AGS šūnas - kuņģa adenokarcinomas AGS šūnu izpēte vēža pētījumos

AGS šūnas ir cilvēka kuņģa adenokarcinomas šūnu līnija, ko plaši izmanto biomedicīnas pētījumos. Jo īpaši to izmanto kuņģa vēža bioloģijas, tostarp audzēja augšanas, attīstības, progresēšanas un terapeitiskās iejaukšanās pētījumu veikšanai. Turklāt to izmanto, lai pētītu saimnieka un patogēna mijiedarbību.

Šajā rakstā tiks apskatīti kuņģa epitēlija AGS šūnu pamati. Īpaši tiks aplūkoti šādi jautājumi:

AGS šūnu vispārīgās īpašības un izcelsme
Informācija par AGS šūnu līnijas kultivēšanu
AGS šūnu līnija: Priekšrocības un ierobežojumi
AGS šūnu lietojumi
Pētniecības publikācijas par AGS šūnu līniju
AGS šūnu līnijas resursi: Protokoli, videomateriāli un citi AGS AGS resursi

1.aGS šūnu vispārīgās īpašības un izcelsme

Pirms sākat strādāt ar šūnu līniju, ir jāzina tās izcelsme un vispārīgās īpašības. Šajā sadaļā tiks aplūkoti šādi jautājumi: Kas ir AGS šūnas? Kāda ir AGS šūnu izcelsme? Kāda ir AGS vēža šūnu līnijas morfoloģija?

AGS šūnu līnija tika iegūta no 54 gadus vecas baltādainas sievietes kuņģa audiem ar kuņģa adenokarcinomu. Tā tika izdalīta 1979. gadā [1].
AGS šūnām ir epitēlijam līdzīga morfoloģija.
Kuņģa epitēlija AGS šūnas ir hiperdiploīdas. AGS šūnu modālais hromosomu skaits ir 49, kas sastopams gandrīz 60 % šūnu. Aptuveni 3,6 % šūnu ir arī poliploīdas.

Kuņģa karcinoma šķērsgriezumā zem mikroskopa.

2.informācija par AGS šūnu līnijas kultivēšanu

Lai pareizi rīkotos ar šūnu līniju un to pārvaldītu, jums jāzina tās kultivēšanas pamatjēdzieni. Jo īpaši jums jāzina: Kāds ir AGS šūnu dubultošanās laiks? Kas ir AGS šūnu barotne? Kā subkulturēt AGS šūnas? Kādas sasaldēšanas barotnes izmanto kuņģa epitēlija AGS šūnām?

AGS šūnu kultivēšanas galvenie punkti

Dubultošanās laiks:	AGS šūnu dubultošanās laiks ir no 24 līdz 48 stundām.
Adhēzijas vai suspensijas veidā:	AGS šūnas ir adherentas. Tās aug monoslānī.
Sēšanas blīvums:	AGS šūnas izsēj ar šūnu blīvumu 1 x¹⁰⁴ ^šūnas/cm2. Šādā blīvumā šūnas veido saplūstošu monoslāni 3 līdz 5 dienu laikā. Pēc vecās barotnes izņemšanas šūnas skalo ar 1 x PBS un inkubē ar Accutase disociācijas šķīdumu. Atdalītās šūnas resuspendē barotnē un centrifugē. Šūnu pelīti atkal resuspendēja, un pēc AGS šūnu saskaitīšanas tās iepilda jaunā kolbā audzēšanai.
Augšanas barotne:	AGS šūnu kultivēšanai izmanto DMEM barotni, kas satur 10 % FBS, 4 mM L-glutamīnu, 4,5 g/l glikozes, 1,5 g/l NaHCO3 un 1,0 mM nātrija piruvātu. Barotne jāmaina 2 līdz 3 reizes nedēļā.
Augšanas apstākļi:	AGS šūnas tur mitrinātā inkubatorā (37 °C temperatūrā) ar 5 % CO2 pieplūdi.
Uzglabāšana:	Saldētas AGS šūnas ilgāku laiku glabā elektriskās saldētavās temperatūrā zem -150 °C vai šķidrā slāpekļa tvaika fāzē.
Sasaldēšanas process un vide:	AGS šūnu sasaldēšanai izmanto CM-1 vai CM-ACF barotni. Šūnu sasaldēšana notiek lēnā sasaldēšanas procesā, kas pieļauj tikai 1 °C temperatūras kritumu minūtē un aizsargā šūnu dzīvotspēju.
Atkausēšanas process:	Sasaldētās kuņģa epitēlija šūnas strauji sakrata 37 °C ūdens vannā 40 līdz 60 sekundes. Atkausētās šūnas resuspendē svaigā barotnē un ielej jaunās kolbās audzēšanai. Pēc 24 stundu inkubācijas barotni atjauno, lai no tās noņemtu sasalstošās barotnes sastāvdaļas. Pretēji tam atkausētās šūnas centrifugē, un sasaldēšanas barotnes elementi tiek noņemti. Pēc tam novāktās šūnas atkal resuspendē un iepilda kolbā ar barotni.
Bioloģiskās drošības līmenis:	AGS šūnu kultivēšanai ir svarīgi 2. bioloģiskās drošības līmeņa laboratorijas apstākļi.

AGS šūnas 20x palielinājumā.

3.aGS šūnu līnija: Priekšrocības un ierobežojumi

Šajā raksta sadaļā tiks izskaidrotas dažas galvenās priekšrocības un ierobežojumi, kas saistīti ar AGS šūnām.

Priekšrocības

Kuņģa epitēlija AGS šūnu galvenās priekšrocības ir šādas:

Viegli kultivējamas	AGS kuņģa karcinomas šūnu līniju ir viegli uzturēt šūnu kultūru laboratorijās. Tai nav sarežģītu un sarežģītu prasību attiecībā uz šūnu kultivēšanu. Turklāt tai piemīt labas augšanas īpašības, tāpēc tā ir ideāla izvēle kuņģa vēža bioloģijas pētījumiem.
Saistība ar kuņģa vēzi	AGS šūnas ir iegūtas no cilvēka kuņģa adenokarcinomas, tāpēc tās plaši izmanto kuņģa karcinomas bioloģijas un terapeitiskās iejaukšanās pētījumiem.

Ierobežojumi

Ar AGS šūnu līniju ir saistīti šādi ierobežojumi:

In vitro šūnu modelis

AGS šūnas kultivē biomedicīnisko pētījumu laboratorijās mākslīgos apstākļos. Tāpēc tās var pilnībā neatdarināt kuņģa vēža mikrovidi in vivo un citas šūnu un molekulārās mijiedarbības.

4.aGS šūnu lietojumi

AGS šūnas tiek īpaši izmantotas kuņģa vēža bioloģijas izpētei. Tām ir daudz citu daudzsološu pielietojumu biomedicīnas jomā. Daži no interesantākajiem AGS šūnu pētniecības lietojumiem ir šādi:

Kuņģa vēža izpēte: AGS šūnas ir lielisks pētniecības rīks, lai pētītu kuņģa vēža augšanas, metastāžu un invazijas šūnu un molekulāros mehānismus. Pētnieki izmanto arī kuņģa epitēlija AGS šūnas, lai pētītu dažādus šūnu procesus, ģenētiskās mutācijas un signalizācijas ceļus kuņģa vēža attīstībā. Oncology Reports (2019) pētījumā konstatēts, ka mikroRNA-183-5p.1 veicina audzēja šūnu proliferāciju, migrāciju un invaziju, kavējot Bcl 2/P53 signalizācijas kaskādi. Turklāt tā arī pazemina TPM1 gēna regulāciju, lai radītu šo ietekmi. Tādējādi gan mikro RNS, gan TPM1 tiek uzskatīti par efektīviem molekulāriem mērķiem mērķtiecīgas pret kuņģa vēzi vērstas terapijas izstrādei [2].
Zāļu skrīnings: AGS šūnas parasti izmanto jaunu un efektīvu pret kuņģa vēzi vērstu zāļu skrīningam. Pētnieki novērtē potenciālo zāļu citotoksicitāti un efektivitāti, izmantojot AGS šūnu līniju. Ir veikti arī pētījumi par jaunu molekulāro mērķu identificēšanu un jaunu mērķterapiju izstrādi kuņģa karcinomu apkarošanai. 2021. gadā veiktajos pētījumos tika izmantotas AGS kuņģa vēža šūnas un pētīta paklitaksela zāļu terapeitiskā iedarbība. Rezultāti atklāja, ka paklitaksels izraisa mitotisko katastrofu, kas ir neatņemams apoptozes jeb šūnu nāves mehānisms AGS šūnās. Turklāt tas veicināja arī kuņģa vēža šūnu autofagiju [3].
Saimnieka un patogēna mijiedarbība: AGS vēža šūnu līnijā tiek pētīta arī saimnieka un patogēna mijiedarbība. Tas palīdz pētniekiem izprast šūnu mehānismus un reakcijas, kas saistītas ar infekciju. Piemēram, 2020. gadā veiktajā pētījumā novērots, ka Helicobacter pylori ārējās membrānas vezikulās esošās mazās nekodējošās RNS samazina interleikīna 8 sekrēciju cilvēka AGS šūnās [4].

430,00 €*

Saturs: 1.5 milliliter

Cenas bez nodokļiem un piegādes izmaksām

cryovial

Produkta numurs: 300408

5.pētniecības publikācijas par AGS šūnu līniju

Šajā raksta sadaļā tiks aplūkotas dažas interesantas un visvairāk citētās pētnieciskās publikācijas, kurās izmantotas AGS šūnas.

Salidrozīds inducē apoptozi un aizsargājošu autofagiju cilvēka kuņģa vēža AGS šūnās, izmantojot PI3K/Akt/mTOR ceļu

Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā Biomedicine & Pharmacotherapy (2020), ierosināts, ka dabīgs savienojums salidrozīds izraisa aizsargājošu autofāziju un šūnu nāvi kuņģa epitēlija AGS šūnās, modulējot PI3K/AKT/mTOR signalizācijas ceļu.

Astragalus polisaharīds pastiprināja apatinibu pretvēža iedarbību kuņģa vēža AGS šūnās, inhibējot AKT signalizācijas ceļu

Šis pētījums publicēts žurnālā Biomedicine & Pharmacotherapy (2018). Tajā tika pētīta astragalus polisaharīda un apatinila zāļu sinerģiskā pretvēža iedarbība AGS šūnās. Pētījuma rezultāti atklāja, ka astragalus pastiprina apatinibu pretvēža iedarbību, nomācot AKT signalizāciju.

Curcuzedoalīds veicina Curcuma zedoaria sakneņu citotoksicitāti pret cilvēka kuņģa vēža AGS šūnām, inducējot apoptozi

Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā Journal of Ethnopharmacology (2018), ierosināts, ka curcuzedoalīds, dabisks savienojums no auga Curcuma zedoaria Roscoe, veicina tā citotoksicitātes potenciālu pret AGS šūnām.

FOXA1 pārmērīga ekspresija kavē cilvēka kuņģa vēža AGS šūnu šūnu proliferāciju un EMT

Šajā publikācijā žurnālā Gene (2018) ierosināts, ka FOXA1 augšējā regulācija nomāc kuņģa adenokarcinomas AGS šūnu proliferāciju un epitēlija pāreju no epitēlija uz mezenhīmu (EMT) un invazi.

helicobacter pylori ārējās membrānas vezikulu iepakotās sncRNA vājina IL-8 sekrēciju cilvēka šūnās

Šis pētnieciskais raksts tika publicēts žurnālā International Journal of Medical Microbiology 2020. gadā. Šajā pētījumā saimnieka un patogēna mijiedarbības izpētei tika izmantotas AGS šūnas. Rezultāti atklāja, ka Helicobacter pylori ārējās membrānas vezikulās satur dažas nekodējošas RNS, kas ietekmē IL-8 līmeni AGS šūnās.

6.aGS šūnu līnijas resursi: A AGS AGS resursu avoti: protokoli, videoklipi un citi materiāli

Turpmāk ir sniegti daži resursi, kuros aprakstītas AGS šūnas.

AGS šūnu transfekcijas protokols: Šis video ir pakāpenisks ceļvedis kuņģa epitēlija AGS šūnu transfekcijas protokola apgūšanai.

Šajā saitē ir sniegts AGS šūnu audzēšanas protokols.

AGS šūnu audzēšanas protokols: Šajā tīmekļa vietnē ir noderīga informācija par AGS šūnu barotnēm un šūnu kultūru protokoliem. Īsumā tajā ir sniegts kuņģa epitēlija AGS šūnu subkulturēšanas protokols, kā arī informācija par proliferējošu un kriokonservētu AGS kultūru apstrādi.
AGS šūnu subkultivēšana: Šajā vietnē ir sīki izskaidrota AGS šūnu subkulturēšanas procedūra.

Atsauces

Phuc, B.H., et al., Divu Vjetnamas Helicobacter pylori celmu salīdzinošā genomika: CHC155 no pacienta ar kuņģa vēzi, kas nav kardioze, un VN1291 no pacienta ar divpadsmitpirkstu zarnas čūlu. Scientific Reports, 2023. 13(1): p. 8869.
Lin, J., et al., miRNA-183-5p. 1 veicina kuņģa vēža AGS šūnu migrāciju un invāziju, mērķējot uz TPM1 Corrigendum in/10.3892/or. 2020.7902. Oncology reports, 2019. 42(6): p. 2371-2381.
Khing, T.M., et al., Paklitaksela ietekme uz apoptozi, autofāziju un mitotisko katastrofu AGS šūnās. Scientific Reports, 2021. 11(1): p. 23490.
Zhang, H., et al., sncRNAs packaged by Helicobacter pylori outer membrane vesicles attenuate IL-8 secretion in human cells. International Journal of Medical Microbiology, 2020. 310(1): p. 151356.