Frequently asked questions

23. novembril 2023 muutis CLS Cell Lines Service oma brändi nimeks Cytion ning üleminek on nüüdseks mõlemas juriidilises isikus lõpule viidud. Nüüd tegutseme Cytion GmbH nime all Heidelbergis, Saksamaal, ja Cytion LLC nime all Sioux Fallsis, Lõuna-Dakotas. Brändi muutus peegeldab meie laienemist klassikalisest rakupangandusest laiemasse rakupõhiste uurimistoodete ja -teenuste portfelli.

Jah. CLS-ajastust pärinevad katalooginumbrid viitavad samadele autentseeritud rakuliinidele ja need on tellimissüsteemis endiselt tunnustatud. Olemasolevad analüüsisertifikaadid ja ohutuskaardid jäävad kehtima ajalooliste partiidokumentidena. Uued analüüsisertifikaadid, ohutuskaardid ja arved väljastatakse Cytioni nime all ning publikatsioonides aktsepteeritakse nii CLS-i kui ka Cytioni viiteid.

Cytion GmbH (Heidelberg, Saksamaa) tegeleb tellimuste ja klienditoega kogu Euroopas ja enamikus rahvusvahelistel turgudel. Cytion LLC (Sioux Falls, Lõuna-Dakota), asutatud 2024. aastal, on eraldi USA ettevõte, mis tegeleb tellimuste, MTA-de ja klienditoega kogu Põhja-Ameerikas. Mõlemad ettevõtted jagavad sama autentimitud rakuliinide portfelli ja tegutsevad sama ISO 9001:2015 kvaliteedisüsteemi alusel.

Kataloog sisaldab üle 1000 autentseeritud rakuliini, mis hõlmavad inimeste ja loomade kasvajaliine, immortaliseeritud normaalsed liinid, reporter- ja stabiilselt transfekteeritud derivaadid, indutseeritud pluripotentsed tüvirakud (iPSCs) ja mesenküümse stromaalsed rakud (MSCs). Portfelli täiendavad esmased rakud, kasvukeskkonnad, külmutuskeskkond (CM-1), rakkude eraldamise reagendid ja PBS.

Standardne täitmismaht on tavaliselt 3 × 10⁶ rakku viaali kohta adhesiivsete liinide puhul ja 5 × 10⁶ rakku viaali kohta suspensiooniliinide puhul, mis on krüokonserveeritud määratletud külmutuskeskkonnas. Teie saadud partii täpne eluvõimeliste rakkude arv on dokumenteeritud partii-spetsiifilises analüüsisertifikaadis.

Cytion saab hankida rakuliine teaduspartnerluste, hoiustamisprogrammide ja tehnosiirde kokkulepete kaudu. Võtke ühendust meie teadusmeeskonnaga, nimetades liini nime ja kavandatava rakenduse – me teavitame teid kättesaadavusest, tarneajast ja litsentsitingimustest.

Jah. Meie tehnosiirdeprogramm võtab vastu rakuliinide hoiustusi akadeemilistelt ja tööstuslikelt teadlastelt ning hõlmab autentimist, ema- ja töövarude tootmist, pidevat kvaliteedikontrolli ja ülemaailmset levitamist. Võtke meiega ühendust, et saada teavet hoiustamislepingu ja esitamise protsessi kohta.

Tellimusi saab esitada otse veebipoes aadressil cytion.com või e-posti või telefoni teel oma piirkonna tugimeeskonnale. Kassasse saab lisada ostutellimuse numbri ning toetatakse institutsioonilist arveldust. Suurtellimuste, korduvate või eritellimuste puhul palun küsige müügiosakonnalt ametlikku hinnapakkumist.

Kõik hinnad veebisaidil cytion.com on esitatud ilma käibemaksuta. Kohaldatav käibemaks, saatmiskulud ja võimalikud tollimaksud lisatakse kassasse vastavalt tarne riigile ja teie käibemaksustaatusele. Kehtiva käibemaksukohustuslase numbri omavad ELi kliendid saavad pöördmaksustamise korra alusel käibemaksuvaba arve.

Standardmeetodid hõlmavad krediitkaarti (Visa, Mastercard, American Express) ja SEPA pangaülekannet Euroopa klientidele. Asutuste kontosid saab luua arvepõhise maksmise jaoks ostutellimuse alusel. Põhja-Ameerika kliente teenindab Cytion USA kohalikult aktsepteeritavate makseviisidega.

Jah. Mitme viaali, eritellimusel valmistatud pakendi, mitme tooteliini tellimuse või teadusasutustega sõlmitud raamlepingute puhul palun taotlege ametlikku hinnapakkumist. Hinnapakkumistes täpsustatakse kasutusõigused iga rakuliini kohta (ainult teadustööks või kaubanduslikuks kasutamiseks) otse kirje juures ning need sisaldavad ka saatmis- ja tarneaja tingimusi.

Euroopa veebipood teeb tarneid üle maailma, välja arvatud üks erand: Ameerika turu teenindab Cytion USA Sioux Fallsis, Lõuna-Dakotas. USA, Kanada ja osa Ladina-Ameerika klientidel soovitame tellida piirkondliku esinduse kaudu, et tagada lühemad tarneajad, piirkondlikud MTA-d ja kohalik arveldamine.

Krüokonserveeritud rakud saadetakse külmutatuna kuivjääl valideeritud isoleeritud pakendis, säilitades transpordi ajal kauba temperatuuri ligikaudu −78 °C. Iga saadetis sisaldab partiispetsiifilist analüüsisertifikaati ja käitlemisjuhiseid ning seda jälgitakse kogu teekonna vältel kullerteenuse kaudu.

Soovituslikud transpordiajad Heidelbergist:

• Saksamaa: 1–2 tööpäeva
• ELi piires: 2–4 tööpäeva
• Rahvusvaheliselt: tavaliselt 3–7 tööpäeva, sõltuvalt tollivormistamisest

Tellimused saadetakse välja esmaspäevast kolmapäevani, et vältida nädalavahetuse transpordi ja tagada kuivjää säilivus saabumisel.

Kontrollige pakendit vastuvõtmisel ja veenduge, et krüovialid on endiselt sügavkülmutatud, ilma sulamisjälgedeta ja läbipaistvad. Paigutage need viivitamatult pikaajalisesse hoiustamispaika vedela lämmastiku aurufaasi (−150 kuni −196 °C). Dokumenteerige kuupäev ja kõik pakendi avamisel tehtud tähelepanekud jälgitavuse tagamiseks.

Võtke viivitamatult ühendust teadusliku tugiteenistusega ja lisage tellimusnumber, pakendi fotod ja kullerteenuse jälgimisandmed. Osaliselt või täielikult sulanud rakud on kaetud meie 60-päevase eluvõimelisuse garantiiga – korraldame asenduse, kui probleem on dokumenteeritud.

Säilitage vedela lämmastiku aurufaasis temperatuuril −150 °C või madalamal. Mehaaniline −80 °C külmkapp on vastuvõetav ainult lühiajalise vahepealse sammuna (päevad, mitte nädalad) – eluvõimelisus halveneb pidevalt üle −135 °C temperatuuri tõttu rekristallisatsiooni tõttu. Pidage inventari arvestust partiide, asukoha ja külmutamiskuupäeva kohta.

Standardne kiirsulatus:

• Sulata krüovial 37 °C veevannis 40–60 sekundit, eemaldades selle niipea, kui jääb alles väike jääkristall
• Viige aseptiliselt üle 9–10 ml eelsoojendatud täielikku kasvukeskkonda
• Tsentrifuugige 200 × g juures 5 minutit
• Resuspendeerige pellet värskes keskkonnas ja külvake soovitatud tihedusega

Liigispetsiifilised taastamistingimused (külvitihedus, plaadi formaat, esimene keskkonna vahetus) on loetletud toote lehel.

Rutiinseks krüokonserveerimiseks kasutage täielikku kasvukeskkonda, millele on lisatud 10% DMSO-d, või Cytioni valmis kasutusvalmis CM-1 külmutuskeskkonda. Soovitatav on kontrollitud kiirusega jahutamine umbes −1 °C minutis (Mr. Frosty või programmeeritav sügavkülmik), millele järgneb üleviimine vedelasse lämmastikku pikaajaliseks säilitamiseks.

Igal tootelehel on loetletud kasvatuskeskkonda koostis, soovitatav külvitihedus, subkultiveerimise suhe, passaažide sagedus ja sulatamisjärgsed taastumistingimused. Partii-spetsiifilised andmed – eluvõimeliste rakkude arv, STR-profiil, mükoplasma staatus – on esitatud partii analüüsisertifikaadis, mis saadetakse koos teie tellimusega ja on allalaadimiseks saadaval tootelehel.

Jah. Rakuliine toodetakse Saksamaal meie ISO 9001:2015 sertifitseeritud kvaliteedijuhtimissüsteemi alusel. Sertifikaadi kehtivusala ja kehtivusaeg on dokumenteeritud veebilehe jaotises „Kvaliteet ja garantii“; koopia on saadaval nõudmisel.

Identiteet kinnitatakse lühikeste tandemkorduste (STR) profiiliga 16 markeril (AMEL, CSF1PO, D3S1358, D5S818, D7S820, D8S1179, D13S317, D16S539, D18S51, D21S11, FGA, Penta_D, Penta_E, TH01, TPOX, vWA), mida võrreldakse rahvusvaheliste viitedatabaasidega (Cellosaurus, ATCC, DSMZ) ning iga partii puhul esitatakse identiteedi vastavuse protsent.

Alates 2023. aastast teostab STR-profiilide koostamist sõltumatu kolmandast osapoolest laboratoorium IDEXX BioAnalytics. STR-analüüs korratakse iga uue põhikogu ja töökogu puhul.

STR-autentimist saab kasutada inimese, hiire, roti, hamstri ja koera rakuliinide puhul.

Iga rakupank kontrollitakse PCR-põhise tuvastusanalüüsiga, milles kasutatakse spetsiifilisi primereid, mis on suunatud mükoplasma DNA-le. Lõplikule krüokonserveeritud partiile tehakse eraldi mükoplasma test pärast tootmist. Tulemused registreeritakse partiispetsiifilisel analüüsisertifikaadil kui „vastab nõuetele“ või „ei vasta nõuetele“.

Sterilsus määratakse kindlaks otsese inokuleerimisega 8 kasvukeskkonnale, millele järgneb 10-päevane inkubatsioon, millele järgneb mikroobide identifitseerimine MALDI-TOF MS-meetodil, kui kasv on täheldatav. Vajaduse korral tehakse anaeroobne kultuur. Partii vabastatakse alles siis, kui ei ole tuvastatud aeroobset mikroobide kasvu; eraldi tootmisjärgne steriilsustest kinnitab bakterite ja seente kasvu puudumist krüokonserveeritud viaalis.

Vajaduse korral tehakse igale partiile liigispetsiifiline viirusekontroll. Inimrakuliinide puhul hõlmab test järgmisi viirusi:

• A-, B- ja C-hepatiidi viiruse (HAV, HBV, HCV)
• Inimese immuunpuudulikkuse viiruse tüübid 1 ja 2 (HIV-1, HIV-2)
• Inimese T-lümfotroopne viirus tüüp 1 ja 2 (HTLV-1, HTLV-2)

Liigispetsiifilist patogeenide testimist on võimalik teha inimese, hiire, roti, hamstri, veise ja sea rakuliinide puhul. Teie partiile kohaldatud täpne testide komplekt on loetletud analüüsisertifikaadil.

Iga partiid kontrollitakse liigisisese saastumise suhtes hiire, roti, inimese, hiina hamstri ja aafrika rohelise ahvi taustal. Iga liigi positiivne/negatiivne staatus on märgitud analüüsisertifikaadile. Seda analüüsi teostab IDEXX BioAnalytics koos STR- ja viiruspatogeenide testidega.

Eluvõimelisust pärast külmutamist mõõdetakse Vi-CELL BLU (Beckman Coulter) seadmega, analüüsides 100 pilti proovi kohta 200 µL rakususpensioonist. Väljalaske kriteerium on ≥70% eluvõimelisus pärast sulatamist; teie partii tegelik väärtus on trükitud analüüsisertifikaadile. Taastumine kontrollitakse, kasvatades võrdlusproovi ja kinnitades >80% konfluentsi eeldatava taastumisaja jooksul, samuti kontrollitakse eeldatavaid kasvamisomadusi (adheseeruv, suspensioon või pooladheseeruv).

Cytion garanteerib, et autentifitseeritud krüokonserveeritud rakuliinid on eluvõimelised, kui neid käideldakse soovitatud protokolli kohaselt 60 päeva jooksul alates saatmiskuupäevast. Kui te ei suuda rakke taastada pärast dokumenteeritud standardset sulatamist selle aja jooksul, võtke ühendust teadusliku tugiteenistusega asendusviaali saamiseks.

Partiispetsiifiline analüüsisertifikaat (CoA) saadetakse koos iga tellimusega ja selle saab alla laadida toote lehelt, kasutades külmutatud viaali etiketil trükitud partii numbrit. Igas analüüsisertifikaadis on dokumenteeritud passaaži number, eluvõimeliste rakkude arv, eluvõime pärast sulatamist, steriilsus, mükoplasma staatus, täielik STR-profiil koos identiteedi vastavusega, liikidevaheline saastumine ja liigispetsiifiline patogeenide paneel. Kui te ei leia vanema partii analüüsisertifikaati, võtke ühendust teadusliku tugiteenistusega, esitades katalooginumbri ja partii ID, ning me saadame selle uuesti.

Iga toote lehel on loetletud soovitatav bioloogilise ohutuse tase (tavaliselt BSL-1 või BSL-2) ning kõik liigi- või patogeenispetsiifilised kaalutlused. Mitmed liinid – näiteks viiruslikke elemente kandvad HEK293 derivaadid – on klassifitseeritud geneetiliselt muundatud organismideks; Saksamaal on need tavaliselt GMO-S1. GMO klassifikatsioon võib riigiti erineda, seega kontrollige enne importimist oma kohalikku reguleerivat asutust.

MTA on teadustööks mõeldud leping, mis hõlmab konkreetse rakuliini üleandmist, kasutamist ja edasist üleandmist sisemiseks teadustööks ühes asukohas. MTA-d nõudvad liinid on tootelehel märgistatud. Leping tuleb allkirjastada enne rakkude saatmist.

Ainult need, mille tootelehel on märgitud MTA-teade. Teates on esitatud hoiustaja tingimused ja selle liini suhtes kehtivad kasutuspiirangud. Liinid, mille juures MTA-märget ei ole, kuuluvad Cytioni standardse teadustöö tingimuste alla.

Ei. Ameerika Ühendriikide ja Kanada kliente teenindab Cytion USA, mis kasutab piirkondlikke MTA-sid ja litsentsitingimusi. Hiina ja Taiwani puhul kehtivad eraldi piirkonnapõhised lepingud. Võtke ühendust oma piirkonna meeskonnaga ja me väljastame teie jurisdiktsioonile sobiva lepingu.

Rakuliinid tarnitakse vaikimisi ainult teadusuuringuteks. Kommertsrakendused – teenuste osutamine tasu eest, lepinguline uurimistöö, toodete kvaliteedikontroll, ravimite väljatöötamine välisklientidele, diagnostikakomplektid ja regulatiivsed taotlused – nõuavad kohandatud litsentsi. Täitke toote lehel kasutusotstarbe vorm või võtke meiega otse ühendust, et alustada lepingu sõlmimist.

PCR-põhine mükoplasma testimine kliendi esitatud rakukultuuridel, kasutades sama valideeritud analüüsi, mida me kasutame iga Cytion partiiga. Proovid esitatakse teenuse juhiste kohaselt supernatandina või rakupelletina; allkirjastatud aruanne saadetakse tagasi ettenähtud tähtaja jooksul. Kasulik sissetulevate liinide sõelumiseks, perioodilisteks audititeks ja avaldamiseelseks kvaliteedikontrolliks.

Kliendi esitatud pelleti või DNA proovi STR-profiili koostamine 16-markerilise paneeli abil, võrreldes rahvusvaheliste viitedatabaasidega (Cellosaurus, ATCC, DSMZ) ja allkirjastatud autentimise aruandega, mis sisaldab identiteedi vastavuse protsenti. Kasutatakse identiteedi kinnitamiseks, ristsaastumise avastamiseks ja ajakirjade autentimise nõuete täitmiseks. Saadaval inimese, hiire, roti, hamstri ja koera liinide jaoks.

Suurte, ühe partii valmis kasutuseks mõeldud, viaalidega sobivate rakkude tootmine suure läbilaskevõimega sõelumiseks ja analüüside arendamiseks. Iga partii viaal vastab samadele eluvõimelisuse ja toimivuse kriteeriumidele, mis vähendab katsetevahelist varieeruvust ja kiirendab kampaaniate ajakava.

Jah. Rakukultuuri laiendamine (suurendamine kindlaksmääratud rakkude arvuni, pelletiteni või DNA/RNA kogusteni), master- ja töörakkude panga tootmine ning proovide püsiv hoiustamine on saadaval teenusena, mille eest tuleb tasuda. Iga koostöö algab lühikese telefonikõnega, et kinnitada spetsifikatsioonid, tulemused ja ajakava.