B16 šūnas — pamatinformācija par B16 melanomas šūnām onkoloģiskajos pētījumos

B16 ir pelēm izcelsmes ādas vēža (melanomas) šūnu līnija. Šī šūnu līnija ir efektīvs in vitro modelis cilvēka ādas vēža pētīšanai. To bieži izmanto, lai pētītu cietu audzēju veidošanos un vēža šūnu metastāzes.

Šis raksts palīdzēs jums izprast B16 melanomas šūnu līnijas pamatus. Konkrēti, tajā tiks apskatīts šāds saturs:

B16 šūnu līnijas vispārējās īpašības un izcelsme

Šajā raksta sadaļā tiks aprakstītas B16 melanomas šūnu līnijas raksturīgās iezīmes. Jūs uzzināsiet atbildes uz šādiem bieži uzdotajiem jautājumiem: Kas ir B16 vēža šūnu līnija? No kurienes ir iegūtas B16 šūnas? Kāds ir B16 šūnu izmērs?

• B16 šūnu līnija tika izveidota 1954. gadā. Šīs šūnas tika iegūtas no C57BL/6J pelēm, kurām Meinas štata Džeksona laboratorijās spontāni izveidojās audzējs ādā.
• Tās ir melanīnu ražojošas epitēlija šūnas, kurām ir spēja metastāzēt liesā, aknās un plaušās.
• Melanomas B16 šūnas aug kā monoslāņi un izrāda epitēlijam līdzīgu un vārpstas formas šūnu morfoloģiju.
• B16 šūnu līnijas izmērs ir aptuveni 15,4 μm.
• Ir atšķirīgi B16 šūnu subkloni, tostarp B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 un B16F10. Šīs sublīnijas atšķiras no B16 pamatšūnām un saglabā dažas specifiskas iezīmes. Piemēram, tām ir atšķirīga morfoloģija, šūnu izmērs un citas īpašības. B16F10 piemīt augsta metastāzēšanās spēja plaušās, un B164A5 ir visagresīvākā ādas vēža šūnu līnija salīdzinājumā ar B16F10, B16-GMCSF un B16FLT3 [1].

B16 šūnu līnija: priekšrocības un trūkumi

Tāpat kā citām šūnu līnijām, arī B16 piemīt unikāls priekšrocību un trūkumu kopums. Šajā sadaļā ir uzskaitīti daži nozīmīgākie šīs melanomas šūnu līnijas plusi un mīnusi.

Priekšrocības

B16 ir pirmais efektīvais peles šūnu rīks, ko plaši izmanto metastāžu pētījumos, pateicoties tā priekšrocībām. Dažas no šīs ādas vēža šūnu līnijas priekšrocībām ir:

Viegli audzējama

B16 šūnu līniju ir viegli kultivēt pētniecības laboratorijās. To plaši izmanto vēža šūnu bioloģijas, signālu ceļu un citu procesu pētīšanai.

Ātra augšana

B16 melanomas šūnu līnija izrāda augstu proliferācijas ātrumu, tādēļ tā ir piemērota šūnu dalīšanās un augšanas procesu pētīšanai.

Tumorigenitāte

B16 ir tumorogēna šūnu līnija ar audzēja līdzīgām īpašībām, piemēram, invāziju, migrāciju un proliferāciju. Tā ir vērtīga audzēja veidošanās, progresēšanas un metastāžu pētīšanai.

Trūkumi

Ar B16 šūnu līniju saistītie trūkumi ir šādi:

Trūkums saistībā ar cilvēku

Tā kā B16 ir peles melanomas šūnu līnija, tā var neprecīzi atspoguļot cilvēka ādas vēža bioloģiju, ierobežojot pētījumu rezultātu pārnesamību.

Heterogenitāte

B16 šūnas ir heterogēnas, tādējādi vienā kultūrā parādot dažādas ģenētiskās un fenotipiskās īpašības. Tas var ietekmēt rezultātu uzticamību un reproducējamību.

B16 šūnu pielietojumi

B16 šūnu līnija tiek plaši izmantota pētījumos. Daži daudzsološi šīs šūnu līnijas pielietojumi ir:

• Audzēju bioloģija: Šī peles ādas vēža šūnu līnija ir tumorogēna un plaši izmanto, lai izprastu audzēju bioloģiju. Ir veikti vairāki pētījumi, lai izpētītu šūnu mehānismus, kas ir pamatā audzēja šūnu augšanai, proliferācijai un metastāzēm, izmantojot B16 šūnas. 2020. gadā veiktajā pētījumā tika izmantotas B16 šūnas, lai izpētītu garās nekodējošās RNS, LncRNA MEG3, lomu melanomas veidošanās, augšanas un metastāžu procesā. Šis pētījums atklāja, ka nekodējošā RNS modulē miRNA-21/E-kadherīna asi, lai stimulētu šos šūnu procesus [2]. Tāpat tika veikts pētījums, lai izpētītu Notch1 signālu potenciālo lomu audzēja izraisītā imūnsupresijā, izmantojot B16 šūnas [3].
• Zāļu atklāšana: B16 šūnas tiek izmantotas, lai validētu un pārbaudītu potenciālo zāļu kandidātu terapeitisko iedarbību. Pētījumā tika novērtēta dabiskā savienojuma neogambogskābes pretvēža iedarbība, izmantojot B16 šūnu līniju. Pētījuma rezultāti atklāja, ka šis savienojums modulē PI3K/Akt/mTOR signālceļu, izraisot vēža šūnu nāvi [4]. Citā pētījumā, izmantojot B16 šūnu līniju, tika pētīta ginsenosīda Rg3, kas ir saponīns, pretmelanomas iedarbība. Pētījumā tika izvirzīta hipotēze, ka šis dabiskais savienojums izraisa pretvēža aktivitāti, nomācot ERK un Akt ceļus [5].

5. Zinātniskās publikācijas par B16 šūnām

Šeit ir daži nozīmīgi pētījumu publikācijas, kurās aprakstīta B16 melanomas šūnu līnija.

LncRNA MEG3 veicina melanomas augšanu, metastāzes un veidošanos, modulējot miR-21/E-kadherīna asi

Šajā publikācijā žurnālā Cancer Cell International (2020) tika izvirzīts pieņēmums, ka garā nekodējošā RNS MEG3 veicina B16 melanomas šūnu veidošanos, augšanu un metastāzes, modulējot miRNA-21/E-kadherīna asi.

Jauns psoralēna atvasinājums MPFC veicina melanogēnēzi, aktivizējot p38 MAPK un PKA signālceļus B16 šūnās

Šis raksts tika publicēts žurnālā International Journal of Molecular Medicine 2018. gadā. Šajā pētījumā tika izpētīta psoralēna atvasinājuma — 4-metil-6-fenil-2H-furo[3,2-g]hromen-2-ona (MPFC) — melanogēnā iedarbība un mehānismi B16 šūnās. Pētījumā tika izvirzīta hipotēze, ka šis atvasinājums veicina melanogēnēzi, stimulējot PKA un p38 MAPK šūnu signālu pārraidi.

Notch1 signālu pārraide melanomas šūnās veicināja audzēja izraisītu imūnsupresiju, paaugstinot TGF-β1 ekspresiju

Šis pētījums tika publicēts 2018. gadā žurnālā „Journal of Experimental & Clinical Cancer Research”. Pētījuma rezultāti liecina, ka Notch1 signālu aktivācija B16 šūnās var kavēt pretvēža imunitāti, paaugstinot TGF-β1 gēna ekspresiju.

Neogambogiskā skābe izraisa melanomas B16 šūnu apoptozi, izmantojot PI3K/Akt/mTOR signālceļu

Šo pētījumu 2020. gadā veica Chunlan Wu un viņa kolēģi, un tas tika publicēts žurnālā „Acta Biochimica Polonica”. Šis pētījums liecina, ka neogambogiskā skābe, kas ir dabīgs savienojums, var izraisīt B16 melanomas šūnu nāvi, modulējot PI3K/Akt/mTOR signālceļu.

Irīdija (III) komplekss kā spēcīgs pretvēža līdzeklis izraisa apoptozi un autofāgiju B16 šūnās, inhibējot AKT/mTOR ceļu

Šis pētījums tika publicēts žurnālā European Journal of Medicinal Chemistry 2018. gadā. Šajā pētījumā pētnieki izpētīja savienojuma, irīdija (III) kompleksa, pretvēža aktivitāti, izmantojot B16 melanomas šūnas.

Ailantons izraisa šūnu cikla apstāšanos un apoptozi melanomas B16 un A375 šūnās

Šajā pētījumā tika izvirzīts pieņēmums, ka augu bioaktīvā viela ailantons piemīt pretvēža potenciāls, jo tā var izraisīt apoptozi un šūnu cikla apstāšanos B16 un A375 melanomas šūnās. Šis raksts tika publicēts žurnālā „Biomolecules” 2019. gadā.

Resursi par B16 šūnu līniju: protokoli, video un citi materiāli

Ir ierobežoti resursi par B16 šūnu līniju, kas izskaidro tās kultivēšanas un transfekcijas protokolus.

• Melanomas šūnu kultivēšana: Šis video sniedz vērtīgus padomus par melanomas šūnu līniju kultivēšanu.
• Šūnu līnijas subkultivēšana: Šajā videoklipā ir izskaidrots vispārējs šūnu līnijas subkultivēšanas protokols.
• B16F10 šūnu līnijas transfekcija: Šajā videoklipā ir izskaidrots transfekcijas protokols B16 melanomas šūnu apakšlīnijai. Tas var palīdzēt optimizēt transfekcijas protokolu B16 šūnām.

Tālāk ir sniegti daži šūnu kultivēšanas protokoli B16 šūnām. 

• B16 šūnu kultivēšana: Šajā tīmekļa vietnē ir visa nepieciešamā informācija par B16 šūnu kultivēšanu, tostarp par augšanas barotnēm, subkultivēšanu, atkausēšanu un šūnu sasaldēšanu.

Atsauces

1. Danciu, C., et al., Četru dažādu B 16 peles melanomas šūnu sublīniju uzvedība: C57 BL/6J āda. Starptautiskais eksperimentālās patoloģijas žurnāls, 2015. 96(2): 73.–80. lpp.
2. Wu, L., et al., LncRNA MEG3 veicina melanomas augšanu, metastāzes un veidošanos, modulējot miR-21/E-kadherīna asi. Cancer cell international, 2020. 20: 1.–14. lpp.
3. Yang, Z., et al., Notch1 signālu pārraide melanomas šūnās veicināja audzēja izraisītu imūnsupresiju, paaugstinot TGF-β1 ekspresiju. Eksperimentālās un klīniskās vēža pētniecības žurnāls, 2018. 37(1): 1.–13. lpp.
4. Wu, C., et al., Neogambogiskā skābe inducē melanomas B16 šūnu apoptozi caur PI3K/Akt/mTOR signālceļu. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): 197.–202. lpp.
5. Meng, L., et al., Ginsenosīda Rg3 pretvēža aktivitāte melanomā, samazinot ERK un Akt ceļu aktivitāti. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): 2069.–2079. lpp.