CV-1 šūnas
Vispārīga informācija
| Apraksts | CV-1 ir Āfrikas zaļo pērtiķu šūnu līnija, kas iegūta no nierēm 1964. gadā. Sākotnēji šo fibroblastiem līdzīgo šūnu līniju plaši izmantoja pētījumos, kas bija vērsti uz kancerogēnā Rousa sarkomas vīrusa (RSV) transformāciju, bet tagad to plaši izmanto bioloģiskos pētījumos vīrusu ražošanai, transfekcijai un gēnu slāpēšanai. Šīs šūnas ir negatīvas pret reverso transkriptāzi un ir jutīgas pret vairākiem vīrusiem, tostarp poliovīrusu 1, herpes simplex, simpātisko vīrusu 40 (SV40), Kalifornijas encefalītu un gan austrumu, gan rietumu zirgu encefalītu. CV-1 šūnu līnijai ir strauja augšana, tā aug uz plastmasas un stikla virsmām, un tai ir hromosomu skaita izmaiņas pie lieliem caurlaides līmeņiem. Novērots, ka CV-1 šūnām ir paaugstināta audzējamība Wistar žurkām, kas apstrādātas ar ATG, kā arī pastiprināta šūnu koloniju veidošanās mīkstajā agārā. Turklāt CV-1 šūnas atbalsta SV40 vīrusa replikāciju un uzrāda strauju timidīnkināzes (TK) aktivitāti pēc tam, kad ir izraisīta simiāna, adeno un papovavīrusa infekcija. CV-1 šūnu kariotips ir 2n = 60, pseidodiploīds. CV-1 šūnas ir izmantotas dažādiem specifiskiem lietojumiem bioloģiskajos pētījumos, tostarp efektivitātes testēšanai, transfekcijas saimniekam un viruscīdu testēšanai. Tās ir arī piemērots saimnieks transfekcijai, jo īpaši ar SV40 vektoriem. |
|---|---|
| Organisms | Monkey |
| Audu | Nieres |
| Pieteikumi | Piemērots saimnieks transfekcijai, īpaši ar SV40 vektoriem. |
| Sinonīmi | Cv-1, CV 1, CV-1.K, CV-1.K, CV1 |
Raksturojums
| Vecums | 141 diena |
|---|---|
| Dzimums | Vīrieši |
| Šūnas tips | Fibroblasti |
| Augšanas īpašības | Adherent |
Normatīvie dati
| Citāts | CV-1 (Cytion kataloga numurs 605471) |
|---|---|
| Bioloģiskās drošības līmenis | 1 |
| NCBI_TaxID | 9534 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0229 |
Biomolekulārie dati
| Jutība pret vīrusiem | Poliovīruss 1, herpes simplex, austrumu zirgu encefalīts, rietumu zirgu encefalīts, Kalifornijas encefalīts, SV40 |
|---|---|
| Reversā transkriptāze | Negatīvs |
Darbs ar
| Kultūras barotne | EMEM, w: 2 mM L-glutamīns, w: 1,5 g/L NaHCO3, w: EBSS, w: 1 mM nātrija piruvāts, w: NEAA (Cytion izstrādājuma numurs 820100c) |
|---|---|
| Papildinājumi | Papildināt barotni ar 10% FBS |
| Disociācijas reaģents | Accutase |
| Subkultivēšana | Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne. |
| Sadalījuma attiecība | Ieteicamā attiecība ir no 1:2 līdz 1:3 |
| Sēšanas blīvums | 3 līdz 4 x 10^4 šūnas/cm^2 veidos konfluentu slāni aptuveni 4 dienu laikā |
| Šķidruma atjaunošana | 2 reizes nedēļā |
| Atjaunošanās pēc atkušņa | Pēc atkausēšanas izklājiet šūnas ar 5 x 10^4 šūnas/cm^2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un salipt vismaz 24 stundas. |
| Vidēja sasaldēšanas pakāpe | CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100) vai CM-ACF (Cytion kataloga numurs 806100) |
| Šūnu atkausēšana un kultivēšana |
|
Kvalitātes kontrole / Ģenētiskais profils / HLA
| Sterilitāte | Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes. Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda. |
|---|
Analīzes sertifikāts (CoA)
| Partijas numurs | Sertifikāta veids | Datums | Kataloga numurs |
|---|---|---|---|
| 601470-517 | Analīzes sertifikāts | 22. Jan. 2026 | 601470 |