Iet uz galveno lapu

HT-29 šūnu līnija

HT-29 ir cilvēka kolorektālā vēža šūnu līnija, kurai ir plašs pielietojums vēža un toksikoloģijas pētījumos. Piemēram, šīs šūnas ir jutīgas pret standarta ķīmijterapijas ārstēšanu pret kolorektālo vēzi. Turklāt HT-29 šūnu līnija ir labi raksturots in vitro modelis, lai pētītu zarnu epitēlija reakciju uz bakteru infekciju. HT-29 šūnas atdarinā pieaugušo zarnu šūnu, t.i., enterocītu, īpašības, un tādējādi ir piemērotas saistīšanās un mehānisma pētījumiem.

📋 HT-29 šūnu līnija — īsa informācija
Augšanas barotne
Skatīt produkta lapu
Dubultošanās laiks
Skatīt produkta lapu
Augšanas veids
Adherents
Bioloģiskās drošības līmenis
BSL-1

HT-29 šūnas: izcelsme un vispārīga informācija

Pirms jebkuras šūnu līnijas izmantošanas jums jāzina tās vispārīgās īpašības un izcelsme. Šajā sadaļā jūs uzzināsiet: Kas ir HT-29 šūnas? Vai HT-29 ir kolorektālā vēža šūnu līnija? Kāda ir HT-29 šūnu morfoloģija?

Kas ir HT-29 šūnu līnija? HT-29 ir kolorektālā adenokarcinomas šūnu līnija, ko 1964. gadā izveidoja Trempe un Fogh. Šīs šūnas sākotnēji tika iegūtas no kolorektālās adenokarcinomas primārā audzēja 44 gadus vecai kaukāziešu izcelsmes sievietei [1]. Kopš izveidošanas šī šūnu līnija tiek izmantota vēža bioloģijas pētījumos.

HT-29 šūnu morfoloģija: HT-29 šūnu līnijai parasti ir epitēlija tipa morfoloģija. Diferencētās šūnas aug monoslāņos, veido ciešas šūnu savienojumus un tām ir apikāla sukas apmale. Ja šīs šūnas audzē glikozes deficīta vidē vai tām pievieno induktorus, piemēram, butirātu vai skābi, tās parāda enterocītu līdzīgas pazīmes.

Šūnu izmērs: HT-29 kolorektālā vēža šūnu līnijas diametrs ir 11 μm.

Genoms un ploīdija: HT-29 šūnu līnijas hromosomu modālais skaits ir 71. Tas var svārstīties no 68 līdz 72. Turklāt HT-29 šūnu optimizētais hromosomu skaits ir hipertriploīds, ar 2S komponentu, kas sastopams 2,4 % gadījumu.

Kas ir HT29 MTX? HT29 MTX ir metotreksāta rezistentā šūnu līnija, kas izdalīta no sākotnējās HT-29 cilvēka resnās zarnas vēža šūnu līnijas, pielāgojoties 10 µM metotreksātam. Šīs šūnas uzrāda gļotu izdalījošu nobriedušu kausveida šūnu pazīmes.

Kolorektālā vēža šūnu dalīšanās un pārvietošanās zem mikroskopa.

Informācija par HT-29 šūnu līnijas kultivēšanu

Zinot šīs šūnu līnijas kultivēšanas pamatprasības, varat atvieglot darbu ar to. Jums jāzina: kāds ir HT-29 šūnu līnijas dubultošanās laiks? Kāda ir HT-29 šūnu sēšanas blīvums? Kādi barotnes ir piemērotas HT-29 šūnām?

Dubultošanās laiks

Vidējais HT-29 šūnu līnijas dubultošanās laiks ir 24 stundas.

Adherenta/suspensija

HT-29 ir adhezīva šūnu līnija. 

Sēšanas blīvums

HT-29 šūnām ieteicamais sēšanas blīvums ir 3 x 104 šūnas/cm2. Izaudzētās šūnas mazgā ar 1X PBS un atdalītas pēc 8–10 minūšu inkubācijas ar Accutase. Pievieno svaigu barotni, un šūnas centrifugē. Šūnu nogulsnes atkārtoti suspendē, un šūnas sadala jaunās kolbās ieteicamajā šūnu blīvumā.

Augšanas barotne

HT-29 šūnu optimālai kultivēšanai izmanto Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM), kam pievienots 2,5 mM L-glutamīns un 10 % FBS. Barotni jāmaina 2–3 reizes nedēļā.

Augšanas apstākļi

HT-29 šūnu augšanai nepieciešams inkubators ar mitrumu, 37 °C temperatūru un 5 % CO2 pievadi.

Uzglabāšana

Šīs šūnas uzglabā šķidrā slāpekļa tvaika fāzē temperatūrā zem -195 °C.  

 

Sasaldēšanas barotne un process

HT-29 šūnu līnijai izmanto CM-1 vai CM-ACF sasaldēšanas vidi. Šūnas sasaldē, izmantojot lēnu sasaldēšanas procesu, kas izraisa temperatūras pazemināšanos par 1 °C un efektīvi aizsargā šūnu dzīvotspēju.

Atkausēšanas process

Sasaldētās HT-29 šūnas atkausē ūdens vannā, kas iestatīta uz 37 °C temperatūru. Šīs šūnas var atkārtoti suspendēt un tieši ievietot kolbā ar svaigu augšanas vidi. Pretstatā tam atkausētās šūnas var centrifugēt, lai atdalītu sasaldēšanas vides elementus, atkārtoti suspendēt svaigā vidē un kultivēt kolbās.

Bioloģiskās drošības līmenis

HT-29 šūnu līnijas apstrādei un uzturēšanai tiek izmantots 1. bioloģiskās drošības līmenis.

Ht 29 cells

HT-29 šūnas ar 10x un 20x palielinājumu.

HT-29 šūnas: priekšrocības un ierobežojumi

Katrai šūnu līnijai ir savas priekšrocības un trūkumi, kas to atšķir no citām šūnu līnijām. Šajā sadaļā tiks aprakstītas galvenās priekšrocības un ierobežojumi, kas saistīti ar HT-29 šūnām.

Priekšrocības

HT-29 šūnu galvenās priekšrocības ir:

  • Viegli kultivējamas

    HT-29 šūnu līnija ir viegli apstrādājama un uzturam, un tai nav sarežģītu kultivēšanas prasību. To plaši kultivē pētniecības laboratorijās.

  • Zarnu šūnu in vitro modelis

    HT-29 šūnas noteiktos kultivēšanas apstākļos var diferencēties par nobriedušām zarnu šūnām (enterocītiem un gļotu ražojošām šūnām). Tās tiek izmantotas kā šūnu modelis, lai pētītu pārtikas gremošanu un bioloģisko pieejamību.

  • Augsta transfekcijas efektivitāte

    HT-29 resnās zarnas vēža šūnas piedāvā augstu transfekcijas efektivitāti, padarot tās piemērotas gēnu ekspresijas un regulācijas pētījumiem. Izmantojot dažādas metodes, var veikt gan pārejošas, gan stabilas transfekcijas eksperimentus.

  • Jutība pret zālēm

    HT-29 šūnas ir jutīgas pret ķīmijterapijas zālēm, piemēram, fluorouracilu un oksaliplatīnu, kuras parasti izmanto resnās zarnas vēža ārstēšanā. Tās izmanto, lai pētītu zāļu rezistenci un atlasītu potenciālas terapeitiskas zāles kolorektālajam karcinomam.

Ierobežojumi

  • Heterogenitāte

    HT-29 šūnas, tāpat kā citas vēža šūnu līnijas, ir heterogēnas un var neveidot vienotu šūnu populāciju. Tas var ietekmēt rezultātu reproducējamību noteiktos testos un izraisīt nelielas eksperimentālo rezultātu atšķirības.

  • Ierobežota diferenciācija

    HT-29 šūnām ir ierobežots diferenciācijas potenciāls. Tās nediferencējas pilnībā par zarnu vai resnās zarnas šūnām, bet izrāda tikai dažas raksturīgas pazīmes. Šis ierobežojums var ierobežot to izmantošanu sarežģītāku bioloģisko procesu pētīšanā.

HT-29 šūnas: pielietojumi

HT-29 šūnu līnija tiek plaši kultivēta pētniecības laboratorijās tās plašā pielietojuma dēļ. Šajā sadaļā tiks aplūkoti tikai daži nozīmīgi HT-29 šūnu pielietojumi.

Vēža pētījumi: HT-29 ir kolorektālās adenokarcinomas šūnu līnija, tāpēc to izmanto vēža progresēšanas, attīstības un pamatā esošo molekulāro mehānismu pētīšanai. 2018. gadā veiktajā pētījumā HT-29 šūnu līnija tika izmantota, lai pētītu par metastāzēm atbildīgās šūnu molekulas. Šajā pētījumā tika novērots, ka vimentīna un CXCR4 gēni regulē šūnu metastāzes. Savukārt mikroRNA-193a-5p mimika transfekcija var samazināt šo gēnu mRNA līmeni un veiksmīgi samazināt vēža šūnu metastāzes [2].

Toksikoloģijas pētījumi: HT-29 šūnu līnija tiek plaši izmantota toksikoloģijas pētījumos. Šīs kolorektālās karcinomas šūnas tiek izmantotas, lai novērtētu dažādu zāļu kandidātu toksicitāti, izmantojot dažādus testus. Piemēram, vienā pētījumā tika izpētīts auga Syzygium cumini etanola ekstrakta toksicitātes potenciāls uz HT-29 šūnu līniju. Rezultāti parādīja ievērojamu HT-29 šūnu augšanas nomākšanu, liecinot par ekstrakta daudzsološajām pretvēža īpašībām [3].

Mikrobioloģija: HT-29 var izmantot kā saimniekšūnu sistēmu, lai pētītu potenciālo mikrobu, t.i., baktēriju un vīrusu, patogēnēzi. Pētnieki var inficēt HT-29 šūnas ar mikroorganismiem, lai pētītu to virulenci un saimnieka reakciju. Šādā pētījumā HT-29 šūnas tika izmantotas, lai pētītu pienskābes baktēriju probiotiskās īpašības [4]. Citā pētījumā HT-29 šūnas tika izmantotas, lai novērtētu bakteriofāgu terapijas efektivitāti un drošību [5].

5. Zinātniskie raksti par HT-29 šūnām

Šajā sadaļā tiks izcelti daži nozīmīgi publikāciju par HT-29 šūnām, kas palīdzēs jums izstrādāt savu pētījumu.

Syzygium cumini etanola ekstrakta pretvēža iedarbības novērtējums uz HT-29 kolorektālo šūnu līniju

Šajā pētījumā Syzygium cumini etanola ekstrakts tika ieteikts kā potenciāls pretvēža līdzeklis pret kolorektālās vēža šūnu līniju HT-29. Ekstrakts ievērojami nomāca vēža šūnu augšanu.

Tetrandrīns inhibē kolorektālā karcinoma HT-29 šūnu augšanu, iedarbojoties uz Bcl-2/Caspase 3/PARP ceļu un G1/S fāzi

Šajā publikācijā žurnālā Bioscience Reports tika pārbaudīta savienojuma tetrandrīna pretvēža aktivitāte uz HT-29 šūnām. Rezultāti atklāja, ka tetrandrīns inhibē vēža šūnu proliferāciju un augšanu, regulējot šūnu signālceļus.

mikroRNA-193a-5p inhibē cilvēka HT-29 resnās zarnas vēža šūnu migrāciju, nomācot metastāžu ceļu

Šajā pētījumā tika izvirzīts pieņēmums, ka miRNA-193a-5p var potenciāli regulēt HT-29 šūnu metastāzes, regulējot ar metastāzēm saistītos gēnus.

Bakteriofāgi ir vairāk virulenti pret baktērijām ar cilvēka šūnām nekā baktēriju kultūrā; atziņas no HT-29 šūnām

Šis raksts ir publicēts žurnālā Nature Scientific Reports 2018. gadā. Šajā pētījumā tika izmantota HT-29 tumorogēnā šūnu līnija kā zarnu šūnu modelis, lai novērtētu ierosinātās bakteriofāgu terapijas efektivitāti.

Laktobaktēriju probiotiskās īpašības un to spēja kavēt enteropatoģenisko baktēriju adheziju pie Caco-2 un HT-29 šūnām

Šajā pētījumā pētnieki izmantoja HT-29 šūnas, lai izpētītu pienskābes baktēriju probiotisko aktivitāti. Interesanti, ka pētījums liecināja, ka laktobaktērijas novērš patogēno baktēriju adheziju uz resnās zarnas šūnām.

HT-29 šūnas Resursi: protokoli, video un citi materiāli

Šajā sadaļā tiks aprakstīti daži tiešsaistes resursi par HT-29 šūnām, kas palīdzēs apgūt to uzturēšanas, kultivēšanas un transfekcijas protokolus.

Šūnu kultivēšanas protokoli

Šie resursi sniegs jums norādījumus par HT-29 šūnu subkultivēšanu.

Transfekcijas protokoli

HT-29 šūnu līnijai ir lieliska transfekcijas efektivitāte, un to bieži izmanto gēnu ekspresijas pētījumos. Šie resursi apraksta iespējamos transfekcijas protokolus šīm šūnām.

Video par HT-29 šūnu līniju

Šeit ir daži video par šīs tumorogēnās šūnu līnijas kultivēšanu un uzturēšanu.

Mēs ceram, ka šajā rakstā sniegtā informācija ir noderīga un pietiekama, lai jūs varētu rīkoties ar HT-29 šūnu līniju un to uzturēt. Ja plānojat savā pētījumā izmantot HT-29 šūnas, pasūtiet tās pie mums.

Atsauces

  1. Martínez-Maqueda, D., B. Miralles un I. Recio, HT29 šūnu līnija. Pārtikas bioaktīvo vielu ietekme uz veselību: in vitro un ex vivo modeļi, 2015: 113.–124. lpp.
  2. Shirafkan, N. u.c., mikroRNA-193a-5p inhibē cilvēka HT-29 resnās zarnas vēža šūnu migrāciju, nomācot metastāžu ceļu. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): 8775.–8783. lpp.
  3. Khodavirdipour, A., R. Zarean un R. Safaralizadeh, Syzygium cumini etanola ekstrakta pretvēža iedarbības novērtējums uz HT-29 kolorektālo šūnu līniju. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: 575.–581. lpp.
  4. Fonseca, H.C., et al., Laktobaktēriju probiotiskās īpašības un to spēja kavēt enteropatoģēno baktēriju adheziju pie Caco-2 un HT-29 šūnām. Probiotics and antimicrobial proteins, 2021. 13: 102.–112. lpp.
  5. Shan, J., et al., Bakteriofāgi ir virulenti pret baktērijām ar cilvēka šūnām vairāk nekā baktēriju kultūrā; atziņas no HT-29 šūnām. Zinātniskie ziņojumi, 2018. 8(1): 5091. lpp.

 

Esam konstatējuši, ka atrodaties citā valstī vai izmantojat citu pārlūkprogrammas valodu, kas nav pašlaik izvēlētā. Vai vēlaties pieņemt ieteiktos iestatījumus?

Aizvērt