HT-29 šūnu līnija

HT-29 ir cilvēka kolorektālā vēža šūnu līnija, ko plaši izmanto vēža un toksikoloģijas pētījumos. Piemēram, šīs šūnas ir jutīgas pret standarta ķīmijterapijas metodēm pret kolorektālo vēzi. Turklāt HT-29 šūnu līnija ir labi raksturots in vitro modelis, lai pētītu zarnu epitēlija reakciju uz baktēriju infekciju. HT-29 šūnas imitē nobriedušu zarnu šūnu, t. i., enterocītu, īpašības, tāpēc tās ir piemērotas pieķeršanās un mehānikas pētījumiem.

Šajā rakstā tiks aplūkoti visi aspekti par HT-29 šūnu līniju, kas jāzina pirms darba ar to. Galvenokārt tajā būs ietverti šādi jautājumi:

1. HT-29 šūnas: Izcelsme un vispārīga informācija
2. HT-29 šūnu līnijas šūnu kultūru informācija
3. HT-29 šūnas: Priekšrocības un ierobežojumi
4. HT-29 šūnas: Pielietojums
5. Pētniecības publikācijas par HT-29 šūnām
6. HT-29 šūnas Resursi: Protokoli, videomateriāli un citi resursi

1. HT-29 šūnas: Izcelsme un vispārīga informācija

Pirms jebkuras šūnu līnijas izmantošanas jāzina tās vispārīgās īpašības un izcelsme. Šī sadaļa palīdzēs jums uzzināt: Kas ir HT-29 šūnas? Vai HT-29 ir kolorektālā vēža šūnu līnija? Kāda ir HT-29 šūnu morfoloģija?

Kas ir HT-29 šūnu līnija? HT-29 ir kolorektālās adenokarcinomas šūnu līnija, ko 1964. gadā izveidoja Trempe un Fogh. Sākotnēji šūnas tika iegūtas no kādas 44 gadus vecas baltādainas sievietes ar kolorektālo adenokarcinomu primāro audzēju [1]. Kopš šīs šūnu līnijas izveides to izmantoja vēža bioloģijas pētījumiem.

HT-29 šūnu morfoloģija: HT-29 šūnu līnijai parasti ir epitēlijveidīga morfoloģija. Diferencētas šūnas aug monoslānī, veido ciešus šūnu savienojumus un tām ir apikālā birstes robeža. Ja šīs šūnas audzē glikozes deficīta barotnē vai ja tām dod induktorus, piemēram, butirātu vai skābi, tām parādās enterocītiem līdzīgas iezīmes.

Šūnu izmērs: HT-29 kolorektālā vēža šūnu līnijas diametrs ir 11 μm.

Genoms un ploidija: HT-29 šūnu līnijai ir 71 hromosoma. Tas var svārstīties no 68 līdz 72. Turklāt HT-29 šūnu racionālais hromosomu skaits ir hipertriploīds, un 2S komponents sastopams 2,4 % apmērā.

Kas ir HT29 MTX? HT29 MTX ir pret metotreksātu rezistenta šūnu līnija, kas izdalīta no oriģinālās HT-29 cilvēka resnās zarnas vēža šūnu līnijas, pielāgojoties 10 µM metotreksātam. Šīm šūnām piemīt gļotas sekrēcijas nobriedušām dobletšūnām raksturīgas īpašības.

3. HT-29 šūnas: Priekšrocības un ierobežojumi

Katrai šūnu līnijai ir unikāli plusi un mīnusi, kas to atšķir no citām šūnu līnijām. Šajā iedaļā tiks aplūkotas galvenās priekšrocības un ierobežojumi, kas saistīti ar HT-29 šūnām.

Priekšrocības

HT-29 šūnu galvenās priekšrocības ir šādas:

• Viegli kultivējamas

  HT-29 šūnu līniju ir viegli apstrādāt un uzturēt, un tās kultivēšanai nav sarežģītu prasību. To plaši kultivē pētniecības laboratorijās.

• Zarnu šūnu in vitro modelis

  HT-29 šūnas var diferencēties par nobriedušām zarnu šūnām (enterocītiem un gļotas producējošām šūnām) īpašos kultūras apstākļos. Tās izmanto kā šūnu modeli, lai pētītu pārtikas sagremošanu un biopieejamību.

• Augsta transfekcijas efektivitāte

  HT-29 resnās zarnas vēža šūnas nodrošina augstu transfekcijas efektivitāti, tāpēc tās ir piemērotas gēnu ekspresijas un regulācijas pētījumiem. Ar dažādām metodēm var veikt gan pārejošas, gan stabilas transfekcijas eksperimentus.

• Jutība pret zālēm

  HT-29 šūnas ir jutīgas pret ķīmijterapeitiskām zālēm, piemēram, fluoruracilu un oksaliplatīnu, ko parasti izmanto resnās zarnas vēža ārstēšanā. Tās izmanto, lai pētītu rezistenci pret zālēm un veiktu potenciālo terapeitisko zāļu skrīningu resnās zarnas karcinomas ārstēšanai.

Ierobežojumi

• Heterogenitāte

  HT-29 šūnām, tāpat kā citām vēža šūnu līnijām, piemīt heterogenitāte, un tās var neveidot viendabīgu šūnu populāciju. Tas var ietekmēt rezultātu reproducējamību noteiktos testos un izraisīt nelielas eksperimentālo rezultātu atšķirības.

• Ierobežota diferenciācija

  HT-29 šūnām ir ierobežots diferenciācijas potenciāls. Tās pilnībā nediferencējas par zarnu vai resnās zarnas šūnām, bet tām piemīt tikai dažas raksturīgas pazīmes. Šis ierobežojums var ierobežot to izmantošanu sarežģītāku bioloģisko procesu izpētē.

4. hT-29 šūnas: Pieteikumi

HT-29 šūnu līniju plaši kultivē pētniecības laboratorijās, jo tā ir plaši pielietojama. Šajā iedaļā tiks aplūkoti tikai daži nozīmīgi HT-29 šūnu lietojumi.

Vēža pētījumi: HT-29 ir kolorektālās adenokarcinomas šūnu līnija, tāpēc to izmanto vēža progresēšanas, attīstības un pamatā esošo molekulāro mehānismu izpētei. Pētījumā, kas tika veikts 2018. gadā, tika izmantota HT-29 šūnu līnija, lai pētītu par metastāzēm atbildīgās šūnu molekulas. Šajā pētījumā tika novērots, ka vimentīna un CXCR4 gēni regulē šūnu metastāzes. Savukārt transfekcija ar mikroRNA-193a-5p imitatoru var samazināt šo gēnu mRNS līmeni un veiksmīgi samazināt vēža šūnu metastāzes [2].

Toksikoloģijas pētījumi: HT-29 šūnu līniju plaši izmanto toksikoloģijas pētījumos. Šīs kolorektālās karcinomas šūnas izmanto, lai novērtētu dažādu zāļu kandidātvielu toksicitāti, izmantojot dažādus testus. Piemēram, pētījumā tika pētīts auga Syzygium cumini etanola ekstrakta toksicitātes potenciāls HT-29 šūnu līnijai. Iegūtie rezultāti liecināja par ievērojamu HT-29 šūnu augšanas nomākumu, kas norāda uz ekstrakta daudzsološām pretvēža īpašībām [3].

Mikrobioloģija: HT-29 var izmantot kā saimnieka šūnu sistēmu, lai pētītu potenciālo mikrobu, t. i., baktēriju un vīrusu, patoģenēzi. Pētnieki var inficēt HT-29 šūnas ar mikrobiem, lai izpētītu to virulenci un saimnieka reakciju. Šādā pētījumā tika izmantotas HT-29 šūnas, lai izpētītu pienskābes baktēriju probiotikas īpašības [4]. Citā pētījumā HT-29 šūnas tika izmantotas, lai novērtētu bakteriofāgu iedarbīgumu un drošību [5].

5. Pētniecības publikācijas par HT-29 šūnām

Šī sadaļa iepazīstinās ar dažām ievērojamām publikācijām par HT-29 šūnām, kas palīdzēs jums izstrādāt savu pētījumu.

Syzygium cumini etanola ekstrakta pretvēža iedarbības novērtējums uz HT-29 kolorektālo šūnu līniju

Šajā pētījumā Syzygium cumini etanoliskais ekstrakts ierosināts kā potenciāls pretvēža līdzeklis pret kolorektālā vēža šūnu līniju HT-29. Ekstrakts ievērojami nomāca vēža šūnu augšanu.

Tetrandrīns kavē resnās zarnas karcinomas HT-29 šūnu augšanu, izmantojot Bcl-2/Caspase 3/PARP ceļu un G1/S fāzi

Šajā publikācijā žurnālā Bioscience Reports tika pārbaudīta tetradrīna savienojuma pretvēža iedarbība uz HT-29 šūnām. Rezultāti atklāja, ka tetradrīns kavē vēža šūnu proliferāciju un augšanu, regulējot šūnu signalizācijas ceļus.

mikroRNA-193a-5p kavē cilvēka HT-29 resnās zarnas vēža šūnu migrāciju, nomācot metastāzes ceļu

Šajā pētījumā ierosināts, ka miRNA-193a-5p potenciāli var regulēt HT-29 šūnu metastāzes, regulējot ar metastāzēm saistītos gēnus.

Bakteriofāgi ir virulentāki pret baktērijām ar cilvēka šūnām nekā baktēriju kultūrā; atziņas no HT-29 šūnām

Šis raksts publicēts 2018. gada zinātniskajā žurnālā Nature Scientific Reports. Šajā pētījumā tika izmantota HT-29 audzēja šūnu līnija kā zarnu šūnu modelis, lai novērtētu ierosinātās bakteriofāgu apstrādes efektivitāti.

Laktobacilu probotiskās īpašības un to spēja kavēt enteropatogēno baktēriju adhēziju uz Caco-2 un HT-29 šūnām

Šajā pētījumā pētnieki izmantoja HT-29 šūnas, lai izpētītu pienskābes baktēriju probiotikas aktivitātes. Interesanti, ka pētījums parādīja, ka laktobacillas baktērijas novērš patogēno baktēriju adhēziju uz resnās zarnas šūnām.

6. HT-29 šūnas Resursi: Protokoli, videoklipi un citi resursi

Šajā sadaļā tiks aplūkoti daži tiešsaistē pieejamie resursi par HT-29 šūnām, kas palīdzēs apgūt to uzturēšanas, kultivēšanas un transfekcijas protokolus.

Šūnu audzēšanas protokoli

Turpmāk minētie resursi sniegs jums norādījumus par HT-29 šūnu subkulturēšanu.

• HT-29 šūnu kultivēšana: Šī saite sniegs pamatzināšanas par HT-29 šūnu augšanas barotni, atkausēšanu un subkulturēšanu.
• HT-29 kultūru uzturēšana: Šajā rakstā sniegta visa noderīgā informācija par HT-29 šūnu kultivēšanu un uzturēšanu.

Transfekcijas protokoli

HT-29 šūnu līnijai ir liela transfekcijas efektivitāte, un to bieži izmanto gēnu ekspresijas pētījumos. Turpmākajos resursos aprakstīti iespējamie transfekcijas protokoli šīm šūnām.

• HT-29 transfekcija: Šajā tīmekļa vietnes saitē atrodams detalizēts HT-29 šūnu transfekcijas protokols.
• HT-29 šūnu līnijas transfekcija: Šajā dokumentā aprakstīts HT-29 šūnu līnijas transfekcijas protokols ar plazmīdu DNS.

Videoklipi, kas saistīti ar HT-29 šūnu līniju

Šeit ir daži videoklipi par šīs audzējamo šūnu līnijas kultivēšanu un uzturēšanu.

• Šūnu pasāža: Šajā videoklipā ir parādīts šūnu pasāžas protokols adhēzijas šūnu līnijām.
• HT-29 šūnu transfekcija: Šajā videoklipā ir aprakstīta HT-29 šūnu transfekcijas metode.

Mēs ceram, ka šajā rakstā sniegtā informācija ir vērtīga un pietiekama, lai jūs varētu veikt HT-29 šūnu līnijas apstrādi un uzturēšanu. Ja savā pētījumā plānojat izmantot HT-29 šūnas, pasūtiet tās pie mums.

Atsauces

1. Martínez-Maqueda, D., B. Miralles un I. Recio, HT29 šūnu līnija. The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models, 2015: 113-124. lpp.
2. Shirafkan, N., et al. microRNA-193a-5p inhibits migration of human HT-29 colon cancer cells via supression of metastasis pathway. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): p. 8775-8783.
3. Khodavirdipour, A., R. Zarean, and R. Safaralizadeh, Evaluation of the anti-cancer effect of Syzygium cumini ethanolic extract on HT-29 colorectal cell line. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: p. 575-581.
4. Fonseca, H.C., et al., Probiotic properties of lactobacilli and their ability to inhibit adhesion of enteropathogenic bacteria to Caco-2 and HT-29 cells (Fonseca, H.C., et al., Laktobacillu probotiskās īpašības un to spēja kavēt enteropatogēno baktēriju adhēziju uz Caco-2 un HT-29 šūnām ). Probiotikas un antimikrobiālie proteīni, 2021. 13: p. 102-112.
5. Shan, J., et al, Bakteriofāgi ir virulentāki pret baktērijām ar cilvēka šūnām nekā baktēriju kultūrā; ieskats no HT-29 šūnām. Scientific reports, 2018. 8(1): p. 5091.