Publicēts: 2023 | Pēdējā pārskatīšana: 2026. gada maijs

Jurkat E6.1 šūnu līnija

Jurkat E6.1 ir Jurkat šūnu līnijas klons — nemirstīga cilvēka T-limfocītu šūnu līnija, kas iegūta no perifērās asins. Tā tika izveidota 1977. gadā un tiek izmantota pētījumos, kas saistīti ar T-šūnu receptoru signālu pārraidi, T-šūnu un citu limfocītu adoptīvo terapiju pret vēzi, ar asinīm saistītu protoonkogēnu pētījumiem, šūnu izdzīvošanu un šūnu diferenciāciju.

Šajā rakstā mēs iekļausim visu informāciju un priekšnosacījumus, kas jums jāzina, pirms sākat darbu ar Jurkat E6.1 klonētajām šūnu līnijām, tostarp:

1. Izcelsme, vēsture un vispārīga informācija
2. Šūnu kultūras raksturlielumi
3. Jurkat E6.1 šūnu līniju pielietojumi
4. Pētniecības publikācijas
5. Priekšrocības un ierobežojumi
6. Resursi: protokoli, video un citi materiāli

 1. Izcelsme, vēsture un vispārīga informācija

Šeit ir apkopota visa nepieciešamā informācija par Jurkat E6.1 šūnu līnijas vēsturi, izcelsmi un vispārīgajām īpašībām, kā arī par tās apstrādi šūnu kultūrā.

• Jurkat E6.1 ir nemirstīga cilvēka T-limfocītu šūnu līnija. Šī klonētā šūnu līnija ir atvasināta no Jurkat šūnu līnijas, kas 1976. gadā tika iegūta no 14 gadus veca zēna perifērās asinis, kurš cieta no akūtas limfoblastiskas leikēmijas. Pēc izdalīšanas no asinīm šī šūnu līnija sākotnēji tika nosaukta par JM, jo abas nosaukumu daļas — JM un Jurkat — norāda, ka šīs šūnu līnijas ir izdalītas no viena un tā paša pacienta. Jurkat E6.1 šūnu līnija tika klonēta no šūnu atvasinājumiem, kas pazīstami kā Jurkat-FHCRC.
• E6.1 šūnu līnijas ir iegūtas no leikēmijas; šīs šūnu līnijas izmanto, lai palielinātu IL-2 ekspresiju, stimulējot tās ar monoklonālajiem antivielu vai lektīniem. Tās ekspresē T-šūnu antigēnu receptorus; tādēļ šīs šūnu līnijas var izmantot imūnsistēmas traucējumu izpētē un imūnonkoloģijas pētījumos.
• Jurkat E6.1 šūnu morfoloģija: Jurkat E6.1 šūnas tika izdalītas no leikēmijas pacienta un, salīdzinot ar T-limfocītiem, tām ir mainīta morfoloģija, kas padara tās par nemirstīgām šūnu līnijām. Limfoblastu šūnas veidojas, kad naīvie limfocīti tiek aktivizēti, antigēnu prezentējošajām šūnām parādot antigēnu. Tas izraisa palielinātu augšanu kodolā, citoplazmā, kā arī mRNA un proteīnu līmeņa paaugstināšanos.
• Šūnu izmērs: Jurkat E6.1 šūnu līnijas ir klonētas un imortalizētas, un to diametrs parasti ir no 10 līdz 16 μm (diametrs var atšķirties atkarībā no suspensijas veida). Šīm šūnu līnijām ir ļoti sfēriska forma.
• Genoms un hromosomu skaits: Šīs šūnu līnijas ir cilvēka T-limfocītu pseidodiploīdas šūnu līnijas, kuru modelis ir 46. hromosoma. Tās arī liecina, ka modelis hromosoma ir sastopama apmēram 74 % gadījumu, un poliploīdijas rādītājs ir apmēram 5,3 %. Kariotipa pētījumi parādīja kariotipu ar 46, X, Y, -2, -18, del (2) (p21p23), del (18) (p11.2). X un Y hromosomām lielākajā daļā šūnu līniju parasti ir viena kopija.
• Jurkat šūnu līnijas salīdzinājumā ar E6.1 Jurkat šūnu līnijām: Jurkat šūnu līnijas ir primārās vecāku šūnu līnijas, kas sākotnēji izdalītas no pacienta ar akūtu limfoblastisko leikēmiju. Savukārt E6.1 Jurkat šūnu līnijas ir klonēti Jurkat-FHCRC šūnu līniju atvasinājumi.

Publicēts: 2023 | Pēdējā pārskatīšana: 2026. gada maijs

Jurkat E6.1 šūnu līniju pielietojumi

Jurkat E6.1 šūnu līnija visbiežāk tiek izmantota pētījumos un imūnsistēmai saistītu traucējumu un ar to saistītu vēža veidu izpētē. Turklāt tā ir piemērota arī dažu ar HIV infekciju saistītu sarežģījumu izpētei, jo CD4 T šūnu receptors ir nepieciešams retrovīrusa iekļūšanai šūnā.

Turpmāk ir aprakstītas dažas galvenās jomas, kurās šīs šūnu līnijas tiek izmantotas:

T šūnu signālu pārraides un apoptozes ceļu modelis: Šī no T šūnu leikēmijas atvasinātā šūnu līnija tiek plaši izmantota pētījumos, kas saistīti ar TCR signālu kaskādi. Jurkat E6.1 izdala lielāku daudzumu IL-2 un IL-8, kas savukārt veicina T šūnu aktivāciju un iedarbina iekaisuma ceļus. Šī šūnu līnija ir pazīstama arī ar savu hiperfosforilēto Pyk2 un pastiprināto Vav1 ražošanu, kas būtiski ietekmē aktīna citoskeleta pārkārtošanos T šūnās. TCR segregāciju Jurkat šūnu līnijā E6-1 var uzlabot arī ar LFA-1 spēcīgu ekspresiju, kas tādējādi pastiprina TCR signālu pārraidi un IL-2 ekspresiju. Jurkat E6.1 šūnu līnijās tiek veikti arī šūnu proliferācijas un šūnu cikla pētījumi. Tās ir izvēlētas, pētot apoptozes ceļus un DNS bojājumu indukciju ar savienojumiem, kas iegūti no jūras un augu avotiem. 2013. gadā veiktajā pētījumā, izmantojot šīs šūnu līnijas, tika novērtēta haizivju epigonālo kondicionēto barotņu ietekme uz cilvēka šūnām. Tāpat Jurkat E6.1 šūnu līnijās tika pētīta no augiem iegūtā hirsutīna nomācošā ietekme uz šūnu proliferāciju. Bieži vien arī pretvēža pētījumos izmanto Jurkat E6.1, lai novērtētu izvēlētos mērķus. Šajās šūnu līnijās ir pētīta arī jūras neirotoksīnu, piemēram, brevetoksīnu (PbTx), ietekme.

HIV pētījumi: Viens no nozīmīgākajiem Jurkat E6.1 šūnu līniju pielietojumiem ir to spēja kalpot kā piemērots modelis HIV pētījumiem, pateicoties to spējai izvēlēties dažādus signālu pārraides notikumus, kas izraisa TCA. Jurkat E6.1 šūnu līnijas ir izmantotas ne tikai HIV aktivācijas izpratnei, bet arī HIV latences mehānismu izpētei. Šajās šūnu līnijās ir plaši pētīta HIV replikācija un infekcija, jo tās var pakļaut gēnu rediģēšanai un gēnu izslēgšanai, kā tas tika veikts 2021. gada pētījumā. Zāļu piegādes ietekme uz HIV infekciju, piemēram, ilgstošas darbības efavirenza (Efa) un enfuvirtīda (Enf) kopīgi ielādētu polimēru–lipīdu hibrīdo nanodaļiņu (PLN) ietekme uz vīrusa iekļūšanu, tika pētīta, izmantojot Jurkat E6.1 šūnu līnijas. Ar CRISPR/Cas9 modificētās Jurkat E6.1 šūnas ir vairākkārt izmantotas, lai pētītu mehānismus, kas saistīti ar HIV iekļūšanu šūnās, replikāciju un infekciju.

Pētniecības publikācijas

Šeit ir daži ievērojami piemēri no plašā pētījumu klāsta, tostarp par Jurkat E6.1 šūnu līnijām.

Selēna metabolīts metilselenols regulē to ligandu ekspresiju, kas izraisa imūnsistēmas aktivāciju caur limfocītu receptoru NKG2D

Izmantojot Jurkat E6.1 šūnas, kuras inkubēja dažādos selēna savienojumos, lai pētītu ligandu ekspresiju un MICA/B virsmas ekspresiju.

Karakazīnskābe, ent-3,4-seko-kaurēns, veicina apoptozi un šūnu diferenciāciju, inhibējot NFkB signāla ceļu leikēmijas šūnās.

Karakazīnskābes izraisītās citotoksicitātes izpratne cilvēka T šūnu līnijās, piemēram, Jurkat E6.1 un HL-60.

Pierādījumi par azidotimidīna rezistences in vitro attīstību T-limfocītu leikēmijas šūnu līnijās (Jurkat E6–1/AZT-100) un bērnu pacientiem ar HIV-1 infekciju

Izmantota Jurkat E6.1 šūnu līnija, kas ilgstoši inkubēta ar AZT zāļu klātbūtni, lai pētītu azidotimidīna (AZT) rezistenci HIV-1 inficētiem pacientiem.

Jurkat E6.1 šūnu līnijas pētījumi par dažu bioindolu ietekmi uz membrānas plūstamību

Šajā pētījumā tika izmantota polarizētas fluorescences analīzes sistēma, lai izprastu bioindolu, tostarp serotonīna, triptofāna un melatonīna, ietekmi uz šūnu membrānu plūstamību Jurkat E6.1 šūnu līnijās.

Apoptozes indukcijas molekulārais mehānisms Jurkat E6-1 šūnās, ko izraisa Tribulus terrestris alkaloīdu ekstrakts

No Tribulus terrestris iegūtais alkaloīdu ekstrakts izraisīja apoptozi Jurkat E6.1 šūnās, lai izprastu šīs iedarbības pamatmehānismu.

LFA-1 ekspresijas palielināšana uzlabo imūnsinapšu arhitektūru un T šūnu receptoru signālu pārraidi Jurkat E6.1 šūnās

T šūnu receptoru signālu pārraide Jurkat E6.1 šūnās tika uzlabota, strauji palielinot LFA-1 ekspresiju.

Priekšrocības un ierobežojumi

Tāpat kā citām šūnu līnijām, arī Jurkat E6.1 ir savas priekšrocības un ierobežojumi.

Priekšrocības

Ir daudzi iemesli, kāpēc šajās lietojumprogrammās tā tiek izvēlēta:

• Augšanas veids

  Jurkat E6.1 ir suspensijas un neadherenta šūnu līnija, kas nozīmē, ka tā aug suspensijā un nepielīp pie kultūras virsmas.

• Gēnu ekspresija

  Jurkat E6.1 šūnu līnija ekspresē gēnus, kas kodē interleikīnu-2 (IL‑2) un CD3. Ir pierādīts, ka, stimulējot šīs šūnas ar monoklonālajiem antivielu, lektīniem vai forbolesteriem pret T3 antigēno kompleksu, tās ražo pastiprinātu IL-2.

• Antigēnu ekspresija

  Jurkat E6.1 šūnu līnija ekspresē CD3 antigēnu, kas saistīts ar T šūnu aktivāciju un signālu pārraidi.

• Ekspresijas marķieri

  Šī šūnu līnija ekspresē T šūnu antigēna receptora (TCR) marķierus, kas ir būtiski T šūnu atpazīšanā un imūnreakcijā.

• Piemērotība transfekcijai

  Jurkat klona E6.1 šūnu līnija ir piemērota saimniekšūnu transfekcijas eksperimentiem, ļaujot ievadīt eksogēnu ģenētisko materiālu šūnās dažādiem pētniecības mērķiem.

Ierobežojumi

Pēc priekšrocību izklāstīšanas aplūkosim ierobežojumus, kas saistīti ar Jurkat E6.1 šūnu līniju izmantošanu:

• Šūnu transfekcija ar vīrusu vektoru

  Jurkat E6.1 šūnu transfekcija ir sarežģīta to T-šūnu izcelsmes dēļ. Parasti ģenētiskai modifikācijai ir nepieciešami dārgi un laikietilpīgi vīrusu vektori. Nevīrusu vektoriem Jurkat šūnās ir novērota zema transfekcijas efektivitāte un ievērojama toksicitāte.

• Baktēriju piesārņojums

  Jurkat E6.1 šūnu kultūras ir jāuzrauga, lai novērstu iespējamo bakteriālo piesārņojumu un nodrošinātu eksperimentālo rezultātu integritāti.

• Vīrusu piesārņojums

  Jurkat E6.1 šūnu līnijas ekspresē dažādus kemokīnu receptorus un nelielu CD4 līmeni, kas veicina vīrusu iekļūšanu. Tas padara tās uzņēmīgas pret T šūnu inficējošiem vīrusiem, piemēram, HTLV un HIV.

6. Resursi: protokoli, videomateriāli un citi resursi

Šajā sadaļā tiks aprakstītas šūnu kultivēšanas un transfekcijas metodes un protokoli, kā arī izglītojoši video, kas saistīti ar šo šūnu līniju:

Šūnu kultivēšanas protokoli

Šeit ir daži pamata kultivēšanas procedūras, kas jāievēro šai šūnu līnijai:

• Šūnu kultivēšanas standarta darbības procedūra (SOP), Jurkat klona E6-1 pavairošana: Kalifornijas Universitāte savā USCS Genome pārlūkprogrammā ir publicējusi arī metodi Jurkat klona E6-1 kultivēšanai.
• Jurkat, klona E6-1 kultivēšana un apstrāde: Uzņēmums „Elabscience” savā produktu apraksta vietnē ir iekļāvis kultivēšanas un apstrādes protokolu.

Transfekcijas protokoli

Šeit ir pieejamo dažādo transfekcijas protokolu saraksts:

• Jurkat šūnu transfekcijas protokols ar Lipofectamine LTX reaģentu: Jurkat šūnu transfekcijas protokols, izmantojot Lipofectamine LTX reaģentu no ThermoFisher. 
• Amaxa™ 4D-Nucleofector™ protokols Jurkat klonam E6.1 [ATCC®]: Lonza Group AG ir sniegusi transfekcijas protokolu Jurkat klonam E6.1 no ATCC, izmantojot 4D-Nucleofector® X Unit.

Video par Jurkat E6.1

Ir vairāki izcili video, kuros aplūkotas šūnu kultivēšanas koncepcijas, procedūras, proliferācija, izsēšana un citas tēmas.

• Šūnu pārstādīšana: Šūnu kultivēšanas pamati: Šis ir lielisks ThermoFisher sagatavots video, kas sniedz pamata norādījumus par cilvēka šūnu līniju pārstādīšanu.
• Šūnu atkausēšana: Šūnu kultivēšanas pamati: Šis ThermoFisher sagatavotais video sniedz pamata norādījumus par šūnu kultivēšanu un atkausēšanu.
• Plazmīdu DNS transfekcijas protokols: Šis ThermoFisher sagatavotais video ir veltīts plazmīdu DNS transfekcijas protokolam, izmantojot Lipofectamine® LTX un Plus™ reaģentu.
• Apoptozes noteikšana, izmantojot Jurkat šūnu suspensiju, kas apstrādāta ar 3 mikromolāru staurosporīnu: Šis Nexcelom Bioscience sagatavotais video parāda, kā veikt apoptozes analīzi Celigo attēlu citometrā, izmantojot Hoechst un kaspāzes 3/7 reaģentus.