CHO-CTLA4細胞
一般情報
| 説明 | 免責事項:細胞株の表示価格は、学術機関および非営利団体のお客様のみを対象としています。営利団体のお客様の場合、価格は約6,250ユーロとなります。営利団体 CHO-CTLA4細胞株は、CTLA4受容体を中~低レベル(1細胞あたり約3,000分子)で発現するように設計された、安定な組換えCHO(チャイニーズハムスター卵巣)細胞株です。この細胞株は、事前に検証済みの特定のゲノム座にCTLA4遺伝子を標的として組み込むことを可能にする、革新的なランディングパッド技術を用いて作製されました。 CTLA4(CD152としても知られる)は、主にT細胞上に存在する重要な免疫チェックポイントタンパク質です。その機能は、抗原提示細胞上のB7分子(CD80およびCD86)への結合においてCD28と競合することで、T細胞の活性化を抑制することにあります。このメカニズムは、免疫の自己寛容を維持し、自己免疫を予防するために不可欠です。 免疫応答の調節におけるCTLA4の役割は、がん免疫療法、特に免疫チェックポイント阻害戦略において重要な標的となっています。 この細胞株におけるCXCR7の発現は、フローサイトメトリーを用いて確認された。 |
|---|---|
| 生物 | チャイロハムスター |
| 組織 | 卵巣 |
| 病気 | チャイニーズハムスター卵巣細胞(非腫瘍性);CTLA-4の細胞表面発現を目的とした遺伝子改変 |
| アプリケーション | 抗体スクリーニング;CTLA-4を標的とした免疫療法の開発;チェックポイント阻害剤の研究;フローサイトメトリー;創薬 |
特徴
| 年齢 | アダルト |
|---|---|
| 性別 | 女性 |
| 形態学 | 上皮様 |
| セルタイプ | 上皮細胞 |
| 成長特性 | 付着・懸濁 |
規制データ
| 引用 | CHO-CTLA4(Cytion カタログ番号 305414) |
|---|---|
| バイオセーフティレベル | 1 |
| NCBI_TaxID | 10029 |
| セロサウルス・アクセション | CVCL_A8V8 |
| GMOステータス | GMO-S1:このCHO誘導体にはCTLA-4発現コンストラクトが含まれており、チェックポイント受容体の研究が可能である。この分類はドイツ国内でのみ適用され、他の地域では異なる場合があります。 |
生体分子データ
| 発現する受容体 | CTLA4 (CD152) |
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ハンドリング
| 培地 | 接着培養用DMEM:Ham's F12 (1:1)、3.1 g/L グルコース、2.5 mM L-グルタミン、15 mM HEPES、0.5 mM ピルビン酸ナトリウム、1.2 g/L NaHCO3 (Cytion article number 820400a) 懸濁培養用CHO増殖培地A(InSCREENeX社製、InSCREENeXカタログ番号INS-ME-1039) |
|---|---|
| サプリメント | 接着性培養の場合培地に5%FBSを添加する。最終濃度が0.5 mg/mLになるようにGeneticin(G418-Sulfat)を添加する。 |
| 解離試薬 | 接着培養用トリプシン-EDTA |
| 倍増時間 | 約14~16時間 |
| サブカルチャー | 通常の接着細胞培養の場合:付着細胞から古い培地を吸引し、PBSで洗浄して残存培地を除去する。PBSを吸引した後、培養容器のサイズに応じて適切な量のTrypsin/EDTA溶液を加え(例えば、T25フラスコなら1ml、T75フラスコなら3ml)、室温または37℃で5~10分間、あるいは細胞が剥離するまでインキュベートする。顕微鏡で剥離を観察し、必要なら容器を軽くたたいて細胞を離す。いったん剥離したら、完全培地を加えてTrypsin/EDTAを失活させ、細胞を静かに再懸濁し、細胞懸濁液のアリコートを新しい培地の入った新しい培養容器に移す。容器を37℃、5%CO2に設定したインキュベーターに入れ、2~3日ごとに培地を交換する。 |
| 分割比率 | 1~5 |
| 播種密度 | 2~5 × 10⁴ 細胞/cm² |
| フルード更新 | 週2~3回 |
| 解凍後の回復 | 解凍後、T25フラスコに1:2~1:3の割合で細胞を分割し、少なくとも24時間、細胞を凍結から回復させ、接着させる(接着培養の場合)。 |
| フリーズ・ミディアム | 凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。 |
| 細胞の解凍と培養 |
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| インキュベーションの雰囲気 | 37℃、5%CO2、加湿雰囲気。 |
| フラスコ・コーティング | なし |
| 凍結手順 | 凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。 |
| 配送条件 | 凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。 |
| 保管条件 | 長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。 |
品質管理/遺伝子プロファイル/HLA
| 不妊症 | マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。 細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査を受けている。 |
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