BV2 šūnas - Centrālās nervu sistēmas pētījumi ar BV2 mikroglijas šūnām

BV2 ir peļu mikrogliju šūnu līnija, ko plaši izmanto neirozinātnes pētījumos. Šo imortalizēto šūnu līniju var izmantot kā in vitro modeli neirodeģeneratīvo slimību un ar tām saistīto šūnu stāvokļu un procesu, t. i., neiroinflammation, izpētei. Turklāt BV2 šūnas tiek uzskatītas par alternatīvu primārās mikroglijas modeļa sistēmu.

Šajā rakstā tiks aplūkota peļu mikrogliju šūnu līnijas BV2 izcelsme, šūnu kultūras informācija un pētnieciskie lietojumi. Īpaši tiks aplūkoti šādi jautājumi:

1. BV2 šūnu izcelsme un vispārējās īpašības
2. BV2 šūnu līnija: Informācija par kultivēšanu
3. BV2 šūnu priekšrocības un ierobežojumi
4. BV2 šūnu līnijas pielietojums pētniecībā
5. BV2 šūnas: Pētniecības publikācijas
6. Resursi par BV2 šūnu līniju: Protokoli, videomateriāli un citi resursi

1. BV2 šūnu izcelsme un vispārīgas īpašības

Šajā raksta sadaļā ir izskaidrota BV2 šūnu līnijas izcelsme un vispārīgās iezīmes, kas to atšķir no citām mikrogliālo šūnu līnijām. Šeit jūs uzzināsiet: Kas ir BV2 šūnas? No kurienes nāk BV2 šūnas? Kāds ir BV2 šūnu izmērs?

• BV2 mikrogliālo šūnu līniju ieguva no jaundzimušo C57/BL6 mikroglijām Šūnu līniju imortalizēja, inficējot šūnas ar J2 retrovīrusu, kas nes v-raf/v-myc onkogēnu [1].
• Nestimulētām BV2 šūnām piemīt amebai līdzīga, hipertrofēta morfoloģija. Šī morfoloģija liecina par BV2 šūnu augsti aktivizētu un iekaisīgu stāvokli, salīdzinot ar primārajām mikroglijas šūnām [2].
• BV-2 šūnu līnijas diametrs ir no 10 līdz 15 μm.

BV2 Vs ECO 2 šūnu līnija

Abas ir peļu mikrogliju šūnu līnijas, bet tās atšķiras viena no otras. Galvenā atšķirība ir tā, ka BV2 tika imortalizēta ar ģenētisku manipulāciju palīdzību, savukārt ECO 2 tika spontāni imortalizēta. Turklāt ECO 2 ir tādas pašas vispārīgās īpašības kā BV2, bet tās kultivēšanai ir nepieciešama kolonijas stimulējošā faktora-1 (CSF-1) papildināšana.

2.bV2 šūnu līnija: Kultivēšanas informācija

Pirms šūnu līnijas kultūras apstrādes un uzturēšanas ir ļoti svarīgi iegūt informāciju par šūnu kultivēšanu. Šī raksta sadaļa palīdzēs jums uzzināt visus galvenos BV2 šūnu līnijas kultivēšanas aspektus. Jo īpaši mēs runāsim par šādiem jautājumiem: Kāds ir BV2 dubultošanās laiks? Kādu barotni izmanto BV2 šūnu kultivēšanai? Vai BV2 šūnu līnija ir adherenta vai suspensijas? Kā atkausēt BV2 šūnas?

Galvenie punkti BV2 šūnu kultivēšanai

3.bV2 šūnu priekšrocības un ierobežojumi

Tāpat kā citām šūnu līnijām, arī BV2 šūnām ir dažas priekšrocības un ierobežojumi. Daži no tiem ir minēti šeit.

Priekšrocības

BV2 šūnu līnijas priekšrocības ir šādas:

Ierobežojumi

Ar BV2 šūnām saistītie ierobežojumi ir šādi:

4.bV2 šūnu līnijas pielietojums pētniecībā

BV2 šūnu līnija piedāvā vairākus pielietojumus neirozinātnes pētījumos. Šajā iedaļā ir minēti daži biežāk sastopamie BV2 šūnu izmantošanas veidi pētniecībā.

Neirodeģeneratīvo slimību pētījumi: BV2 ir vērtīgs pētniecības instruments, lai pētītu neirodeģeneratīvas slimības, piemēram, Parkinsona slimību, Alcheimera slimību un multiplo sklerozi. Pētnieki ir pētījuši neirotoksicitāti un slimību patoloģiju un novērtējuši terapeitiskos līdzekļus, izmantojot BV2 šūnu līnijas. Piemēram, 2020. gadā veiktajā pētījumā tika novērtēta dabiskā hidroksistilbēna - rhaponticīna, kas atrodas Rheum rhaponticum augā, pretiekaisuma un neiroprotektīvā iedarbība, izmantojot ar lipopolisaharīdu aktivētas BV2 šūnas kā Parkinsona slimības modeli. Savienojums vājina lipopolisaharīda (LPS) mediēto BV2 aktivāciju, inhibējot slāpekļa oksīda sintēzi un samazinot reaktīvās skābekļa formas un proiekaisuma mediatorus. Īsumā, raponticīns iedarbojas pretiekaisuma un neiroprotektīvi uz LPS inducētu mikrogliju modeli (BV2) [3]. Līdzīgā pētījumā tika pētīta signālceļu iesaistīšanās neiroinflammācijā. Pētnieki izstrādāja iekaisuma modeli, izmantojot lipopolisaharīda izraisītu BV2 aktivāciju. Viņi atklāja, ka neiroinflammation ir iesaistīta AKT/Nrf-2/HO-1-NF-κB signalizācijas ass. Turklāt, izmantojot šo modeli, viņi novērtēja arī dabiskā flavonoīda beta-naftoflavona (BNF) pretiekaisuma un neiroprotektīvo iedarbību. Savienojums šo terapeitisko iedarbību izraisīja, kavējot BV2 aktivāciju [4]. Tāpat pētījumā tika izmantotas BV2 šūnas un pētīta zonisamīda zāļu uzlabojošā ietekme uz mitohondriālo disfunkciju mikrogliālajās šūnās. Šī pētījuma rezultāti apstiprina zonisamīda klīnisko izmantošanu Parkinsona slimības ārstēšanai [5].

5.bV2 šūnas: Pētniecības publikācijas

Turpmāk uzskaitīti daži interesanti un visvairāk citēti pētījumi par BV2 šūnām.

Mitohondriju lizāti izraisa iekaisumu un ar Alcheimera slimību saistītas izmaiņas mikrogliju un neironu šūnās

Šis pētījums publicēts žurnālā Journal of Alzheimer's Disease (2015). Pētījumā ierosināts, ka mitohondriju bojājumu radītā DAMP (ar bojājumiem saistītā molekulārā parauga) mtDNA molekula var izraisīt iekaisuma izmaiņas mikrogliālajās šūnās (BV2). Tādējādi tās var veicināt arī Alcheimera slimības neiroiekaisumu.

Huanglian jiedu novārījuma terapeitiskā ietekme uz Alcheimera slimību, regulējot aβ izraisīto fagocitozi bv-2 mikrogliālajās šūnās

Šajā rakstā, kas publicēts žurnālā FARMACIA (2021), izmantotas BV2 šūnas un noteikta Huanglian Jiedu novārījuma (HLJDD) terapeitiskā iedarbība uz Alcheimera slimību. Pētījumā tika konstatēts, ka HLJDD veicina BV2 amyloid-beta fagocitozi, palielinot Trm2 proteīna ekspresiju, ko apstiprināja BV2 Western blot analīze.

Alfa-sinukleīns aktivizē BV2 mikroglijas atkarībā no tā agregācijas stāvokļa

Šajā zinātniskajā rakstā, kas publicēts Biochemical and Biophysical Research Communications (2016), ierosināts, ka alfa-sinukleīns, šķīstošs proteīns pieaugušo centrālajā nervu sistēmā, var aktivizēt BV2 šūnas atkarībā no tā agregācijas stāvokļa.

BV-2 šūnu eksosomas, ko inducē alfa-sinukleīns: svarīgs neirodeģenerācijas mediators PD gadījumā

Šis pētījums publicēts 2013. gadā žurnālā Neuroscience Letters. Šajā pētījumā teikts, ka eksosomas, kas izdalās no alfa sinukleīna aktivētām BV2 mikrogliālajām šūnām, var būt būtiski neirodeģenerācijas mediatori Parkinsona slimības gadījumā.

Idebenons mazina neiroinflammation un modulē mikrogliju polarizāciju LPS stimulētās BV2 šūnās un MPTP inducētā Parkinsona slimības izraisītā Parkinsona slimībā pelēm

Šis pētījums publicēts žurnālā Frontiers Cellular Neuroscience (2019). Tajā ierosināts, ka antioksidants idebenons modulē mikrogliju polarizāciju un mazina iekaisumu ar lipopolisaharīdu aktivizētās BV2 šūnās un 1-metil-4-fenil-1,2,3,6-tetrahidropiridīna (MPTP) izraisītas Parkinsona slimības peļu modelī.

6.bV2 šūnu līnijas resursi: Protokoli, videomateriāli un citi resursi

Tiešsaistē pieejamie resursi par BV2 ir ierobežoti. Šeit ir daži no tiem.

• BV2 šūnu līnijas subkultivēšana: Šajā tīmekļa vietnes saitē ir īss protokols BV2 šūnu līnijas subkultivēšanai.
• Saldētu šūnu atkausēšana: Šis videoklips palīdz apgūt pamatprotokolu saldētu šūnu atkausēšanai un kultivēšanai.

Šeit ir minēts BV2 šūnu kultivēšanas protokols.

• BV2 šūnu kultivēšana: Šajā tīmekļa vietnes saitē ir iekļauts BV2 šūnu kultivēšanas protokols. Turklāt tajā ir sniegta arī informācija par BV2 šūnu līnijas šūnu kultūru barotnēm un sasaldēšanas barotņu sastāviem.

Atsauces

1. Wang, Y., Y. Peng un H. Yan, komentārs: Neuroinflammatory In Vitro Cell Culture Models and the Potential Applications for Neurological Disorders. Front Pharmacol, 2021. 12: p. 792614.
2. Sarkar, S., et al, Characterization and comparative analysis of a new mouse microglial cell model for studying neiroinflammatory mechanisms during neirotoxic insults. Neurotoxicology, 2018. 67: p. 129-140.
3. Zhao, F., et al., Neuroprotective effect of rhaponticin against Parkinson disease: Pēļu in vitro BV-2 modeļa un in vivo MPTP inducēta peļu modeļa atziņas. Journal of Biochemical and Molecular Toxicology, 2021. 35(1): p. e22631.
4. Gao, X., et al., Beta-naftoflavons inhibē LPS izraisītu iekaisumu BV-2 šūnās, izmantojot AKT/Nrf-2/HO-1-NF-κB signalizācijas asi. Immunobiology, 2020. 225(4): p. 151965.
5. Tada, S., et al., Zonisamide Ameliorates Microglial Mitochondriopathy in Parkinson's Disease Models. Brain Sciences, 2022. 12(2): p. 268.