B16-F10 šūnas - B16-F10 melanomas šūnu līnijas izpēte metastāžu pētniecībā

B16-F10 šūnas ir melanomas šūnu līnija, kas iegūta no C57BL/6J peles. Tās plaši izmanto ādas vēža pētījumos. Pētnieki izmanto šīs šūnas, lai pētītu audzēju attīstību un progresēšanu, kā arī terapeitisko iejaukšanos. Šajā rakstā tiks aplūkoti B16-F10 melanomas šūnu pamataspekti. Īpaši tiks aplūkoti šādi jautājumi:

B16-F10 šūnu līnijas izcelsme un vispārīgās īpašības
Informācija par B16-F10 šūnu kultivēšanu
B16-F10 šūnas: Priekšrocības un trūkumi
B16-F10 šūnu izmantošana pētniecībā
Publikācijas ar B16-F10 šūnu līniju
B16-F10 šūnu līnijas resursi: Protokoli, videomateriāli un citi resursi

1. B16-F10 šūnu līnijas izcelsme un vispārīgas īpašības

Šajā sadaļā sniegts ieskats par B16F10 melanomas audzēja šūnu izcelsmi un raksturīgajām īpašībām. Tā palīdzēs jums efektīvi izmantot šo šūnu līniju savā pētnieciskajā darbā. Galvenokārt jūs uzzināsiet: Kas ir B16-F10 šūnas? No kā ir iegūta B16F10? Kāda ir B16F12 šūnu līnijas morfoloģija? Kāds ir B16F10 šūnu izmērs?

B16-F10 ir no C57BL/6J peļu ādas audiem iegūtas B16 audzēja šūnu līnijas subklons. B16F10 melanomas šūnas tika iegūtas pēc intravenozas B16 līnijas injicēšanas imūnkompromitētām vai sinģeniskām pelēm. Šīs šūnas tika atlasītas, ņemot vērā to potenciālu veidot metastāžu kolonijas plaušās in vivo un pēc tam pēc desmit plaušu koloniju veidošanās cikliem in vitro [1]. To 1976. gadā izstrādāja Fidlers un kolēģi.
B16-F10 šūnu līnijām ir epitēlijveidīgs un vārpveidīgs izskats.
B16-F10 šūnu aptuvenais izmērs ir 15,4 ± 1,4 μm [2].

B16-F1 un B16-F10 šūnas

B16-F1 un B16-F10 šūnas tika iegūtas no B16 cilmes šūnu līnijas. Abas ir cēlušās no viena un tā paša, un tām piemīt gandrīz līdzīgas īpašības. Tomēr galvenā atšķirība ir to metastātiskās spējas. B16-F10 šūnām ir augsts, bet B16-F1 - zems metastatiskais potenciāls [3].

Ļoti palielināts ļaundabīgas melanomas audzēja šķērsgriezums mikroskopā.

2.informācija par B16-F10 šūnu kultivēšanu

Pirms šūnu līnijas apstrādes un kultivēšanas ir jāzina tās dubultošanās laiks, augšanas barotnes, apstākļi un šūnu kultivēšanas protokoli. Šajā sadaļā tiks aplūkots: Kāds ir b16-f10 šūnu dubultošanās laiks? Kā kultivēt B16F10 šūnas? Kāda ir B16-F10 šūnu barotne? Kādi kultivēšanas apstākļi ir ieteicami B16-F10 šūnām?

B16-F10 šūnu kultivēšanas galvenie punkti

Dubultošanās laiks:	B16-F10 šūnu dubultošanās laiks ir aptuveni 20,1 stundas. Atkarībā no kultivēšanas apstākļiem tas var būt no 17 līdz 21 stundai.
Adhēzijas vai suspensijas veidā:	B16-F10 ir adherentu šūnu līnija. Šūnas aug ātri un veido monoslāņus.
Sadalījuma attiecība:	B16-F10 šūnas subkultivē ar dalīšanas attiecību 1:2 līdz 1:4. Šūnas mazgā ar fosfātu buferšķīduma fizioloģisko šķīdumu (1x) un pēc tam inkubē ar Accutase pasāžas šķīdumu 8 līdz 10 minūtes istabas temperatūrā. Šūnām pievieno svaigu barotni un centrifugē. Novākto šūnu granulas atkal resuspendē, un šūnas izkliedē jaunā kolbā ar svaigu barotni atbilstoši sadalīšanas attiecībai.
Augšanas barotne:	B16-F10 šūnas kultivē DMEM barotnē. Šai barotnei pievieno 10 % FBS, 4 mM L-glutamīnu, 1,5 g/L NaHCO3, 4,5 g/L glikozes un 1,0 mM nātrija piruvātu ideālai šūnu augšanai. Barotne jāmaina 2 līdz 3 reizes nedēļā.
Augšanas apstākļi:	B16-F10 šūnas audzē mitrinātā inkubatorā 37 °C temperatūrā ar 5 % CO2 pieplūdi.
Uzglabāšana:	Lai saglabātu šūnu dzīvotspēju, sasaldētas šūnas uzglabā zem -150 °C temperatūrā elektriskajā saldētavā ar īpaši zemu temperatūru vai šķidrā slāpekļa tvaika fāzē.
Saldēšanas process un vide:	B16-F10 šūnas uzglabāšanai sasaldē CM-1 vai CM-ACF barotnē. Šim nolūkam ieteicams lēns sasaldēšanas process, kas ļauj samazināt temperatūru tikai par 1 °C minūtē, lai novērstu šūnu šoku.
Atkausēšanas process:	Sasaldētās B16-F10 šūnas atkausē iepriekš iestatītā 37 °C ūdens vannā 40 līdz 60 sekundes. Pēc tam šūnas pievieno svaigai barotnei un centrifugē, lai atdalītu sasaldēšanas barotnes sastāvdaļas. Savāktās šūnas resuspendē barotnē un ielej kolbās kultivēšanai.
Bioloģiskās drošības līmenis:	B16-F10 šūnu līnijas apstrādei un uzturēšanai nepieciešama 1. bioloģiskās drošības līmeņa laboratorija.

Puskonfluentas B16-F10 šūnas 20x un 10x palielinājumā.

3.b16-F10 šūnas: Priekšrocības un trūkumi

Tāpat kā citām šūnu līnijām, arī B16-F10 ir dažas priekšrocības un trūkumi. Šajā sadaļā ir aplūkoti daži šīs ādas melanomas šūnu līnijas nozīmīgi plusi un mīnusi.

Priekšrocības

B16-F10 šūnu līniju plaši izmanto vēža pētījumos. B16-F10 šūnu priekšrocības ir šādas:

Metastatiskais potenciāls	Ādas melanomas B16F10 šūnām piemīt augsts metastatiskais potenciāls, tāpēc tās ir vērtīgas vēža metastāžu un to pamatā esošo mehānismu pētīšanai.
In vitro audzēja modelis	B16-F10 šūnas kalpo kā in vitro modelis vēža progresēšanas un augšanas izpētei, palīdzot pētniekiem izprast vēzi izraisošos šūnu un molekulāros mehānismus.

Trūkumi

Ar B16-F10 šūnu līniju saistītie trūkumi ir šādi:

No peles atvasināta šūnu līnija

B16-F10 ir peļu izcelsmes šūnu līnija, kas ierobežo tās pielietojamību pētījumos, kas saistīti ar cilvēkiem. Pētījumu rezultāti, kas iegūti no šīm šūnām, ne vienmēr var patiesi attiekties uz cilvēka bioloģiju.

4.b16-F10 šūnu izmantošana pētniecībā

B16-F10 šūnu līniju plaši izmanto vēža pētījumos. Šeit ir aplūkoti daži daudzsološi šīs šūnu līnijas lietojumi.

Vēža pētījumi: B16-F10 šūnu līnija ir vērtīgs modelis vēža šūnu procesu, tostarp proliferācijas, invazijas, migrācijas un šūnu nāves jeb apoptozes, izpētei. Turklāt tā palīdz pētniekiem gūt ieskatu par molekulārajiem mehānismiem un ceļiem, kas nosaka šos šūnu procesus. 2018. gadā veiktajā pētījumā tika pētīta CCR5 (C-C piektā tipa hemokīna receptoru) loma melanomas šūnu epitēlija pārejā no epitēlija uz mezenhimālajām šūnām un metastāzēšanā. Iegūtie rezultāti atklāja, ka CCR5 deficīts ierobežo audzēja augšanu un metastāžu veidošanos, savukārt augsta ekspresija izraisa pastiprinātu B16-F10 šūnu augšanu un metastāžu veidošanos. Turpmākajos pētījumos tika ziņots, ka CCR5 regulē TGFβ1 ekspresiju, kas regulē PI3K/AKT/GSK3β signalizāciju, lai veicinātu epitēlija pāreju no epitēlija uz mezenhīmu un šūnu migrāciju [4].
Zāļu testēšana un izstrāde: B16F10 melanomas audzēja šūnas ir ļoti agresīvas, tāpēc tās ir piemērotas potenciālo pretvēža zāļu un ārstēšanas līdzekļu testēšanai. Pētnieki izmanto šīs šūnas un novērtē dažādu savienojumu ietekmi uz šūnu augšanu, proliferāciju un metastāžu veidošanos, palīdzot zāļu izstrādē. Valentina Nanni un kolēģu 2018. gadā veiktajā pētījumā tika pētīta Spartium junceum ziedu hidroalkoholiskā ekstrakta terapeitiskā iedarbība. Pētījumā tika ierosināts, ka ziedu ekstrakts efektīvi inducē senescenci B16-F10 šūnās, kas izraisa šūnu augšanu un melanogēzes nomākšanu, tādējādi tas var radīt potenciālu pretvēža darbību [5].

430,00 €*

Saturs: 1.5 milliliter

Cenas bez nodokļiem un piegādes izmaksām

cryovial

Produkta numurs: 305157

5.publikācijas ar B16-F10 šūnu līniju

Šeit ir dažas nozīmīgas pētniecības publikācijas, kurās izmantota melanomas šūnu līnija B16-F10:

Sorghum bicolor etanola ekstrakta pretmelanogēnā iedarbība uz IBMX inducētu melanogēnozes procesu B16/F10 melanomas šūnās

Šis pētījums publicēts žurnālā Nutrients (2020). Tajā tika ierosināts, ka Sorghum bicolor etanol ekstraktam ir pretmelanogēna iedarbība uz ādas melanomas B16F10 šūnām.

Kalcitriols kavē proliferāciju un potenciāli izraisa apoptozi B16-F10 šūnās

Pētījumā, kas publicēts Medical Science Monitor Basic Research (2022), ierosināts, ka kalcitriola zāles iedarbojas pretvēža iedarbībā uz melanomas B16-F10 šūnām, kavējot proliferāciju un inducējot apoptozi.

Kardolu prooksidatīvais efekts ir saistīts ar to citotoksisko aktivitāti pret pelēkās B16-F10 melanomas šūnām

Šis raksts publicēts žurnālā Biochemical and Biophysical Research Communications (2022). Pētījuma rezultāti atklāja, ka kardoliem, rezorcinola lipīdiem, ir intensīva citotoksicitāte pret B16-F10 šūnu līniju.

Ginkgo biloba eksokarpa ekstrakts inhibē B16-F10 melanomas metastāzes, iesaistot PI3K/akt/NF-κB/MMP-9 signalizācijas ceļu

Pētījumā, kas publicēts žurnālā Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018), tika pētīts ginka biloba eksokarpa ekstrakta antimetastatiskais potenciāls, izmantojot B16-F10 šūnas.

Timohinons izraisa apoptozi B16-F10 melanomas šūnās, inhibējot p-STAT3, un kavē audzēja augšanu mātītes intracerebrālās melanomas ..

Šajā pētījumā, kas publicēts World Neurosurgery (2018), ierosināts, ka timohinons var būt efektīva terapija pret intracerebrāliem metastātiskiem bojājumiem, jo tas nomāc B16-F10 šūnu augšanu un inducē apoptozi.

6.b16-F10 šūnu līnijas resursi: B1616 F16 resursu avoti: protokoli, videoklipi un citi resursi

B16F10 endotēlija šūnas plaši izmanto ādas vēža pētījumos. Šeit ir daži tiešsaistes resursi, kuros izskaidroti tās kultivēšanas un transfekcijas protokoli:

B16F10 melanomas šūnu transfekcija: B16-F10 melanomas šūnu transfekcijas protokols: Šis video pamācības materiāls palīdzēs apgūt B16-F10 šūnu transfekcijas protokolu.
B16-F10 transfekcija: Šajā dokumentā ir izskaidrots ādas melanomas B16F10 šūnu DNS transfekcijas protokols in vitro.

Šajā saitē ir iekļauts šūnu kultūras protokols B16-F10 šūnām:

B16-F10 subkulturēšana: Šajā tīmekļa vietnē ir sniegta noderīga informācija par melanomas B16F10 audzēja šūnām. Tā ietver barotnes, dubultošanās laiku, šūnu subkulturēšanas nosacījumus un protokolu, kā arī rīcību ar kriokonservētām un proliferatīvām kultūrām.

Atsauces

Poste, G., et al., B16 melanomas klonu, kas izolēti no kultivētām šūnu līnijām, zemādas audzējiem un atsevišķām plaušu metastāzēm, metastātisko īpašību salīdzinājums. Cancer Research, 1982. 42(7): p. 2770-2778.
Nakamura, M., D. Ono un S. Sugita, B16 melanomas šūnu variantu mehānfenotipizēšana, lai novērtētu (-)-epigalokatehīna galāta iedarbīgumu, izmantojot konusveida mikrofluidisku ierīci. Micromachines, 2019. 10(3): p. 207.
Danciu, C., et al. četru dažādu B16 murgas melanomas šūnu apakšlīniju uzvedība: C57BL/6J ādas. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): p. 73-80.
Liu, J., et al., High expression of CCR5 in melanoma enhances epithelial-mesenchymal transition and metastasis via TGFβ1. The Journal of Pathology, 2019. 247(4): p. 481-493.
Nanni, V., et al., Hydroalcoholic extract of Spartium junceum L. flowers inhibits growth and melanogenesis in B16-F10 cells by inducing senescence. Phytomedicine, 2018. 46: p. 1-10.