A375 šūnu līnija - ceļvedis melanomas izpētē

A375 ir cilvēka melanomas šūnu līnija, ko plaši izmanto toksikoloģijas un imūnonkoloģijas pētījumos. Pētnieki izmanto šo šūnu līniju, lai pētītu vēža bioloģiju un signalizācijas ceļus, testētu vai pārbaudītu potenciālos pretvēža līdzekļus un izstrādātu jaunas un efektīvas terapijas.

A375 šūnu izcelsme un vispārīgās īpašības

Zināšanas par šūnu līnijas izcelsmi un vispārējām īpašībām var palīdzēt plānot tās izmantošanu pētniecībā. Šajā raksta sadaļā tiks aplūkota A375 šūnu līnijas izcelsme un īpašības. Piemēram, kas ir A375 šūnu līnija? Kādas ir A375 šūnu līnijas īpašības? No kurienes nāk A375 šūnas? Kāda ir A375 melanomas šūnu morfoloģija? Kāds ir A375 šūnu izmērs?

Ādas vēža šūnu līnija A375 ir iegūta no 54 gadus vecas sievietes ar ļaundabīgu melanomu [1].
A375 šūnām ir epitēlijam līdzīga morfoloģija.
Salīdzinājumā ar citām šūnu līnijām A375 šūnu izmērs ir salīdzinoši mazāks. To diametrs ir aptuveni 12 µm.
A375 melanomas šūnas ir hipotriploīdas. Modālais hromosomu skaits šai šūnu līnijai ir 62. Parasti katrai šūnai ir deviņas marķieru hromosomas un pa vienai normālo N2, N6 un N22 hromosomu kopijai.

Ārsts pārbauda, vai uz pieaugušo ādas nav ādas vēža veidojumu.

A375 šūnas: Informācija par šūnu kultūru

A375 šūnu kultūras ir viegli kopjamas. Tām nav nekādu pārgalvīgu prasību attiecībā uz šūnu kultūrām. Šī iedaļa palīdzēs jums uzzināt nepieciešamo informāciju par šūnu kultūrām. Piemēram, kāds ir A375 dubultošanās laiks. Kāda ir A375 šūnu līnijas barotne? Kāds ir A375 izsējas blīvums? Vai A375 melanomas šūnas ir adherentas?

A375 šūnu kultivēšanas galvenie punkti

Populācijas dubultošanās laiks:	A375 divkāršošanās laiks ir 20 stundas.
Adhēzijas vai suspensijas veidā:	A375 ir adherenta cilvēka melanomas šūnu līnija.
Sēšanas blīvums:	^šūnublīvums: 1 x¹⁰⁴ šūnas/cm2 ir ideāls A375 šūnu kultūrām. Adherētās šūnas skalo ar 1 x fosfātu buferšķīduma fizioloģisko šķīdumu (PBS) un inkubē ar pasāžas šķīdumu (Accutase). Pēc tam šūnām pievieno barotni un centrifugē. Novāktās šūnas resuspendēja barotnē un iepildīja jaunās kolbās audzēšanai.
Augšanas barotne:	DMEM ir ieteicama kā ideāla A375 barotne, ja tā papildināta ar 10 % fetālā liellopu seruma (FBS), 4,5 g/l glikozes, 1,5 g/l NaHCO3, 4 mM L-glutamīna un 1,0 mM nātrija piruvāta. A375 barotne jāatjauno 2-3 dienas nedēļā.
Augšanas apstākļi:	A375 melanomas šūnas audzē mitrinātā inkubatorā (37 °C) ar 5 % CO2 pieplūdi.
Uzglabāšana:	Saldētas A375 šūnas jāuzglabā zem -150°C šķidrā slāpekļa tvaika fāzē vai elektriskā saldētavā.
Sasaldēšanas process un vide:	A375 šūnu līnijas sasaldēšanai izmanto CM-1 vai CM-ACF barotni. Lai aizsargātu šūnu dzīvotspēju, ir izvēlēts lēns sasaldēšanas process, kas ļauj pakāpeniski pazemināt temperatūru par 1 °C.
Atkausēšanas process:	Sasaldēto A375 melanomas šūnu flakonu strauji maisīja ūdens vannā 40 līdz 60 sekundes, līdz palika tikai neliels ledus gabaliņš. Šūnām pievieno svaigu barotni un centrifugē, lai atdalītu sasalstošās barotnes elementus. Iegūto šūnu granulu atkal resuspendē un ielej jaunās kolbās.
Bioloģiskās drošības līmenis:	A375 kultūras apstrādā un uztur 1. bioloģiskās drošības līmeņa laboratorijas apstākļos.

Konfluentais adhēdušo A375 šūnu slānis 20x palielinājumā.

A375 šūnu līnijas priekšrocības un ierobežojumi

Tāpat kā citām šūnu līnijām, arī A375 melanomas šūnu līnijai ir unikāla priekšrocību un ierobežojumu kombinācija, kas padara to par vērtīgu līdzekli melanomas vēža pētniecībā. Šajā iedaļā ir uzskaitīti tikai daži nozīmīgi A375 šūnu līnijas plusi un mīnusi.

Priekšrocības

Turpmāk ir minētas A375 šūnu būtiskākās priekšrocības:

Melanomas audzēja modelis: A375 šūnu līnija ir iegūta no ļaundabīgas melanomas audzēja, tādējādi kalpojot par nenovērtējamu audzēja modeli melanomas bioloģijas un terapeitiskās iejaukšanās pētījumiem. Šīm šūnām piemīt melanomai līdzīgas īpašības, piemēram, augsts proliferācijas ātrums un invazivitāte.
Tumorigenitāte: A375 šūnas ir ļoti tumorigēnas, t. i., tās var veidot audzējus. Ir ziņots, ka A375 šūnas veido agresīvas amelanotiskas melanomas NIH Šveices pelēm, kas apstrādātas ar antitimocītu serumu (imūnsistēmu nomācošs līdzeklis).
Labi raksturotas: A375 ir ģenētiski labi raksturota šūnu līnija. Tai piemīt specifiskas ģenētiskas mutācijas, piemēram, melanomai. A375 mutācijas ietver A375 BRAF gēna izmaiņas, kas padara to jutīgu pret BRAF specifiskiem inhibitoriem. Tādējādi šis ģenētiskais profils padara A375 šūnas par lielisku vēža izpētes instrumentu, lai pētītu pamatā esošos molekulāros ceļus un mērķtiecīgas terapijas.

Ierobežojumi

Ar A375 šūnām saistītie ierobežojumi ir šādi:

Ierobežojumi in vitro: A375 ir in vitro audzēja modelis. Lai gan tas atdarina melanomas īpašības, tas nevar pilnībā atspoguļot melanomas audzēju sarežģītību. Tāpēc, kad in vitro iegūtie rezultāti tiek attiecināti uz klīniskajiem pētījumiem, ir jāievēro piesardzība.

Iegādājieties A375 šūnas tagad

430,00 €*

Saturs: 1.5 milliliter

Cenas bez nodokļiem un piegādes izmaksām

cryovial

Produkta numurs: 300110

A375 šūnu līnijas izmantošana pētniecībā

A375 šūnu līnija tiek plaši izmantota vēža pētījumos. Šeit ir dažas no izplatītākajām jomām, kurās izmanto A375 šūnas.

Vēža pētījumi: A375 šūnas plaši izmanto melanomas pētījumos. Pētnieki izmanto šīs šūnas, lai pētītu ādas vēža bioloģiju, procesus un pamatā esošos šūnu signalizācijas mehānismus, tostarp šūnu proliferāciju, migrāciju un invāziju. Tas var arī palīdzēt pētniekiem noteikt jaunus molekulārus terapeitiskus mērķus. Lin Zhu un kolēģu 2019. gadā veiktajā pētījumā tika izmantotas ļoti agresīvas melanomas A375 šūnas un atklāta mikroRNA-3662 loma A375 melanomas šūnu augšanā un invadēšanā. Pētījuma secinājumos norādīts, ka mikroRNS-3662 ir vērsta pret ZEB1 gēnu un regulē melanomas šūnu augšanu in vitro un in vivo A375 audzēja modelī [2]. Tāpat 2018. gadā veiktajā pētījumā konstatēts, ka PI3K/AKT un MAPK/ERK ceļi ir iesaistīti A375 šūnu līnijas proliferācijā un metastāzēšanā [3].
Zāļu atklāšana un testēšana: A375 šūnu līnija ir noderīgs in vitro audzēja modelis potenciālo pretvēža līdzekļu testēšanai un skrīningam. Pētnieki, izmantojot šīs A375 melanomas šūnas, novērtē jaunu ķīmijterapeitisko zāļu, savienojumu un citu terapiju toksicitāti un efektivitāti. Piemēram, pētījumā tika pētītas greipfrūtu izcelsmes mikro un nanoveikulu pretvēža īpašības uz A375 cilvēka melanomas vēža šūnām. Rezultāti atklāja, ka mikro un nanovsikulas izraisa šūnu cikla apstāšanos un apoptozi un kavē gēnu ekspresiju šūnu proliferācijā, migrācijā un invadīcijā [4].

A375 šūnas: Publikācijas

Šeit ir minētas dažas nozīmīgas pētniecības publikācijas par A375 šūnām.

D vitamīns un tā mazkalcēmiskie analogi modulē cisplatīna un dakarbazīna pretvēža īpašības cilvēka melanomas A375 šūnu līnijā

Šis pētījums tika publicēts žurnālā Journal of Oncology 2019. gadā. Pētījumā tika ierosināts, ka līdztekus ārstēšanai ar D vitamīnu un tā analogiem uzlabojas cisplatīna un dakarbazīna pretvēža aktivitāte A375 melanomas šūnās.

Atsevišķu alvejas sugu gēla un veselu lapu ekstraktu pretmelanomas iedarbības in vitro novērtējums (A375 šūnu līnija)

Šis pētījums tika publicēts žurnālā Journal of Herbal Medicine 2022. gadā. Šajā pētījumā tika pētīta alvejas gela pretmelanoma iedarbība uz A375 melanomas šūnām.

Fermitīna 2. ģimenes loceklis veicina melanomas progresēšanu, pastiprinot p-α-Pix saistīšanos ar Rac1, lai aktivizētu MAPK ceļu

Šajā Oncogene (2021) publicētajā pētījumā ierosināts, ka 2. fermitīna ģimenes loceklis (FERMT2 jeb kindlin-2) veicina melanomas progresēšanu, aktivizējot MAPK, saistoties ar p-α-Pix un Rac1.

FARP1 veicina šūnu proliferāciju, modulējot MAPK signalizācijas ceļu ādas melanomā

Šajā pētījumā žurnālā The American Journal of Dermatopathology (2019) tika ierosināts, ka FARP1 var veicināt ādas melanomas attīstību un progresēšanu. Tādējādi tas var būt noderīgs terapeitiskais mērķis.

Phyllodium elegans ekstraktu citotoksiskais un apoptozes potenciāls uz cilvēka vēža šūnu līnijām

Šis pētnieciskais raksts publicēts žurnālā Bioengineered (2019). Šajā pētījumā tika pētīta auga Phyllodium elegans ekstrakta citotoksiskā un apoptozes aktivitāte uz cilvēka karcinomas šūnu līnijām, tostarp A375.

A375 šūnu līnijas resursi: Protokoli, videomateriāli un citi resursi

Turpmāk ir sniegti daži tiešsaistes resursi, kuros aprakstītas A375 šūnas.

A375 šūnu transfekcija: Šī video pamācība palīdzēs jums soli pa solim apgūt A375 šūnu transfekciju.
Šūnu kultivēšana: Šajā video ir ļoti noderīga informācija par šūnu līniju kultivēšanu.

A375 šūnu šūnu kultivēšanas protokoli ir uzskaitīti šeit.

A375 šūnu līnija: Šajā saitē ir noderīga informācija par A375 šūnu līnijas kultivēšanu un uzturēšanu, tostarp par A375 barotnēm un darbībām ar sasaldētām un proliferējošām A375 kultūrām.

Biežāk uzdotie jautājumi par A375 šūnām

Atsauces

Avram, S., et al., A375 cilvēka melanomas modeļu standartizācija uz vistas embriju horeioalantoiskās membrānas un Balb/c nude pelēm. Oncol Rep, 2017. 38(1): p. 89-99.
Zhu, L., et al., MicroRNA-3662 target ZEB1 and attenuates the invasion of the highly aggressive melanoma cell line A375. Cancer Manag Res, 2019. 11: p. 5845-5856.
Peng, X., et al., Oxyfadichalcone C inhibits melanoma A375 cell proliferation and metastasis via supressing PI3K/Akt and MAPK/ERK pathways. Life sciences, 2018. 206: p. 35-44.
Stanly, C., et al., Grapefruit-derived micro and nanovesicles show different metabolome profiles and anticancer activities in the A375 human melanoma cell line. Cells, 2020. 9(12): p. 2722.