DU-145 šūnas - pētnieka visaptverošs ceļvedis

DU-145 ir cilvēka prostatas karcinomas šūnu līnija, ko plaši izmanto biomedicīnas pētījumos. Šīs šūnas kalpo kā nenovērtējams modelis prostatas vēža bioloģijas, zāļu testēšanas un izstrādes pētījumiem. Turklāt pētnieki DU-145 šūnas izmanto arī, lai pētītu prostatas vēža attīstības, augšanas un progresēšanas molekulāros mehānismus.

Šis raksts sniegs jums vērtīgu ieskatu par DU-145 prostatas vēža šūnām. Īpaši tiks aplūkoti šādi jautājumi:

DU-145 šūnu līnijas vispārīga informācija un izcelsme
DU-145 šūnu kultivēšana
DU-145 šūnu līnija: Priekšrocības un ierobežojumi
DU-145 šūnu izmantošana pētniecībā
Pētniecības publikācijas ar DU-145 šūnām
Resursi par DU-145 šūnu līniju: Protokoli, videomateriāli un citi resursi

1. Vispārīga informācija par DU-145 šūnu līniju un tās izcelsmi

Pirms sākt darbu ar šūnu līniju, ir svarīgi izprast tās pamatīpašības un izcelsmi. Šajā sadaļā sniegta visaptveroša informācija par DU-145 šūnu līnijas īpašībām un izcelsmi. Jūs uzzināsiet: Kas ir DU145 vēža šūnas? Kāda ir DU145 šūnu morfoloģija? Kāda ir atšķirība starp PC-3 un DU145?

DU-145, cilvēka prostatas vēža šūnu līnija, tika iegūta no kaukāzieša vīrieša smadzenēm (69 gadi) ar metastātisku prostatas karcinomu. Šīs šūnas pirmo reizi 1978. gadā deponēja K. R. Stouns un kolēģi.
Tāpat kā PC-3 prostatas vēža šūnas, arī DU-145 ekspresē androgēnu receptorus. Tomēr, kad šīs šūnas tiek pakļautas androgēnu ligandu iedarbībai, tās neuzrāda nekādu uz androgēnu receptoriem reaģējošu gēnu aktivitāti, tādējādi tās tiek uzskatītas par no androgēniem neatkarīgām šūnām.
DU-145 šūnām ir epitēlija morfoloģija.
DU-145 šūnas ir hipotriploīdas, un tām ir 64 hromosomu skaits. Tām ir vairākas marķieru hromosomas, piemēram, del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) un del (9) (p11).

PC-3 pret DU145

Abas prostatas vēža šūnu līnijas ir neatkarīgas no androgēnu receptoriem. Tās atšķiras ar savu tumorogēno un metastātisko potenciālu. PC-3 šūnu līnija, injicējot imūnkompromitētām pelēm, veido ļoti metastātisku IV pakāpes adenokarcinomu. Turpretī DU-145 šūnu līnijā veidojas prostatas vēzis ar mērenu metastātisku potenciālu [1].

Mikrofilamentu traucējumi cilvēka prostatas vēža šūnās PC-3.

2. dU-145 šūnu kultivēšana

DU-145 šūnu līniju plaši izmanto prostatas vēža pētniecības laboratorijās. Lai atvieglotu tās vieglu un efektīvu kultivēšanu, jums jāapgūst šādi galvenie punkti. Šajā sadaļā būs iekļauta informācija par DU145 barotni, dubultošanās laiku, šūnu kultivēšanas nosacījumiem un protokoliem.

Galvenie punkti DU-145 šūnu kultivēšanai

Populācijas dubultošanās laiks:	DU-145 dubultošanās laiks ir no 30 līdz 40 stundām.
Adhēzija vai suspensija:	DU-145 ir adherentu šūnu līnija.
Sēšanas blīvums:	DU-145 šūnas izsēj ar ieteicamo šūnu blīvumu 2 x¹⁰⁴^šūnas/cm2. Pie šāda blīvuma šūnas gandrīz 4 dienās veido saplūstošu monoslāni. Sēšanai šūnas mazgā ar 1 x fosfātu buferšķīduma fizioloģisko šķīdumu un inkubē ar pasāžas šķīdumu Accutase. Pēc 8 līdz 10 minūšu inkubācijas istabas temperatūrā šūnām pievieno svaigu barotni un centrifugē. Savākto šūnu granulu uzmanīgi resuspendē, un šūnas ielej jaunās baļķēs audzēšanai.
Augšanas barotne:	EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) ar barotnes papildinājumiem, t. i., 10 % fetālā liellopu seruma (FBS), 2 mM L-glutamīna, 2,2 g/l NaHCO3 un EBSS. Barotni atjauno 2 līdz 3 reizes nedēļā.
Augšanas apstākļi:	DU-145 kultūras tiek turētas 37 °C mitrinātā inkubatorā ar 5 % CO2 avotu.
Uzglabāšana:	DU-145 šūnas uzglabā šķidrā slāpekļa tvaika fāzē vai temperatūrā zem -150 °C elektriskā saldētavā, lai ilgāk saglabātu šūnu dzīvotspēju.
Saldēšanas process un vide:	DU-145 prostatas vēža šūnām ieteicams izmantot CM-1 vai CM-ACF sasaldēšanas barotni. Šūnu sasaldēšanai izvēlas lēnas sasaldēšanas metodi, kas ļauj temperatūrai pakāpeniski pazemināties par 1 °C. Tas pasargā šūnas no jebkāda šoka un palīdz saglabāt to dzīvotspēju.
Atkausēšanas process:	DU-145 sasaldēto šūnu flakonus ātri atkausē 37 °C ūdens vannā 40 līdz 60 sekundes. Pēc tam šūnām pievieno barotni un centrifugē, lai noņemtu sasaldēšanas barotnes sastāvdaļas. Ieguvušās šūnas resuspendē barotnē un ielej kolbā augšanai. Sasaldēšanas atjaunošana ilgst gandrīz 24 stundas.
Bioloģiskās drošības līmenis:	Lai kultivētu DU145 no androgēnu receptoriem neatkarīgo šūnu līniju, ir nepieciešami 1. bioloģiskās drošības līmeņa iestatījumi.

DU-145 prostatas vēža šūnas 10x un 20x palielinājumā.

3. dU-145 šūnu līnija: Priekšrocības un ierobežojumi

Tāpat kā citām šūnu līnijām, arī prostatas vēža šūnu līnijai DU-145 ir daži plusi un mīnusi. Šīs īpašības var palīdzēt jums izlemt par tās izmantošanu jūsu pētījumā. Galvenās DU-145 šūnu līnijas priekšrocības un trūkumi ir minēti turpmāk.

Priekšrocības

DU-145 šūnu priekšrocības ir šādas:

Tumorigenitāte	DU-145 ir agresīva tumorogēna prostatas vēža šūnu līnija ar mērenu metastātisku potenciālu. Izmanto DU145 ksenogrāfta modeļa izveidei imūnkompromitētām pelēm, lai pētītu prostatas vēža bioloģiju, attīstību un augšanu in vitro un in vivo.
Androgēna receptoru neatkarība	DU-145 prostatas vēža šūnas ir neatkarīgas no androgēnu receptoriem. To augšana nav atkarīga no androgēniem, un tās nereaģē šūnu un molekulārajā līmenī, ja tās tiek apstrādātas ar androgēniem. Ideāli piemērotas no hormoniem neatkarīgu prostatas vēža mehānismu izpētei.

Ierobežojumi

DU-145 šūnu līnijas ierobežojumi ir šādi:

In vitro modelis

DU-145 ir metastātiskas prostatas karcinomas in vitro šūnu modelis, tāpēc tas var pilnībā neatspoguļot prostatas primāro audzēju sarežģītību. Turklāt tā var neattēlot visus prostatas vēža tipus un apakštipus, jo tai piemīt tādas specifiskas īpašības kā neatkarība no androgēnu receptoriem.

4. dU-145 šūnu izmantošana pētniecībā

DU-145 prostatas vēža šūnu līnijai ir plašas izmantošanas iespējas pētniecībā. Šeit ir uzskaitīti daži daudzsološi pielietojumi.

Prostatas vēža bioloģija: DU-145 ir piemērots modelis prostatas vēža bioloģijas izpētei. Pētnieki izmanto šīs šūnas, lai pētītu molekulāros mehānismus, kas nosaka vēža attīstību, progresēšanu un metastāžu veidošanos. Turklāt tiek pētītas arī ģenētiskās izmaiņas, kas parasti saistītas ar prostatas vēzi. Pētījumos, kas veikti 2021. gadā, tika pētītas DU-145 šūnas, lai identificētu potenciālos biomarķierus efektīvai diagnostikai un terapijai. Pētījumā tika ierosināts aktīna gamma 1 (ACTG1) kā potenciāls prostatas vēža biomarķieris, jo tas veicina vēža šūnu proliferāciju un regulē metastāzes, aktivizējot MAPK/ERK ceļu [2].
Zāļu skrīnings un izstrāde: DU-145 prostatas vēža šūnas plaši izmanto potenciālo pretvēža zāļu citotoksicitātes un efektivitātes testēšanai. Tas palīdz pētniekiem identificēt jaunas zāles, izprast rezistenci pret zālēm un to pamatā esošos molekulāros mehānismus. Pētījumā, kas veikts 2022. gadā, tika pētīta sveķu maisījuma - propolisa jeb bišu līmes - citotoksiskā iedarbība prostatas vēža šūnu līnijā PC-3 un DU-145. Pētījums parādīja šīs dabīgās vielas augšanu kavējošo iedarbību abās šūnu līnijās un ierosināja tās pretvēža potenciālu [3]. Cits pētījums tika veikts 2019. gadā, kurā tika pētīta dabiskā savienojuma betaīna antiproliferatīvā iedarbība uz DU-145 prostatas vēža šūnām. Pētījums parādīja, ka betaīns iedarbojas antiproliferatīvi, paaugstinot oksidatīvā stresa izraisītu šūnu nāvi un iekaisumu DU-145 šūnās [4].

430,00 €*

Saturs: 1.5 milliliter

Cenas bez nodokļiem un piegādes izmaksām

cryovial

Produkta numurs: 300168

5.pētniecības publikācijas ar DU-145 šūnām

Turpmāk uzskaitītas dažas pētnieciskas publikācijas par DU-145 šūnu līniju.

No koncentrācijas atkarīga cinka sulfāta ietekme uz DU-145 cilvēka prostatas vēža šūnu līniju: oksidatīvā, apoptozes, iekaisuma un morfoloģiskā analīze

Šajā pētījumā, kas publicēts Biological Trace Element Research, 2020. gadā, ierosināts, ka cinka sulfāts (_ZnSo4) DU-145 šūnās iedarbojas pret proliferāciju, izraisot apoptozi, morfoloģiskas izmaiņas, oksidatīvus bojājumus un iekaisumu.

Selektīvā citotoksiskā un pretmetastatiskā aktivitāte DU-145 prostatas vēža šūnās, ko izraisa Annona muricata L. mizas ekstrakts un fitoķīmiskā viela annonacīns

Šis pētnieciskais raksts tika publicēts 2020. gadā izdevumā BMC Complementary Medicine and Therapies. Šajā pētījumā tika pētīts auga Annona muricata L. mizas ekstrakta un tā bioaktīvās vielas annonacīna citotoksiskais un antimetastatiskais potenciāls DU-145 šūnu līnijā.

LncRNA LOXL1-AS1/miR-let-7a-5p/EGFRsaistītais ceļš regulē prostatas vēža DU-145 šūnu rezistenci pret doksorubicīnu

Šajā publikācijā IUBMB Life (2019) ierosināts, ka garā nekodējošā RNS LOXL1-AS1 mijiedarbība ar miR-let-7a-5p un EGFR ceļu regulē prostatas vēža DU-145 šūnu rezistenci pret doksorubicīnu.

DDR1 samazināta regulācija izraisa apoptozi un inhibē EMT, fosforilējot Pyk2/MKK7 DU-145 un Lncap-FGC prostatas vēža šūnu līnijās

Šajā rakstā Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) minēts, ka diskoidīna domēna receptoru1 (DDR1) gēna lejupreģulācija izraisa DU-145 šūnu nāvi un inhibē pāreju no epitēlija uz mezenhīmu (EMT), aktivējot Pyk2/MKK7 ceļu.

Kasticīns kavē cilvēka prostatas vēža DU 145 šūnu migrāciju un invaziju, izmantojot Ras/Akt/NF-κB signalizācijas ceļus

Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā Journal of Food Biochemistry (2019), ierosināts, ka polimetoksiflavons kasticīns kavē DU-145 šūnu migrāciju un invaziju, regulējot Ras/Akt/NF-κB signalizācijas ceļus.

6. dU-145 šūnu līnijas resursi: Projekti, videoklipi un citi resursi

Par DU-145 prostatas vēža šūnu līniju ir pieejami daudzi tiešsaistes resursi. Šajā sadaļā ir minēti daži resursi, kuros izskaidrota šo šūnu apstrāde, uzturēšana un transfekcijas protokols:

DU-145 transfekcija: Šajā videomācību materiālā ir soli pa solim izklāstīts DU-145 šūnu transfekcijas protokols.

Šeit ir minēts DU-145 šūnu kultivēšanas protokols.

DU-145 subkultivēšana: Šī saite palīdzēs jums apgūt DU-145 šūnu subkulturēšanas vai subkulturēšanas protokolu.
DU-145 šūnas: Šajā tīmekļa vietnē ir daudz noderīgas informācijas par DU-145 šūnu līniju, tostarp par DU145 barotni, subkultivēšanas protokolu, proliferējošo un kriokonservēto kultūru apstrādi.

Atsauces

Lima, A.R., et al., Discrimination between the human prostate normal and cancer cell exometabolome by GC-MS. Scientific reports, 2018. 8(1): p. 5539.
Xiao, L., et al., Silencing ACTG1 expression induces prostate cancer epithelial mesenchymal transition through MAPK/ERK signaling pathway. DNA and Cell Biology, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
Gogacz, M., et al., Anticancer effects of propolis extracts obtained with the cold separation method on PC-3 and DU-145 prostate cancer cell lines (Ar aukstās separācijas metodi iegūto propolisa ekstraktu pretvēža iedarbība uz PC-3 un DU-145 prostatas vēža šūnu līnijām ). Molecules, 2022. 27(23): p. 8245.
Kar, F., et al., Betaine suppresses cell proliferation by increasing oxidative stress-mediated apoptosis and inflammation in DU-145 human prostate cancer cell line. Cell Stress and Chaperones, 2019. 24: p. 871-881.