BEAS-2B šūnas - BEAS-2B šūnas elpošanas ceļu slimību pētniecībā: Visaptverošs ceļvedis
BEAS-2B ir imortizēta cilvēka plaušu epitēlija šūnu līnija, kas nav tumoroģēna. Tā ir plaši izmantots in vitro modelis, lai pētītu plaušu šūnu reakciju uz dažādiem kancerogēniem un toksiskām vielām. Turklāt tā ir vērtīgs pētniecības instruments dažādu elpceļu infekciju un slimību, piemēram, COVID-19 un plaušu karcinomu, izpētei.
Šajā rakstā mēs aplūkosim gandrīz visus BEAS-2B plaušu šūnu līnijas aspektus, tostarp tās izcelsmi, šūnu kultūras informāciju, priekšrocības, trūkumus un pielietojumu pētniecībā. Īpaši pievērsīsimies:
- BEAS-2B šūnu izcelsme un vispārējās īpašības
- BEAS-2B šūnu līniju: Informācija par kultivēšanu
- BEAS-2B šūnu priekšrocības un trūkumi
- BEAS-2B šūnu līnijas lietojumi pētniecībā
- BEAS-2B šūnas: Pētniecības publikācijas
- Šūnu audzēšanas protokoli
1. BEAS-2B šūnu izcelsme un vispārīgās īpašības
Pirmā lieta, kas ir jāņem vērā, meklējot šūnu līniju, ir tās izcelsme un vispārīgās īpašības. Šeit jūs uzzināsiet par cilvēka bronhu epitēlija šūnu BEAS-2B būtiskākajām īpašībām un izcelsmi. Jūs izpētīsiet: Kas ir BEAS-2B plaušu šūnu līnija? Kāda veida šūnas ir Beas 2B? Kāda ir BEAS-2B šūnu izcelsme?
- Bronhu epitēlija šūnu līniju BEAS-2B 1988. gadā no cilvēka plaušu audiem bez vēža izstrādāja Curtis C. Harris grupa [1].
- BEAS-2B šūnām ir epitēlijam līdzīga morfoloģija.
HBEpC pret BEAS-2B
HBEpC ir cilvēka bronhu epitēlija primārās šūnas. Līdzīgi kā BEAS-2B tās ir normālas cilvēka bronhu epitēlija šūnas. Tomēr to mūžs ir ierobežots salīdzinājumā ar imortalizētajām BEAS-2B. Abas šūnu līnijas var izmantot plaušu bioloģijas, toksikoloģijas un slimību modelēšanas pētījumiem.
2.bEAS-2B šūnu līnija: Informācija par kultivēšanu
Kultivēšanas informācija no šūnu līnijas var atvieglot darbu ar to. Šajā raksta sadaļā jūs uzzināsiet visus BEAS-2B plaušu šūnu līnijas kultivēšanas pamatus. Jo īpaši mēs uzzināsim: Kāds ir BEAS-2B dubultošanās laiks? Kas ir BEAS-2B barotne? Vai BEAS-2B šūnu līnija ir adherenta? Kā kultivēt BEAS-2B šūnas?
Galvenie punkti BEAS-2B šūnu kultivēšanai
|
Dubultošanās laiks: |
BEAS-2B populācijas dubultošanās laiks ir aptuveni 26 stundas. |
|
Adhēzijas vai suspensijas veidā: |
BEAS-2B ir epitēlijveidīga adherentu šūnu līnija. |
|
Šūnu blīvums: |
Ieteicamais šūnu blīvums BEAS-2B šūnu līnijai ir 1 līdz 2 ×104 šūnas/cm2. Adherētās BEAS-2B šūnas skalo ar fosfātu buferšķīduma fizioloģisko šķīdumu un dažas minūtes inkubē ar Accutase istabas temperatūrā. Pēc šūnu disociācijas pievieno svaigu barotni un centrifugējot savāc šūnas. Savāktās šūnas rūpīgi resuspendē un ielej jaunā kolbā audzēšanai. |
|
Augšanas barotne: |
BEAS-2B plaušu šūnu līnijas kultivēšanai izmanto BEGM (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium) barotni, kas satur 10 % liellopu fetālā seruma. Barotne jāmaina ik pēc 2 līdz 3 dienām. |
|
Augšanas apstākļi: |
BEAS-2B kultūru uztur 37 °C temperatūrā mitrinātā inkubatorā ar pastāvīgu 5 % CO2 pieplūdi. |
|
Uzglabāšana: |
BEAS-2B šūnu flakonus var uzglabāt šķidrā slāpekļa tvaika fāzē vai elektriskā saldētavā temperatūrā zem -150°C. |
|
Sasaldēšanas process un vide: |
BEAS-2B plaušu šūnu līnijas sasaldēšanai izmanto CM-1 vai CM-ACF sasaldēšanas barotni. Šūnas sasaldē, pieļaujot tikai 1 °C temperatūras pazemināšanos minūtē, lai aizsargātu šūnu dzīvotspēju. Šo metodi sauc par lēno sasaldēšanu. |
|
Atkausēšanas process: |
Sasaldētās vai kriokonservētās BEAS-2B kultūras atkausē 37 °C ūdens vannā, kas satur antimikrobiālu līdzekli, 40 līdz 60 sekundes. Pēc tam šūnām pievieno barotni, un tās var tieši kultivēt jaunās kolbās vai centrifugēt, lai atdalītu sasalstošās barotnes sastāvdaļas. Pēc tam savāktās šūnas resuspendē un kultivē. Pirmajā gadījumā sasaldēšanas barotni noņem pēc 24 stundām. |
|
Bioloģiskās drošības līmenis: |
BEAS-2B kultūru apstrādei nepieciešamas 1. bioloģiskās drošības līmeņa laboratorijas. |
3.bEAS-2B šūnu priekšrocības un trūkumi
Tāpat kā citām šūnu līnijām, arī BEAS-2B šūnām ir daži plusi un mīnusi. Daži no tiem ir aplūkoti turpmāk.
Priekšrocības
BEAS-2B šūnu līnijas priekšrocības ir šādas:
|
Immortalizēta šūnu līnija |
BEAS-2B cilvēka bronhu epitēlija šūnu līnija ir imortalizēta. Tāpēc tā turpina augt, neuzsākot novecošanu. Šī BEAS-2B šūnu īpašība novērš vajadzību atkārtoti iegūt primārās cilvēka plaušu epitēlija šūnas ar īsāku dzīves ciklu. |
|
Viegli kultivējamas |
BEAS-2B kultūras ir viegli kopjamas. Šūnas bez piepūles aug un vairojas standarta kultūras apstākļos. Nav nekādu pārgalvīgu vai sarežģītu šūnu kultivēšanas prasību. |
|
Cilvēka izcelsme |
BEAS-2B šūnu līnijai ir cilvēka izcelsme un nozīme. Tādējādi tā ir ideāls in vitro modelis cilvēka elpceļu epitēlija šūnu reakciju, uzvedības un procesu izpētei. |
Trūkumi
Ar BEAS-2B plaušu šūnu līniju saistītie trūkumi ir šādi:
|
Pārveidotas cilvēka plaušu epitēlija šūnas |
BEAS-2B šūnas ir transformētas ar Ad12-SV40 2B vīrusu, kas var mainīt to uzvedību un reakcijas salīdzinājumā ar oriģinālajām cilvēka plaušu audu bronhu epitēlija šūnām. |
4.bEAS-2B šūnu līnijas lietojumi pētniecībā
BEAS-2B šūnu līniju var izmantot biomedicīniskajos pētījumos. Dažas izplatītākās BEAS-2B šūnu izmantošanas iespējas ir šādas:
- Toksikoloģija: BEAS-2B šūnas bieži izmanto dažādu toksīnu, vides piesārņotāju un ķīmisko vielu genotoksicitātes un citotoksicitātes izpētei. Pētnieki izmanto šo bronhu epitēlija šūnu līniju, lai novērtētu šo vielu kaitīgo ietekmi uz plaušu veselību. Turklāt viņi pēta arī to pamatā esošos molekulāros mehānismus. Piemēram, 2021. gadā veiktajā pētījumā tika novērtēta kadmija metālu toksicitāte BEAS-2B šūnu līnijā. Pētījuma rezultāti atklāja, ka kadmijs izraisīja šūnu nāvi un mitohondriju bojājumus BEAS-2B plaušu šūnu līnijā, modulējot MAPK signalizācijas ceļu [2]. Citā pētījumā izmantoja BEAS-2B šūnu līniju, lai novērtētu cinka oksīda nanodaļiņu toksicitāti oksidatīvā stresa apstākļos [3].
- Elpošanas ceļu slimību modelēšana: BEAS-2B šūnu līnija ir lielisks pētniecības rīks un in vitro modelis elpošanas ceļu slimību, piemēram, hroniskas obstruktīvas plaušu slimības (HOPS), astmas, plaušu vēža un vīrusu infekciju, piemēram, SARS-CoV-2, pētīšanai. Pētnieki BEAS-2B šūnu līnijā parasti izraisa ar slimībām saistītus apstākļus un pēta to pamatā esošos šūnu un molekulāros mehānismus. Tas palīdz noteikt potenciālos zāļu mērķus un izstrādāt personalizētas terapijas. Pētījumos, kas tika veikti 2022. gadā, tika izmantota BEAS-2B šūnu līnija un pētīta estrogēna un tā receptoru loma SARS-CoV-2 infekcijas gadījumā. Rezultāti atklāja, ka lielāka GPER1 estrogēna receptora GPER1 ekspresija samazina BEAS-2B SARS-CoV-2 vīrusa slodzi. Tāpēc tas var būt iesaistīts SARS-CoV-2 vīrusa infekcijā vai replikācijā [4].
5.bEAS-2B šūnas: Pētniecības publikācijas
Turpmāk uzskaitīti daži interesanti un visvairāk citēti pētījumi, kuros izmantotas BEAS-2B šūnas.
Grafēna toksicitāte normālām cilvēka plaušu šūnām (BEAS-2B)
Šis pētījums publicēts 2011. gadā žurnālā Journal of Biomedical Nanotechnology. Pētījumā ierosināts, ka grafīta oksīds izraisa apoptozi un citotoksicitāti normālā bronhu epitēlija šūnu līnijā (BEAS-2B).
Šis pētnieciskais raksts publicēts žurnālā Journal of Microbiology and Biotechnology (2014). Šajā pētījumā tika pētīts flavonoīda naringenīna terapeitiskais potenciāls BEAS-2B šūnu līnijā. Iegūtie rezultāti liecina, ka naringenīns aizsargā BEAS-2B plaušu šūnas pret parakvāta izraisītu toksicitāti vai oksidatīviem bojājumiem.
Šis pētījums publicēts Inhalation Toxicology (2011). Tajā pētnieki novērtēja magnētisko nanodaļiņu ar amorfiem silīcija dioksīda pārklājumiem toksisko ietekmi uz BEAS-2B šūnu līniju in vitro.
Šajā rakstā žurnālā Biomedicine & Pharmacotherapy (2022) ierosināts, ka ursodezoksiholskābe var kavēt elpceļu epitēlija šūnu patoloģisku migrāciju un novērst SARS-CoV-2 smailes proteīna un ACE-2 mijiedarbības izraisītos bojājumus. Tādējādi tā var palīdzēt atjaunot epitēlija bazālo slāni.
Radona ietekme uz miR-34a izraisītu apoptozi cilvēka bronhu epitēlija BEAS-2B šūnās
Šis pētījums tika publicēts 2019. gadā žurnālā Journal of Toxicology and Environmental Health. Pētījuma secinājumos norādīts, ka hroniska radona iedarbība var veicināt cilvēka bronhu epitēlija šūnu (BEAS-2B) kanceroģenēzi, aktivizējot mikroRNA-34a.
6.šūnu kultūru protokoli
Šeit ir norādīts šūnu kultūras protokols BEAS-2B šūnām.
- BEAS-2B subkulturēšana: Šis dokuments palīdzēs jums uzzināt par BEAS-2B barotnēm un subkultivēšanas procedūrām.
- BEAS-2B šūnu līnija: Šajā tīmekļa vietnē ir apkopota visa pamatinformācija, kas nepieciešama, lai sāktu darbu ar BEAS-2B šūnu līniju, tostarp tās barotnes un protokoli, kā rīkoties ar proliferējošām un kriokonservētām kultūrām.
Atsauces
- Han, X., et al., Human lung epithelial BEAS-2B cells exhibit characteristics of mesenchymal stem cells. PLoS One, 2020. 15(1): p. e0227174.
- Cao, X., et al., Cadmium induced BEAS-2B cells apoptosis and mitochondria damage via MAPK signaling pathway. Chemosphere, 2021. 263: p. 128346.
- Heng, B.C., et al., Toxicity of cinc oxide (ZnO) nanoparticles on human bronchial epithelial cells (BEAS-2B) is accentuated by oxidative stress. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): p. 1762-1766.
- Costa, A.J., et al., Overexpression of estrogen receptor GPER1 and G1 treatment reduces SARS-CoV-2 infection in BEAS-2B bronchial cells. Molecular and Cellular Endocrinology, 2022. 558: p. 111775.