1 x PBS. Šūnas atdalītas, izmantojot Accutase pasāžas šķīdumu. Pievieno barotni, un šūnas centrifugē. Šūnu granulas resuspendē un pārnes uz jaunām kolbām ar svaigu barotni |
|
Augšanas barotne |
MCF-7 šūnu audzēšanai izmanto Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM), kas papildināta ar 10 % FBS un 2,5 mM L-glutamīnu. Barotni atjauno 2 līdz 3 reizes nedēļā |
|
Augšanas apstākļi |
MCF-7 šūnas audzē mitrinātā inkubatorā 37 °C temperatūrā ar 5 % CO2 |
|
Uzglabāšana |
Lai saglabātu šūnu dzīvotspēju, šūnas uzglabā šķidrā slāpeklī tvaika fāzē (-195°C) |
|
Sasaldēšanas process un barotne |
MCF-7 šūnu sasaldēšanai priekšroka tiek dota lēnas sasaldēšanas metodei, pakāpeniski samazinot temperatūru par 1°C, lai aizsargātu šūnu dzīvotspēju. MCF-7 šūnām izmantotā sasaldēšanas barotne ir CM-1 vai CM-ACF |
|
Atkausēšanas process |
Sasaldētās MCF-7 šūnas strauji sakrata iepriekš uzsildītā ūdens vannā (37 °C) 40-60 sekundes. Pudelītē atstāj nelielu ledus gabaliņu, lai to atdzesētu. Šūnas var tieši kultivēt kolbā ar svaigu barotni vai centrifugēt, lai noņemtu sasalstošo barotni. Iegūto šūnu granulu uzmanīgi resuspendē svaigā barotnē un iepilda kolbās augšanai |
|
Bioloģiskās drošības līmenis |
Darbam ar trīskārši pozitīvām MCF-7 šūnām izmanto 1. bioloģiskās drošības līmeni |
MCF-7 šūnas: Priekšrocības un ierobežojumi
Visām vēža šūnu līnijām ir daži plusi un mīnusi. Kādas ir MCF-7 šūnu priekšrocības, kas padara tās pievilcīgas izmantošanai pētniecībā? Un kādi ir MCF-7 šūnu līnijas ierobežojumi?
Priekšrocības
MCF-7 šūnu līnijai ir daudz priekšrocību. Lūk, dažas no tām ir svarīgākās:
- Labi raksturotas: MCF-7 šūnu līnija ir labi raksturota, tāpēc to bieži izvēlas vēža pētniecības laboratorijās
- Reaģē uz estrogēnu: MCF-7 ir estrogēnu jutīgas krūts vēža šūnas. To augšana un proliferācija ir atkarīga no estrogēniem, un to estrogēnu receptoru alfa (ERα) mRNS līmenis ir augstāks nekā ERβ. Tāpēc MCF-7 šūnas ir ļoti noderīgas, lai pētītu estrogēnu receptoru signālu nozīmi krūts vēža bioloģijā.
- Atkarīgas no hormoniem: MCF-7 šūnas ir tipisks hormonu receptoru pozitīva krūts vēža modelis, kas ir atkarīgs no hormoniem.
Ierobežojumi
MCF-7 šūnām parasti tiek piedēvēti šādi ierobežojumi:
- Lēns augšanas ātrums: Salīdzinot ar citām krūts vēža šūnu līnijām, MCF-7 šūnas aug lēni. Tāpēc, lai veiktu dažādus šūnu kultūru eksperimentus, šīs šūnas tiek izsētas ar salīdzinoši lielu šūnu blīvumu.
MCF-7 šūnas: MCF-7C: daudznozaru pētījumi un to ietekme uz krūts vēzi: daudznozaru pētījumi un ietekme uz krūts vēzi
Krūts vēža raksturošana ar MCF-7 šūnām
MCF-7 šūnas ir stūrakmens krūts vēža pētniecībā, un to izcelsme ir cilvēka krūts adenokarcinomas audi, kas iegūti 1973. gadā. Šīs šūnas ir īpaši nozīmīgas estrogēnu receptoru pozitīva krūts vēža izpētē, jo tajās ir estrogēnu receptoru ekspresija. Tās ļauj pētniekiem izpētīt no estrogēna atkarīgās augšanas nianses un hormonālās terapijas, piemēram, tamoksifēna, efektivitāti, papildus noskaidrojot darbības mehānismus un rezistenci pret šo terapiju
Papildus ar hormoniem saistītiem pētījumiem MCF-7 šūnas ir ļoti svarīgas krūts vēža izpētei molekulārā līmenī. To pielietojums ir plašs - no audzēju molekulārā profila analīzes līdz vēža šūnu proliferācijas un progresēšanas izpētei 2D kultūrās un trīsdimensiju mikrodaļiņās skefos, kas precīzi atspoguļo in vivo audzēja mikrovidi
Zāļu rezistences apkarošana krūts vēža gadījumā
MCF-7 šūnas ir devušas nozīmīgu ieguldījumu krūts vēža ārstēšanas rezistences pret zālēm izpratnē un pārvarēšanā. Izraisot rezistenci, iedarbojoties ar lielām ķīmijterapeitisko zāļu devām, pētnieki var izpētīt mehānismus, kas izraisa vēža recidīvu un samazina pacientu izdzīvošanas rādītājus. Padziļinātos pētījumos, kuros iesaistītas MCF-7 šūnas, ir atklāta garās nekodējošās RNS HOTAIR loma rezistencē pret zālēm, kas ir potenciāls terapeitiskās iejaukšanās mērķis
Nepārtraukta ķīmijterapeitisko zāļu izstrāde arī balstās uz MCF-7 šūnām, lai pārbaudītu dažādu vielu, tostarp dabisko produktu, sintētisko savienojumu un nanodaļiņu, pretvēža potenciālu. Šie centieni ir būtiski, lai radītu efektīvākus krūts vēža ārstēšanas veidus, kas spēj cīnīties ar pret pret zālēm rezistentiem vēža šūnu celmiem
Terapeitisko līdzekļu izstrādes un klīnisko pielietojumu veicināšana
Pētījumos, kuros izmantotas MCF-7 šūnas, gūtās atziņas tiek izmantotas arī krūts vēža terapijas izstrādē. MCF-7 šūnas, kas kalpo kā būtisks preklīnisko testu rīks, tiek izmantotas savienojumu skrīningam, citotoksicitātes noteikšanai un apoptozes indukcijas novērtēšanai. Šim pētījumam ir liela nozīme turpmākajos klīniskajos lietojumos, kur ar MCF-7 šūnām veikto pētījumu rezultāti arī turpmāk tiks izmantoti inovatīvās stratēģijās, lai uzlabotu pacientu aprūpi un ārstēšanas rezultātus
Atbloķējiet savu pētniecības potenciālu: Iegādājieties MCF-7 šūnu produktus jau šodien!
MCF-7 šūnas: Publikācijas
Par MCF-7 šūnām ir daudz publikāciju. Šajā iedaļā aplūkoti tikai daži nozīmīgi piemēri:
Šis raksts ir publicēts žurnālā Experimental and Therapeutic Medicine 2019. gadā, autors Zhixiang Li un kolēģi. Pētījumā ierosināts, ka garās nekodējošās RNS HOTAIR nojaukšana novērš krūts vēža MCF-7 šūnu rezistenci pret doksorubicīnu, regulējot PI3K/AKT/mTOR ceļu.
Šajā publikācijā, kas publicēta žurnālā Chemico-Biological Interactions, pētījumam par Guajadial savienojuma ietekmi uz rezistenci pret zālēm izmantotas standarta un pret zālēm rezistentās MCF-7 šūnas. Šis savienojums inhibē ABC transportiera ekspresiju un samazina PI3K/AKT ceļa darbību, lai mainītu multirezistenci pret zālēm.
Šajā publicētajā darbā aprakstīta kanabidiola un piecu ķīmijterapeitisko zāļu sinerģiskā mijiedarbība MCF-7 šūnās. Pētījumā ierosināta uz kanabidiola bāzes balstīta sinerģiska adjuvanta terapija krūts vēža ārstēšanai.
Šajā rakstā, kas publicēts žurnālā The EuroBiotech Journal, tika izmantotas MCF-7 šūnas, lai novērtētu dažu Tunisijas ārstniecības augu sastāvā esošo fenola savienojumu pretvēža iedarbību.
Pētījumā tika ierosināts Allium cepa lapu ekstraktu saturošas zaļās nanodaļiņas izmantot kā zāļu kandidātu. Šīm nanodaļiņām ir pretvēža un antioksidanta aktivitāte MCF-7 šūnās.
MCF-7 šūnu resursi: Protokoli, videoklipi un citi resursi
MCF-7 ir bieži kultivēta krūts vēža šūnu līnija. Par šo šūnu līniju ir pieejami vairāki resursi, kuros izskaidrota tās apstrāde, kultivēšana un transfekcijas protokoli.
Šūnu audzēšanas protokoli
Tālāk ir sniegta informācija par MCF-7 šūnu kultivēšanu.
- Šūnu sadalīšana: Šis dokuments palīdzēs apgūt MCF-7 šūnu sadalīšanas un atkausēšanas procesu.
- MCF-7 šūnas: Šis raksts sniegs visas pamatzināšanas un padziļinātas zināšanas par MCF-7 šūnām. Tajā ietverts arī MCF-7 šūnu kultivēšanas protokols.
Transfekcijas protokoli
Šeit ir daži avoti, kuros aprakstītas MCF-7 šūnu līnijas transfekcijas metodes.
- Plasmīdu DNS transfekcija MCF-7 šūnās: Šajā tīmekļa vietnes saitē atradīsiet detalizētu transfekcijas protokolu MCF-7 šūnām.
- MCF-7 šūnu transfekcija: Šī saite ietver optimizētus transfekcijas protokolus, kas saistīti ar MCF-7 šūnu līniju, ar kuriem dalījušies zinātnieki no visas pasaules.
Ar MCF-7 šūnu līniju saistītie videoklipi
Ir pieejami daudzi video resursi par MCF-7 šūnām. Šeit mēs aplūkosim dažus, kas saistīti ar MCF-7 transfekciju un kultivēšanu.
- MCF-7 šūnu transfekcija: Šajā videoklipā parādīts MCF-7 šūnu transfekcijas protokols.
- Šūnu pasāža: Šajā videoklipā ir izskaidrots pamatprotokols šūnu līniju kultivēšanai.
- Adhēzijas šūnu sasaldēšana: Šajā videoklipā ir sniegta informācija par adherentu šūnu līniju sasaldēšanu.
Mēs ceram, ka šis raksts jums ir sniedzis labas norādes par MCF-7 šūnu apstrādi, subkultivēšanu un uzturēšanu. Turklāt tas var palīdzēt jums uzzināt par šīs šūnu līnijas priekšrocībām un pielietojumu pētniecībā. Ja plānojat strādāt ar MCF-7 šūnām, pasūtiet pie mums.
Atbildes uz biežāk uzdotajiem jautājumiem: MCF-7 šūnu līniju izpēte
Atsauces
- Moon, H.-r., et al., "Krūts vēža invazijas apakštipa specifiska raksturošana, izmantojot mikrofluidisku audzēja platformu." PloS one, 2020, 15(6)
- Hegde, S.M., et al., "Kodolreceptoru (ER, PR un GR) un to steroīdu hormonu mijiedarbība MCF-7 šūnās" Mol Cell Biochem, 2016, 422(1-2)
- Comşa, Ş., A.M. Cimpean un M. Raica, "MCF-7 krūts vēža šūnu līnijas stāsts: 40 gadu pieredze pētniecībā" Anticancer research, 2015, 35(6)
- Lee, A.V., S. Oesterreich un N.E. Davidson, "MCF-7 šūnas - 45 gadu laikā mainījušas krūts vēža pētniecības un aprūpes gaitu" JNCI: Journal of the National Cancer Institute, 2015, 107(7)
- Li, Z., et al., "Knockdown of lncRNA-HOTAIR downregulates the drug-resistance of breast cancer cells to doxorubicin via the PI3K/AKT/mTOR signaling pathway" ("LncRNA-HOTAIR nomākšana samazina krūts vēža šūnu rezistenci pret doksorubicīnu, izmantojot PI3K/AKT/mTOR signalizācijas ceļu") Eksperimentālā un terapeitiskā medicīna, 2019, 18(1)
- Li, Y., et al., "Guajadial reverses multidrug resistance by inhibiting ABC transporter expression and supressing PI3K/Akt pathway in drug-resistant breast cancer cells" ("Guajadial maina multirezistenci, inhibējot ABC transportiera ekspresiju un nomācot PI3K/Akt ceļu pret zālēm rezistentās krūts vēža šūnās") Chemico-Biological Interactions, 2019, 305
- Ruenraroengsak, P., et al., "Frizzled-7-targeted delivery of cinc oxide nanoparticles to drug-resistant breast cancer cells" ("Cinka oksīda nanodaļiņu mērķēta piegāde uz pret zālēm rezistentām krūts vēža šūnām, izmantojot Frizzled-7") Nanoscale, 2019, 11(27)
- Shrihastini, V., et al, "Plant derived bioactive compounds, their anti-cancer effects and in silico approaches as an alternative target treatment strategy for breast cancer: An updated overview." Cancers, 2021, 13(24)
- Erdogan, O., et al, "Green synthesis of silver nanoparticles via Cynara scolymus leaf extracts: The characterization, anticancer potential with photodynamic therapy in MCF7 cells" PloS one, 2019, 14(6)
- Barbosa, A.M. un F. Martel, "Targeting glucose transporters for breast cancer therapy: Dabas un sintētisko savienojumu iedarbība." (The effect of natural and synthetic compounds Cancers, 2020, 12(1)
