BEWO rakuliin
BeWo on inimese koorikartsinoomist saadud rakuliin, mida kasutatakse laialdaselt biomeditsiinilistes uuringutes. See on väärtuslik in vitro mudel inimese trofoblastide platsentaarengu ja süntsiatsiooniprotsessi keerulise protsessi uurimiseks. Teadlased kasutavad neid rakke ka trofoblastide rakkude käitumise, hormoonide tootmise ja ainete transpordi uurimiseks platsentas. Lisaks pakuvad BeWo rakud rakendusi ka toksikoloogia, nakkuste ja haiguste ülekandumise uuringutes.
See artikkel hõlmab põhiteadmisi BeWo rakkude kohta, mis võivad aidata teil nendega oma uurimistöödes tegelda. See hõlmab järgmist:
- BeWo rakkude üldised omadused ja päritolu
- BeWo rakuliin: Teave kultiveerimise kohta
- BeWo rakuliini eelised ja puudused
- BeWo rakkude teadusrakendused
- BeWo rakke sisaldavad teaduspublikatsioonid
- BeWo rakuliini ressursid: Protokollid, videod ja muud
1. BeWo rakkude üldised omadused ja päritolu
Eelnev teadmine rakuliini päritolu ja üldiste omaduste kohta on väga oluline selle kasutamiseks teie teadusuuringutes. Selles artikli osas uuritakse BeWo rakuliini päritolu, iseloomulikke omadusi ja palju muud. Siin saate teada: Mis on BeWo klorokartsinoomi rakuliin? Mis on BeWo süntsiootilisus? Kust pärinevad BeWo rakud? Milline on BeWo rakkude morfoloogia? Milline on BeWo ploidia?
- Platsentaarne rakuliin BeWo pärineb 1968. aastal meeste loote platsenta pahaloomulisest gestatsioonikoriokartsinoomist [1]. Seega on see asendamatu mudel platsentauuringute jaoks.
- BeWo rakkudel on epiteelilaadne morfoloogia.
- BeWo rakud on suhteliselt väikesed, vahemikus 20 kuni 30 µM [2].
- BeWo rakkudel on stabiilne karyotüüp. Nende tüviridade arv on hüpotetraploidne. BeWo rakkude modaalne kromosoomide arv on 86. See võib varieeruda 71-st kuni 178-ni.
- BeWo rakud toodavad mitmeid hormoone, st inimese koorionisomatomammotropiini, inimese kooriongonadotropiini (hCG) ja steroidhormoone.
- BeWo rakud ekspresseerivad molekulaarseid markereid, sealhulgas CK 7, E-kadheriini ja VE-kadheriini.
B30 alamliin
B30 on BeWo rakkude alamliin. Seda kasutatakse toitainete omastamise ja transpordi uurimiseks. See on tingitud nende jõulisest kasvust poorsetel membraanidel.
BeWo ja JEG-3
BeWo JEG-3 rakuliinid on saadud koorikartsinoomidest ja neid kasutatakse platsentauuringutes. BeWo rakud toodavad hormoone madalamal tasemel kui JEG-3, näiteks inimese kooriongonadotropiini (hCG) ja östradiooli.
2. BeWo rakuliin: Teave kasvatamise kohta
Rakukultuuri hooldamine võib olla keeruline, kui te ei tea peamisi üksikasju. Näiteks: Milline on BeWo kahekordistumisaeg? Mis on BeWo rakukeskkond? Kuidas kasvatada BeWo rakuliini ja kuidas külmutada BeWo rakke?
BeWo rakkude kultiveerimise põhipunktid
|
Kordistumisaeg: |
BeWo rakkude populatsiooni kahekordistumise aeg on ligikaudu 30 tundi. |
|
Adherentselt või suspensioonis: |
BeWo on adherentne rakuliin. |
|
Rakkude külvikutihedus: |
BeWo rakkude soovitatav külvitihedus on 1 x104 rakku/cm2. Külvamiseks eemaldatakse rakkudelt vana meedia ja rakud loputatakse 1 x PBS-ga. Seejärel lisatakse Accutase (passageerimislahus) ja rakke inkubeeritakse 8-10 minutit toatemperatuuril. Seejärel lisatakse eraldunud rakud kultuurkeskkonnaga ja tsentrifuugitakse. Seejärel resuspendeeritakse kogutud rakud ja valatakse uude kolbi. |
|
Kasvukeskkond: |
BeWo rakkude kasvatamiseks kasutatakse Ham's F12K keskkonda, mis sisaldab 10% FBS, 2,0 mM L-Glutamiini, 2,0 mM naatriumpüruvaati ja 2,5 g/L NaHCO3. BeWo rakukeskkonda tuleb vahetada 2 kuni 3 korda nädalas. |
|
Kasvutingimused: |
BeWo rakke hoitakse niisutatud inkubaatoris, mille temperatuur on 37 kraadi Celsiuse järgi ja mille CO2 sisaldus on 5%. |
|
Säilitamine: |
Külmutatud BeWo rakke säilitatakse alla -150 °C juures elektrilises ülimadala temperatuuriga sügavkülmikus või vedela lämmastiku aurufaasis. |
|
Külmutamisprotsess ja keskkond: |
BeWo rakke soovitatakse külmutada CM-1 või CM-ACF külmutuskeskkonnas. Rakud külmutatakse aeglase külmutamise meetodil. See meetod võimaldab temperatuuri langust ainult 1 kraadi võrra minutis, mis hoiab ära rakkude šoki ja kaitseb rakkude elujõulisust. |
|
Sulatamisprotsess: |
Külmutatud rakud sulatatakse, kastes neid eelnevalt seadistatud 37 °C veevanni 40-60 sekundiks, kuni alles jääb väike jääklomp. Seejärel lisatakse värske kasvukeskkond ja rakud tsentrifuugitakse, et eemaldada külmutuskeskkonna komponendid. Kogutud rakupellet resuspendeeritakse ja doseeritakse kasvukolbi. |
|
Bioturvalisuse tase: |
BeWo rakukultuuride käitlemiseks ja hooldamiseks on vajalik 1. bioloogilise ohutuse taseme laboratoorium. |
3. BeWo rakuliini eelised ja puudused
BeWo rakkudel on ainulaadsed omadused ja neil on spetsiifilised plussid ja miinused. Selles jaotises uurime mõningaid märkimisväärseid neist.
Eelised
BeWo koorikartsinoomi rakuliini peamised eelised on järgmised:
-
In vitro platsentarakkude mudel
BeWo rakud pakuvad in vitro mudelit trofoblastrakkude käitumise ja platsenta süntsütsialiseerumise uurimiseks, mis kordab protsesse, mida on raske jälgida in vivo.
-
Hormoonide tootmine
BeWo rakud eritavad hormoone, nagu hCG ja platsenta laktogeen, mis muudab need väärtuslikuks hormonaalse regulatsiooni uuringutes ja reproduktsioonibioloogia uurimisel.
Puudused
BeWo trofoblastirakkude puudused on järgmised:
-
Vähirakuliin
BeWo rakud on saadud koorikartsinoomist, mis on platsenta kasvaja. See päritolu ei pruugi täielikult esindada normaalset platsentarakkude funktsiooni.
4. BeWo rakkude uurimisrakendused
BeWo rakuliini kasutatakse laialdaselt platsentauuringutes. Siinkohal on nimetatud mõned selle rakuliini konkreetsed rakendused:
- Platsenta ja rasedusega seotud uuringud: BeWo rakud on kesksel kohal platsenta ja rasedusega seotud uuringutes. Teadlased kasutavad neid rakke näiteks selleks, et uurida ainete, sealhulgas ravimite, toitainete ja toksiinide transporti läbi platsentaarbarjääri. Lisaks uurivad nad ka hormoonide, sealhulgas inimese kooriongonadotropiini (hCG), platsenta laktogeeni ja steroidhormoonide tootmist ja reguleerimist. See on oluline raseduse ajal toimuvate hormonaalsete muutuste mõistmiseks. 2018. aastal läbi viidud uuringus uuriti broomitud leegiaeglustite (BFR) mõju sulfotransferaasi aktiivsusele inimese trofoblastide rakuliinis (BeWo). See ensüüm osaleb kilpnäärmehormooni rakusisese taseme reguleerimises [3].
- Infektsiooni ja haiguste uurimine: BeWo rakke kasutatakse ka haigustekitajate ja platsentarakkude vahelise koostoime uurimiseks. Need uuringud on väärtuslikud emalt lootele ülekantavate haiguste mõistmiseks ja loote tervise kaitsmise strateegiate väljatöötamiseks. Lisaks aitab see rakuliin teadlastel uurida raseduse ajal tekkivaid tüsistusi, näiteks preeklampsia. Näiteks Michalina Bralewska 2023. aastal läbi viidud uuringus kasutati BeWo trofoblastide rakumudelit ja leiti, et nii kromograniin A (CgA) kui ka sellest saadud peptiid, katestatiin (CST), võivad mängida rolli preeklampsia (PE) patogeneesi keerulises protsessis [4]. Edasi liikudes uuriti teises uuringus trikosantiini vähivastast potentsiaali, kasutades BeWo koorikartsinoomi rakuliini. Uuringus tehti ka lisapingutusi biomarkerite avastamiseks, viies läbi võrdleva proteoomilise analüüsi enne ja pärast eksperimenti [5].
5. BeWo Cells'i teaduspublikatsioonid
Siin on esitatud mõned olulised teaduspublikatsioonid, milles kasutatakse BeWo trofoblastirakke.
See uuring ajakirjas Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) pakkus välja, et AMPK-signalisatsioon aktiveerib BeWo trofoblastirakkudes mitofaagiat FUNDC1 ja PRKN-facilitated mitofaagia radade kaudu. Selle tulemusena aitab mitofaagia säilitada ATP tootmist ja mitokondriaalse membraanipotentsiaali.
See artikkel on avaldatud ajakirjas Animal Cells and Systems (2020). Uuringus pakuti välja, et etüülparabeen vahendab BeWo rakkude apoptoosi kaspaas-3 raja reguleerimise kaudu.
Selles uuringus ravimi metabolism ja dispositsioon (2023) kasutati rakuliine platsenta, sealhulgas BeWo, JAR, JEG-3 ja HTR-8/SVneo, et uurida ksenobiootikumide ja steroidide ladestumist rakkudes.
See teadusartikkel ajakirjas International Journal of Molecular Medicine (2020) pakkus välja, et Apelin, APJ retseptori ligand, soodustab BeWo rakkude proliferatsiooni APJ ja ERK1/2, stat3 ja AMPK signalisatsiooni kaudu. Seega võib see olla oluline adipokiin, mis reguleerib platsenta arengut.
Selles Epilepsia's (2021) avaldatud uuringus uuriti loote toitainete ja krambivastaste ravimite mõju koliini transporteritele inimese trofoblastide rakuliinis BeWo.
6. BeWo rakuliini ressursid: BeoWo: protokollid, videod ja muud materjalid: protokollid, videod ja muud
Siin on mõned BeWo rakkude kohta kättesaadavad veebiressursid:
- In vitro transfektsioon: See video aitab teil õppida in vitro plasmiid-DNA transfektsiooni protokolli adherentsete rakkude jaoks.
Järgmine link sisaldab teavet rakukultuuri kohta BeWo rakkude puhul:
- BeWo rakud: See veebileht sisaldab olulist rakukultuuriteavet BeWo rakuliini kohta. See sisaldab teavet rakukeskkonna ja kultiveerimistingimuste kohta. Seal on ka protokollid subkultuuride ja krüokonserveeritud ning proliferatiivsete kultuuride käitlemise kohta.
Viited
- Weber, M., et al., Cytogenomics of six human trophoblastic cell lines. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
- Kolokol'tsova, T., et al., Trofoblastide omadused pikaajalises kultuuris. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2017. 164: p. 259-265.
- Leonetti, C.P., C.M. Butt ja H.M. Stapleton, Disruption of thyroid hormone sulfotransferase activity by brominated flame retardant chemicals in the human choriocarcinoma placenta cell line, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: p. 81-88.
- Bralewska, M., T. Pietrucha ja A. Sakowicz, CgA-deriveeritud CST valgu taseme vähenemine HTR-8/SVneo ja BeWo trofoblastide rakuliinides, mida põhjustab preklamptiline keskkond. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): p. 7124.
- Hu, Y., et al., Võrdleva proteoomilise analüüsi läbiviimine ravimi trikosantiini lisamisel BeWo rakuliinile. Molecules, 2022. 27(5): p. 1603.