NG108-15 Cells

DMEM (Dulbekko modificētā Eagle barotne) ir ļoti universāla un plaši izmantota bāzes barotne, kas paredzēta dažādu zīdītāju šūnu augšanai bioloģiskajos pētījumos. Tā ir ideāla barotne primāro fibroblastu, neironu, glijas šūnu, HUVEC, gludās muskulatūras šūnu, kā arī tādu populāru šūnu līniju kā HeLa, 293, Cos-7 un PC-12 kultivēšanai.
DMEM atšķiras no citām barotnēm ar unikālu sastāvu. Tā satur iespaidīgu četrkāršu aminoskābju un vitamīnu koncentrācijas palielinājumu, salīdzinot ar oriģinālo Eagle's Minimal Essential Medium. Sākotnēji DMEM tika izstrādāta ar zemu glikozes (1 g/l) un nātrija piruvāta saturu, bet tagad to bieži izmanto ar augstāku glikozes saturu, ar nātrija piruvātu vai bez tā. DMEM nesatur olbaltumvielas, lipīdus vai augšanas faktorus, tāpēc to nepieciešams papildināt. Lai panāktu optimālu augšanu, DMEM parasti papildina ar 10 % liellopu fetālā seruma (FBS). Turklāt DMEM izmanto nātrija bikarbonāta bufera sistēmu, un, lai uzturētu fizioloģisku pH, ir nepieciešama 5-10 % CO2 vide.
Dulbekko modificētā Ērgļa barotne (DMEM) ir augsti novērtēta kā noteikta šūnu un audu kultūru barotne, kas apmierina dažādu adherējošu šūnu fenotipu augšanas vajadzības. Tā pārspēj oriģinālo Ērgļa barotni, kas tika izstrādāta pagājušā gadsimta 50. gados vistas šūnu kultivēšanai, pateicoties uzlabotam papildu sastāvam, kas pazīstams kā Dulbekko modifikācija. Šī modifikācija ievērojami palielina atsevišķu aminoskābju un vitamīnu saturu līdz pat četrām reizēm, salīdzinot ar oriģinālo barotni.
Šūnu kultūru jomā DMEM ir būtiska nozīme kā dažādu šūnu tipu, tostarp primāro šūnu, cilmes šūnu un transformētu šūnu, augšanas barotnei. Pētnieki izmanto modificēto DMEM versiju arī dažādiem pētījumiem, piemēram, zāļu atklāšanai, audu inženierijai un šūnu signalizācijas ceļu izpētei.

Kvalitātes kontrole

Sterili filtrēts


Uzglabāšana un derīguma termiņš

Uzglabāt no gaismas pasargātā +2°C līdz +8°C temperatūrā.
Pēc atvēršanas uzglabāt 4°C temperatūrā un izmantot 6-8 nedēļu laikā.


Pārvadāšanas nosacījumi

Apkārtējā temperatūra


Uzturēšana

Uzglabāt ledusskapī no +2°C līdz +8°C temperatūrā, tumsā. Izvairīties no sasaldēšanas un biežas sasilšanas līdz +37°C, jo tas samazina produkta kvalitāti.
Nesildiet barotni augstāk par 37°C un neizmantojiet nekontrolētus siltuma avotus, piemēram, mikroviļņu krāsnis.
Ja jāizmanto tikai daļa barotnes, pirms lietošanas izņemiet nepieciešamo daudzumu un uzsildiet to līdz istabas temperatūrai.


Sastāvs



Kategorija
Sastāvdaļas
Koncentrācija (mg/l)


Aminoskābes
Glicīns
30.00



L-arginīns HCl
84.00



L-cistīns 2 HCl
62.57



L-glutamīns
584.00



L-Histidīns HClH2O
42.00



L-izoleicīns
105.00



L-leicīns
105.00



L-lizīns HCl
146.00



L-metionīns
30.00



L-fenilalanīns
66.00



L-serīns
42.00



L-treonīns
95.00



L-triptofāns
16.00



L-tirozīns 2 Na 2H2O
103.79



L-valīns
94.00


Vitamīni
Holīna hlorīds
4.00



D-kalcija pantotenāts
4.00



Folijskābe
4.00



mio-Inozitols
7.20



Nikotīnamīds
4.00



Piridoksāls HCl
4.00



Riboflavīns
0.40



Tiamīna HCl
4.00


Neorganiskie sāļi
CaCl2 2H2O
265.00



Fe(NO3)3 9H2O
0.10



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
200.10



NaCl
6400.00



NaHCO3
3700.00



NaH2PO4 2H2O
141.73


Citi komponenti
D-glikoze
4500.00



Fenola sarkanais nātrija sāls
15.90



Nātrija piruvāts
110.00

Accutase šūnu disociācijas reaģents
- maiga alternatīva tripsīnam
Accutase ir šūnu atdalīšanas šķīdums, kas izraisa revolūciju šūnu kultūru nozarē. Tas ir proteolītisko un kolagenolītisko fermentu maisījums, kas imitē tripsīna un kolagenāzes darbību. Atšķirībā no tripsīna Accutase nesatur zīdītāju vai baktēriju komponentus un ir daudz saudzīgāks pret šūnām, padarot to par ideālu risinājumu šūnu atdalīšanai no standarta audu kultūru plastmasas traukiem un ar adhēziju pārklātiem plastmasas traukiem. Šajā bloga ierakstā mēs aplūkosim Accutase priekšrocības un lietojumu, kā arī to, kā tā maina situāciju šūnu kultūru jomā.
Accutase priekšrocības
Accutase ir vairākas priekšrocības salīdzinājumā ar tradicionālajiem tripsīna šķīdumiem. Pirmkārt, to var izmantot vienmēr, kad nepieciešama saudzīga un efektīva adhēzijas šūnu līnijas atdalīšana, tādējādi tā ir tiešs tripsīna aizstājējs. Otrkārt, Accutase ļoti labi iedarbojas uz embrionālajām un neironu cilmes šūnām, un ir pierādīts, ka tā saglabā šo šūnu dzīvotspēju pēc pasāžas. Treškārt, Accutase saglabā lielāko daļu epitopu turpmākai plūsmas citometrijas analīzei, padarot to ideāli piemērotu šūnu virsmas marķieru analīzei.
Turklāt Accutase nav jāneitralizē, kad notiek adhēzijas šūnu pasāža. Pēc šūnu sadalīšanas pievienojot vairāk barotnes, Accutase tiek atšķaidīta, tāpēc tā vairs nespēj atdalīt šūnas. Tas novērš vajadzību pēc inaktivācijas posma un ietaupa laiku šūnu kultūru tehniķiem. Visbeidzot, Accutase nav nepieciešams alikvotēt, un pudele ledusskapī ir stabila 2 mēnešus.
Accutase lietojumi
Accutase ir tiešs tripsīna šķīduma aizstājējs, un to var izmantot šūnu līniju pasāžai. Turklāt Accutase labi darbojas, atdalot šūnas daudzu šūnu virsmas marķieru analīzei, izmantojot plūsmas citometriju, un šūnu šķirošanai. Citi Accutase apstrādes pakārtotie lietojumi ietver šūnu virsmas marķieru analīzi, vīrusu augšanas testu, šūnu proliferāciju, audzēja šūnu migrācijas testus, regulāru šūnu pasāžu, ražošanas palielināšanu (bioreaktors) un plūsmas citometriju.
Accutase sastāvs
Accutase nesatur zīdītāju vai baktēriju sastāvdaļas, un tā ir dabīgs fermentu maisījums ar proteolītisku un kolagenolītisku fermentu aktivitāti. Tās sastāvā ir daudz zemāka koncentrācija nekā tripsīna un kolagenāzes, tāpēc tā ir mazāk toksiska un maigāka, bet tikpat efektīva.
Accutase efektivitāte
Ir pierādīts, ka Accutase ir efektīva primāro un cilmes šūnu atdalīšanā un saglabā augstu šūnu dzīvotspēju, salīdzinot ar dzīvnieku izcelsmes fermentiem, piemēram, tripsīnu. pēc 10 minūtēm tiek atgūti 100 % šūnu, un, pateicoties Accutase autodigestijai, nav kaitējuma atstāt šūnas Accutase šķīdumā līdz pat 45 minūtēm.
Kopsavilkumā
Noslēgumā var secināt, ka Accutase ir spēcīgs risinājums, kas maina situāciju šūnu kultūru jomā. Ar savu saudzējošo raksturu, efektivitāti un daudzpusību Accutase ir ideāla alternatīva tripsīnam. Ja meklējat uzticamu un efektīvu risinājumu šūnu atdalīšanai, Accutase ir īstais risinājums.

Produkta pārskats
Tilpums: 100 ml Uzglabāšana: ≤-15°C Sterilitāte: Sterilitāte: Sterili jāfiltrē
Antibiotiku/antimikotisko līdzekļu šķīdums (100x ) ir sterils, lietošanai gatavs koncentrāts, kas paredzēts mikrobioloģiskā piesārņojuma risku samazināšanai šūnu kultūru un saistītās laboratorijās. Šis 100x šķīdums satur vispāratzītu penicilīna, streptomicīna un amfotericīna B kombināciju, kas nodrošina plaša spektra antimikrobiālu iedarbību pret grampozitīvām un gramnegatīvām baktērijām, raugiem un pavedienveida sēnītēm. Preparāts ir piemērots lietošanai eikariotisko šūnu kultūrās, bakteriālajās barotnēs un citās sistēmās, kas jutīgas pret piesārņojumu, veicinot tīras un konsekventas laboratorijas darbības.
Lietošana un priekšrocības Šis šķīdums, kas optimizēts ikdienas pētniecības protokoliem, tiek plaši izmantots, lai uzturētu aseptiskus apstākļus šūnu kultūru darba plūsmās. Tas nodrošina uzticamu veiktspēju vidē, kas jutīga pret piesārņojumu, palīdzot pētniekiem samazināt mikrobu pārmērīgas augšanas risku, neapdraudot šūnu veselību vai eksperimentālo reproducējamību. Sterilā, filtrētā formula novērš nepieciešamību pēc papildu šķīdināšanas posmiem, veicinot racionalizētu barotņu sagatavošanu un samazinot mainīgumu ikdienas laboratorijas procedūrās.
Lietošana un saderība Lai sasniegtu standarta darba koncentrācijas, atšķaidiet šķīdumu 1:100 pilnā barotnē. Produkts ir saderīgs ar plašu zīdītāju šūnu līniju un pamatnes barotņu klāstu. Pastāvīga krājumu pieejamība ļauj pētniekiem gūt labumu no uzticamas piegādes nepārtrauktības un vienkāršotas loģistikas plānošanas. Lai saglabātu šķīduma stabilitāti, tas jāuzglabā ≤ -15 °C temperatūrā un jāaizsargā no atkārtotiem sasalšanas un atkausēšanas cikliem. Tikai izmantošanai pētniecībā. Nav paredzēts lietošanai diagnostikas vai terapeitiskās procedūrās. Nav paredzēts lietošanai cilvēkiem vai dzīvniekiem.

Fosfātu buferētais fizioloģiskais šķīdums (PBS)
Fosfātu buferšķīdums (PBS) ir plaši izmantots buferšķīdums bioloģiskajos un ķīmiskajos pētījumos. Tam ir izšķiroša nozīme pH līdzsvara un osmolaritātes uzturēšanā dažādu eksperimentālu procedūru laikā, tostarp audu apstrādes un šūnu kultivēšanas laikā. Mūsu PBS šķīdums ir rūpīgi izstrādāts no augstas tīrības pakāpes sastāvdaļām, lai nodrošinātu stabilitāti un uzticamību katrā eksperimentā. Mūsu PBS šķīduma osmolaritāte un jonu koncentrācija precīzi atbilst cilvēka ķermeņa osmolaritātei un jonu koncentrācijai, tāpēc tas ir izotonisks un nav toksisks vairumam šūnu.

Mūsu PBS šķīduma sastāvs
Mūsu PBS šķīdums ir īpaši tīru fosfātu buferšķīdumu un fizioloģisko šķīdumu maisījums ar pielāgotu pH. 1X darba koncentrācijā tas satur:

8000 mg/l nātrija hlorīda (NaCl)
200 mg/l kālija hlorīda (KCl)
1150 mg/L nātrija fosfāts divbāziskais bezūdens (Na2HPO4)
200 mg/L Kālija fosfāts vienbāziskais bezūdens (KH2PO4)

Šis sastāvs nodrošina optimālu pH un jonu līdzsvaru, kas piemērots plašam bioloģisko lietojumu klāstam.

Mūsu PBS šķīduma lietojumi
Mūsu PBS šķīdums ir ideāli piemērots dažādiem lietojumiem bioloģiskajos pētījumos. Tā izotoniskās un netoksiskās īpašības padara to piemērotu vielu atšķaidīšanai un šūnu konteineru skalošanai. EDTA saturoši PBS šķīdumi ir efektīvi, lai atdalītu pielipušās un saplūdušās šūnas. Tomēr PBS nedrīkst pievienot divvērtīgos metālus, piemēram, cinku, jo tas var izraisīt nogulsnēšanos. Šādos gadījumos ieteicams izmantot Good's buferus. Turklāt mūsu PBS šķīdums ir pieņemama alternatīva vīrusu transportēšanas barotnei RNS vīrusu, tostarp SARS-CoV-2, transportēšanai un uzglabāšanai.

Kvalitātes kontrole

Sterili filtrēts


Uzglabāšana un glabāšanas laiks

Uzglabāt no gaismas pasargātā +2 °C līdz +25 °C temperatūrā.
Pēc atvēršanas uzglabāt 2°C līdz 25°C temperatūrā un izmantot 24 mēnešu laikā.


Pārvadāšanas nosacījumi

Apkārtējā temperatūra


Uzturēšana

Uzglabāt ledusskapī no +2°C līdz +8°C temperatūrā, tumsā. Izvairīties no sasaldēšanas un biežas sasilšanas līdz +37°C, jo tas samazina produkta kvalitāti.
Nesildiet barotni augstāk par 37°C un neizmantojiet nekontrolētus siltuma avotus, piemēram, mikroviļņu krāsnis.
Ja jāizmanto tikai daļa barotnes, pirms lietošanas izņemiet nepieciešamo daudzumu un uzsildiet to līdz istabas temperatūrai.

Sastāvs



Kategorija
Sastāvdaļas
Koncentrācija (mg/l)


Sāls
Kālija hlorīds
200



Kālija fosfāts monobāziskais bezūdens
200



Nātrija hlorīds
8000



Nātrija fosfāts divbāziskais bezūdens
1150