Accutase šūnu atdalīšanas šķīdums – 100 ml
Accutase šūnu atdalīšanas šķīdums ar EDTA un fenolsarkano – 100 ml
Accutase ir gatavs lietošanai, sterili filtrēts šūnu atdalīšanas šķīdums, kas izstrādāts kā maiga alternatīva tripsīnam/EDTA, lai atdalītu piekļāvušās zīdītāju šūnas no standarta audu kultūras plastmasas traukiem un ar adhezīvu pārklātām virsmām. Tas apvieno proteolītisko un kolagenolītisko enzīmu aktivitāti sabalansētā sāls šķīdumā, lai nodrošinātu efektīvu, bet kontrolētu atdalīšanu, saglabājot šūnu virsmas proteīnus un veicinot augstu dzīvotspēju pēc pārneses un ātru atkārtotu piekļāvēšanos.
Accutase sastāvs ir balstīts uz Dulbecco fosfāta buferšķīdumu (DPBS) ar EDTA un fenolsarkano kā vizuālu pH indikatoru. Fermenti ir ne-zīdītāju un ne-baktēriju izcelsmes, padarot Accutase īpaši piemērotu cilmes šūnu pētniecībai, vakcīnu ražošanas procesiem un jebkurai lietošanai, kurā ir jāminimizē dzīvnieku vai mikrobiālas izcelsmes piesārņotāji. Šķīdums automātiski inhibējas 37 °C temperatūrā, tādēļ pēc atdalīšanas nav nepieciešams neitralizējošs reaģents vai serumu saturošs barotne – šūnas var pārnest tieši svaigā barotnē.
Galvenās īpašības
- Lietošanai gatavs 1x sterili filtrēts šķidrums – nav nepieciešama atšķaidīšana vai atjaunošana
- Kombinēta proteolītiskā un kolagenolītiskā enzīmu aktivitāte maigai disociācijai
- Katra partija standartizēta atbilstoši noteiktam disociācijas aktivitātes līmenim, lai nodrošinātu partiju savstarpēju atbilstību
- Enzīmu izcelsme nav saistīta ar zīdītājiem vai baktērijām
- Automātiska inhibīcija 37 °C temperatūrā – nav nepieciešams neitralizējošs šķīdums
- Formulēts Dulbecco PBS ar EDTA
- Fenolsarkans iekļauts kā vizuāls pH indikators
- pH 6,8–7,8
Tipiski pielietojumi
Accutase maigi disociē plašu klāstu adhezīvu un jutīgu šūnu tipu, tostarp cilvēka embrionālās cilmes šūnas (hESCs), cilvēka indukcijas pluripotentās cilmes šūnas (iPSCs), neironu cilmes šūnas, primāros neironus un rutīniski kultivētas adhezīvās šūnu līnijas, piemēram, HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 un A549. Tipiski lietošanas gadījumi ietver:
- Rutīniska adhezīvo zīdītāju šūnu subkultivēšana un pasāžēšana
- Maiga hESCs, iPSCs un citu jutīgu līniju atsevišķu šūnu atdalīšana
- Paraugu sagatavošana plūsmas citometrijai un FACS analīzei
- Šūnu virsmas marķieru analīze, kur svarīga ir epitopa integritāte
- Šūnu migrācijas, proliferācijas un apoptozes analīzes
- Miera stāvokļa testi, izmantojot seruma izsīkšanu un onkogēnu transfekcijas pētījumus
- Audzēja šūnu un neirālo krastu šūnu migrācijas testi
- Ražošanas apjoma palielināšana bioreaktoru darba plūsmās
Ikdienas darbā uzklājiet aptuveni 10 ml Accutase uz 75 cm2 kultūras virsmas un inkubējiet 5–10 minūtes istabas temperatūrā. Optimālais inkubācijas laiks jānosaka katrai šūnu līnijai atsevišķi, un tas nedrīkst pārsniegt vienu stundu. Pirms pievienošanas noskalojiet šūnu slāni ar Ca2+/Mg2+-nesaturošu sāls šķīdumu, piemēram, DPBS bez kalcija un magnija, lai noņemtu seruma atliekas un divvērtīgos katjonus.
Rīkošanās un uzglabāšana
Neatvērtu pudeli uzglabājiet sasaldētu -15 °C vai zemākā temperatūrā. Atkausējiet istabas temperatūrā vai nakti +2 °C līdz +8 °C temperatūrā. Neatkausējiet Accutase 37 °C ūdens vannā, jo paaugstināta temperatūra samazina fermentu aktivitāti. Pēc atkausēšanas šķīdumu var uzglabāt līdz 2 mēnešiem +2 °C līdz +8 °C temperatūrā; neuzglabājiet istabas temperatūrā. Pirms lietošanas reaģentu neiesildiet līdz 37 °C – pievienojiet to tieši izskalotām šūnām istabas temperatūrā. Lai nodrošinātu ilgu glabāšanas laiku, ieteicams izmantot vienreizējās lietošanas alikvotas, lai izvairītos no atkārtotiem atkausēšanas cikliem. Vienmēr strādājiet aseptiskos apstākļos.
Kvalitāte
Ražots saskaņā ar stingriem kvalitātes standartiem. Katra Accutase partija tiek sterilizēta ar filtrēšanu un pārbaudīta attiecībā uz sterilitāti, pH, izskatu un disociācijas aktivitāti, lai nodrošinātu vienmērīgu, reproducējamu darbību no partijas uz partiju.
Produkta specifikācijas
| Specifikācija | Sīkāka informācija |
|---|---|
| Produkta veids | Šūnu atdalīšanas / disociācijas reaģents |
| Formāts | Sterili filtrēts šķidrums, gatavs lietošanai |
| Tilpums | 100 ml |
| Darba koncentrācija | 1x (gatavs lietošanai) |
| Enzīmu aktivitāte | Kombinēta proteolītiska un kolagenolītiska |
| Fermentu izcelsme | Ne no zīdītājiem un ne no baktērijām |
| Buferu sistēma | Dulbecco PBS ar EDTA |
| pH indikators | Fenolsarkans |
| pH diapazons | 6,8 – 7,8 |
| Izskats | Dzidrs, gaiši sarkans līdz oranžs šķīdums |
| Uzglabāšanas temperatūra | -15 °C vai zemāka |
| Stabilitāte pēc atkausēšanas | Līdz 2 mēnešiem temperatūrā no +2 °C līdz +8 °C |
| Ieteicamais lietošanas daudzums | ~10 ml uz 75 cm2 kultūras virsmas |
| Tipisks inkubācijas laiks | 5–10 minūtes istabas temperatūrā |
| Piegādes nosacījumi | Sasaldēts uz sausā ledus |
| Paredzētais lietojums | Tikai pētniecības vajadzībām un turpmākai ražošanai |
Sastāvs (sastāvs uz litru)
| Sastāvdaļa | Koncentrācija (mg/l) |
|---|---|
| Neorganiskie sāļi | |
| Nātrija hlorīds (NaCl) | 8000,00 |
| Dinātrija hidrogēnfosfāts (Na2HPO4) | 1150,00 |
| Kālija hlorīds (KCl) | 200,00 |
| Kālija dihidrogēnfosfāts (KH2PO4) | 200,00 |
| Citas sastāvdaļas | |
| EDTA · 4Na (tetranātrija EDTA) | 220,00 |
| Fenolsarkans | 3,00 |
| Patentēts fermentu maisījums (proteolītiska un kolagenolītiska aktivitāte) | 1x |
Accutase ir Innovative Cell Technologies, Inc. reģistrēta preču zīme.