BEAS-2B šūnas – BEAS-2B šūnas elpošanas sistēmas slimību pētniecībā: visaptverošs ceļvedis
BEAS-2B ir nemirstīga un netumorogēna cilvēka plaušu epitēlija šūnu līnija. Tā ir plaši izmantota in vitro modelis, lai pētītu plaušu šūnu reakciju uz dažādiem kancerogēniem un toksiskām vielām. Turklāt tā ir vērtīgs pētniecības instruments dažādu elpošanas ceļu infekciju un slimību, piemēram, COVID-19 un plaušu karcinomu, izpētei.
- Augšanas barotne
- BEAS-2B plaušu šūnu līnijas kultivēšanai izmanto BEGM (bronhu epitēlija šūnu augšanas barotni), kas satur 10 % teļa seruma. Barotni jāmaina ik pēc 2–3 dienām.
- Dubultošanās laiks
- BEAS-2B populācijas dubultošanās laiks ir aptuveni 26 stundas.
- Augšanas tips
- BEAS-2B ir epitēlija tipa adhezīva šūnu līnija.
- Bioloģiskās drošības līmenis
- BSL-1
- Piegādātājs
- Cytion — Pasūtīt BEAS-2B
Šajā rakstā mēs apspriedīsim gandrīz visus BEAS-2B plaušu šūnu līnijas aspektus, ieskaitot tās izcelsmi, informāciju par šūnu kultūru, priekšrocības, trūkumus un pielietojumus pētniecībā. Jo īpaši mēs apskatīsim:
- BEAS-2B šūnu izcelsmi un vispārīgās īpašības
- BEAS-2B šūnu līnija: informācija par kultivēšanu
- BEAS-2B šūnu priekšrocības un trūkumi
- BEAS-2B šūnu līnijas pielietojumu pētniecībā
- BEAS-2B šūnas: pētniecības publikācijas
- Šūnu kultivēšanas protokoli
1. BEAS-2B šūnu izcelsme un vispārējās īpašības
Pirmā lieta, uz ko jāpievērš uzmanība šūnu līnijā, ir tās izcelsme un vispārējās īpašības. Šeit Jūs uzzināsiet par BEAS-2B cilvēka bronhu epitēlija šūnu galvenajām īpašībām un izcelsmi. Jūs apgūsiet: Kas ir BEAS-2B plaušu šūnu līnija? Kāda veida šūnas ir BEAS-2B? Kāda ir BEAS-2B šūnu izcelsme?
- BEAS-2B, bronhu epitēlija šūnu līnija, tika izstrādāta no nevēža cilvēka plaušu audiem 1988. gadā, pateicoties Kērtiša C. Harisa (Curtis C. Harris) grupai [1].
- BEAS-2B šūnām ir epitēlijam līdzīga morfoloģija.
HBEpC pret BEAS-2B
HBEpC ir cilvēka bronhu epitēlija primārās šūnas. Līdzīgi kā BEAS-2B, tās ir normālas cilvēka bronhu epitēlija šūnas. Tomēr tām ir ierobežots dzīves ilgums salīdzinājumā ar nemirstīgajām BEAS-2B šūnām. Abas šūnu līnijas var izmantot plaušu bioloģijas, toksikoloģijas un slimību modelēšanas pētījumos.
BEAS-2B šūnu līnija: informācija par kultivēšanu
Informācija par šūnu līnijas kultivēšanu var atvieglot darbu ar to. Šajā raksta sadaļā jūs uzzināsiet visu nepieciešamo par BEAS-2B plaušu šūnu līnijas kultivēšanu. Konkrēti, mēs uzzināsim: kāds ir BEAS-2B dubultošanās laiks? Kas ir BEAS-2B barotne? Vai BEAS-2B šūnu līnija ir adhezīva? Kā kultivēt BEAS-2B šūnas?
Galvenie punkti BEAS-2B šūnu kultivēšanai
Dubultošanās laiks:
BEAS-2B populācijas dubultošanās laiks ir aptuveni 26 stundas.
Adhēzijas vai suspensijas:
BEAS-2B ir epitēlija tipa adhezīva šūnu līnija.
Šūnu blīvums:
BEAS-2B šūnu līnijai ieteicamais šūnu blīvums ir 1 līdz 2 × 104 šūnas/cm2. Adherentās BEAS-2B šūnas noskalo ar fosfāta buferšķīdumu un inkubē ar Accutase istabas temperatūrā dažas minūtes. Pēc šūnu atdalīšanās pievieno svaigu barotni, un šūnas savāc ar centrifugēšanu. Savāktās šūnas uzmanīgi atkārtoti suspendē un ielej jaunā kolbā augšanai.
Augšanas barotne:
BEAS-2B plaušu šūnu līnijas kultivēšanai izmanto BEGM (bronhu epitēlija šūnu augšanas barotni), kas satur 10 % embriju liellopu serumu. Barotni jāmaina ik pēc 2–3 dienām.
Augšanas apstākļi:
BEAS-2B kultūru uztur 37 °C temperatūrā mitrinātā inkubatorā ar nepārtrauktu 5 % CO2 pievadi.
Uzglabāšana:
Sasaldētas BEAS-2B šūnu ampulas var uzglabāt šķidrā slāpekļa tvaika fāzē vai elektriskajā saldētavā temperatūrā zem -150 °C.
Sasaldēšanas process un barotne:
BEAS-2B plaušu šūnu līnijas sasaldēšanai izmanto CM-1 vai CM-ACF sasaldēšanas vidi. Šūnas sasaldē, ļaujot temperatūrai pazemināties tikai par 1 °C minūtē, lai saglabātu šūnu dzīvotspēju. Šo metodi sauc par lēnu sasaldēšanu.
Atkausēšanas process:
Sasaldētas vai kriokonservētas BEAS-2B kultūras atkausē 37 °C ūdens vannā, kas satur pretmikrobu līdzekli, 40–60 sekundes. Pēc tam šūnas pievieno barotnei un var tieši kultivēt jaunās kolbās vai centrifugēt, lai atdalītu sasaldēšanas barotnes sastāvdaļas. Tad savāktās šūnas atkārtoti suspendē un kultivē. Pirmajā gadījumā sasaldēšanas barotni atdalī pēc 24 stundām.
Bioloģiskās drošības līmenis:
BEAS-2B kultūru apstrādei ir nepieciešamas 1. bioloģiskās drošības līmeņa laboratorijas.
BEAS-2B šūnu priekšrocības un trūkumi
Tāpat kā citas šūnu līnijas, arī BEAS-2B šūnām ir savas priekšrocības un trūkumi. Daži no tiem ir aprakstīti zemāk.
Priekšrocības
BEAS-2B šūnu līnijas priekšrocības ir šādas:
Imortalizēta šūnu līnija
BEAS-2B cilvēka bronhu epitēlija šūnu līnija ir imortalizēta. Tāpēc tā turpina augt, neieejot novecošanās stadijā. Šī BEAS-2B šūnu īpašība novērš nepieciešamību atkārtoti iegūt primārās cilvēka plaušu epitēlija šūnas, kurām ir īsāks dzīves ilgums.
Viegli kultivējama
BEAS-2B kultūras ir viegli uzturamas. Šūnas viegli aug un vairojas standarta kultivēšanas apstākļos. Nav nekādu sarežģītu vai komplicētu šūnu kultivēšanas prasību.
Cilvēka izcelsme
BEAS-2B šūnu līnija ir cilvēka izcelsmes un ir nozīmīga. Tādējādi tā ir ideāls in vitro modelis, lai pētītu cilvēka elpceļu epitēlija šūnu reakcijas, uzvedību un procesus.
Trūkumi
Ar BEAS-2B plaušu šūnu līniju saistītie trūkumi ir šādi:
Transformētas cilvēka plaušu epitēlija šūnas
BEAS-2B šūnas ir transformētas ar Ad12-SV40 2B vīrusu, kas var mainīt to uzvedību un reakcijas salīdzinājumā ar sākotnējām cilvēka plaušu audos iegūtajām bronhu epitēlija šūnām.
BEAS-2B šūnu līnijas pielietojums pētniecībā
BEAS-2B šūnu līnija piedāvā vairākus pielietojumus biomedicīniskajos pētījumos. Daži no BEAS-2B šūnu izplatītākajiem pielietojumiem ir:
- Toksikoloģija: BEAS-2B šūnas bieži izmanto, lai pētītu dažādu toksīnu, vides piesārņotāju un ķīmisko vielu genotoksicitāti un citotoksicitāti. Pētnieki izmanto šo bronhiālo epitēlija šūnu līniju, lai novērtētu šo vielu kaitīgo ietekmi uz plaušu veselību. Turklāt viņi pēta arī pamatā esošos molekulāros mehānismus. Piemēram, 2021. gadā veiktajā pētījumā tika novērtēta kadmija metāla toksicitāte BEAS-2B šūnu līnijā. Pētījuma rezultāti atklāja, ka kadmijs izraisīja šūnu nāvi un mitohondriju bojājumus BEAS-2B plaušu šūnu līnijā, modulējot MAPK signālceļu [2]. Citā pētījumā BEAS-2B šūnu līnija tika izmantota, lai novērtētu cinka oksīda nanodaļiņu toksicitāti oksidatīvā stresa apstākļos [3].
- Elpošanas sistēmas slimību modelēšana: BEAS-2B šūnu līnija ir lielisks pētniecības instruments un in vitro modelis, lai pētītu elpošanas sistēmas slimības, piemēram, hronisku obstruktīvu plaušu slimību (HOPS), astmu, plaušu vēzi un vīrusu infekcijas, piemēram, SARS-CoV-2. Pētnieki mēdz izraisīt ar slimībām saistītus stāvokļus BEAS-2B šūnu līnijā un pētīt to pamatā esošos šūnu un molekulāros mehānismus. Tas palīdz identificēt potenciālos zāļu mērķus un izstrādāt personalizētas terapijas. 2022. gadā veiktajā pētījumā tika izmantota BEAS-2B šūnu līnija un pētīta estrogēna un tā receptoru loma SARS-CoV-2 infekcijā. Rezultāti liecināja, ka augstāka GPER1 estrogēna receptora ekspresija samazina BEAS-2B SARS-CoV-2 vīrusu slodzi. Tādējādi tas var būt iesaistīts SARS-CoV-2 vīrusu infekcijā vai replikācijā [4]..
5. BEAS-2B šūnas: zinātniskās publikācijas
Tālāk ir uzskaitīti daži interesanti un visbiežāk citēti pētījumi, kuros izmantotas BEAS-2B šūnas.
Grafēna toksicitāte normālās cilvēka plaušu šūnās (BEAS-2B)
Šis pētījums tika publicēts 2011. gadā žurnālā „Journal of Biomedical Nanotechnology”. Pētījumā tika izvirzīta hipotēze, ka grafīta oksīds izraisa apoptozi un citotoksicitāti normālās bronhu epitēlija šūnu līnijā (BEAS-2B).
Šis pētījuma raksts tika publicēts žurnālā „Journal of Microbiology and Biotechnology” (2014). Šajā pētījumā tika izpētīts flavonoīda naringenīna terapeitiskais potenciāls BEAS-2B šūnu līnijā. Rezultāti liecināja, ka naringenīns aizsargā BEAS-2B plaušu šūnas pret paraquat izraisītu toksicitāti vai oksidatīvu bojājumu.
Šis pētījums tika publicēts žurnālā „Inhalation Toxicology” (2011). Tajā pētnieki novērtēja magnētisko nanodaļiņu ar amorfo silīcija pārklājumu toksicitāti BEAS-2B šūnu līnijā in vitro.
Šajā rakstā žurnālā Biomedicine & Pharmacotherapy (2022) tika izvirzīts pieņēmums, ka ursodeoksiholskābe var kavēt elpceļu epitēlija šūnu patoloģisko migrāciju un novērst bojājumus, ko izraisa SARS-CoV-2 smailei līdzīgā proteīna un ACE-2 mijiedarbība. Tādējādi tā var palīdzēt atjaunot epitēlija bazālo slāni.
Radona ietekme uz miR-34a izraisīto apoptozi cilvēka bronhu epitēlija BEAS-2B šūnās
Šis pētījums tika publicēts 2019. gadā žurnālā „Journal of Toxicology and Environmental Health”. Pētījuma rezultāti liecina, ka hroniska radona iedarbība var veicināt kancerogēnēzi cilvēka bronhu epitēlija šūnās (BEAS-2B), aktivizējot mikroRNA-34a.
Šūnu kultūras protokoli
Šeit ir minēts BEAS-2B šūnu kultivēšanas protokols.
- BEAS-2B subkultivēšana: Šis dokuments palīdzēs jums uzzināt par BEAS-2B barotnēm un subkultivēšanas procedūrām.
- BEAS-2B šūnu līnija: Šajā tīmekļa vietnē ir atrodama visa pamatinformācija, kas nepieciešama, lai sāktu darbu ar BEAS-2B šūnu līniju, tostarp informācija par barotnēm un protokoliem, kas attiecas uz proliferējošu un kriokonservētu kultūru apstrādi.
Atsauces
- Han, X., et al., Cilvēka plaušu epitēlija BEAS-2B šūnas uzrāda mezenhālās cilmes šūnu īpašības. PLoS One, 2020. 15(1): lpp. e0227174.
- Cao, X., et al., Kadmijs izraisīja BEAS-2B šūnu apoptozi un mitohondriju bojājumus caur MAPK signālceļu. Chemosphere, 2021. 263: lpp. 128346.
- Heng, B.C., et al., Cinka oksīda (ZnO) nanodaļiņu toksicitāti cilvēka bronhu epitēlija šūnās (BEAS-2B) pastiprina oksidatīvais stress. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): 1762–1766. lpp.
- Costa, A.J., et al., Estrogēna receptora GPER1 pārmērīga ekspresija un ārstēšana ar G1 samazina SARS-CoV-2 infekciju BEAS-2B bronhu šūnās. Molecular and Cellular Endocrinology, 2022. 558: 111775. lpp.