Accutase rakkude eralduslahus EDTA ja fenoolpunasega – 100 ml

Accutase on kasutusvalmis, steriilselt filtreeritud rakkude eralduslahus, mis on loodud kui õrn alternatiiv trüpsiinile/EDTA-le imetajate adhesiivsete rakkude eraldamiseks standardsetest kudekultuuri plastnõudest ja adhesiivkattega pindadelt. See ühendab proteolüütilise ja kollageenolüütilise ensüümi aktiivsuse tasakaalustatud soolalahuses, et tagada efektiivne, kuid kontrollitud eraldamine, säilitades rakupinna valgud ning toetades kõrget eluvõimet pärast passaaži ja kiiret uuesti kinnitumist.

Accutase koostis põhineb Dulbecco fosfaadipuhverdatud soolalahusel (DPBS), millele on lisatud EDTA ja fenoolpunane visuaalse pH indikaatorina. Ensüümid on mitte-imetajate ja mitte-bakteriaalset päritolu, mistõttu Accutase sobib eriti hästi tüvirakkude uurimiseks, vaktsiinide tootmiseks ja mis tahes rakendusteks, kus tuleb minimeerida loomsetest või mikroobidest pärinevaid saasteaineid. Lahus inhibeerib ennast automaatselt 37 °C juures, seega ei ole pärast eraldamist vaja neutraliseerivat reagenti ega seerumit sisaldavat keskkonda – rakud saab viia otse värskesse keskkonda.

Peamised omadused

Kasutusvalmis 1x steriilselt filtreeritud vedelik – lahjendamist ega taastamist ei ole vaja
Kombineeritud proteolüütiline ja kollageenolüütiline ensüümiaktiivsus õrnaks dissotsiatsiooniks
Iga partii on standardiseeritud kindlaksmääratud dissotsiatsioonitegevusele, et tagada partiidevaheline ühtlus
Enüümid ei pärine imetajatelt ega bakteritelt
Inhibeerib ennast 37 °C juures – neutraliseerivat lahust ei ole vaja
Valmistatud Dulbecco PBS-is koos EDTA-ga
Fenoolpunane on lisatud visuaalseks pH-indikaatoriks
pH 6,8–7,8


Tüüpilised rakendused
Accutase lahustab õrnalt mitmesuguseid adhesiivseid ja tundlikke rakutüüpe, sealhulgas inimese embrüonaalseid tüvirakke (hESCs), inimese indutseeritud pluripotentseid tüvirakke (iPSCs), närvi tüvirakke, primaarseid neuroneid ja tavapäraselt kultiveeritavaid adhesiivseid rakuliine, nagu HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 ja A549. Tüüpilised kasutusjuhtumid hõlmavad:

Imetajate adhesiivsete rakkude rutiinne subkultiveerimine ja passaažimine
hESCs, iPSCs ja muude tundlike liinide õrn üherakuline dissotsiatsioon
Proovide ettevalmistamine voolutsütomeetria ja FACS-analüüsi jaoks
Rakupinna markerite analüüs, kus epitoobi terviklikkus on oluline
Rakkude rändamise, proliferatsiooni ja apoptoosi analüüsid
Puhkeoleku testid seerumi näljutamise ja onkogeeni transfektsiooni uuringute abil
Tuumorrakkude ja neuraalkreestrakkude rändetestid
Tootmise mastaabis laiendamine bioreaktori töövoogudes

Rutiinseks tööks kandke umbes 10 ml Accutase'i 75 cm2 kultuuripinnale ja inkubeerige 5–10 minutit toatemperatuuril. Optimaalne inkubatsiooniaeg tuleks määrata iga rakuliini jaoks eraldi ja see ei tohiks ületada ühte tundi. Enne lisamist loputage rakukihiga Ca2+/Mg2+-vaba soolalahusega, näiteks kaltsiumi ja magneesiumita DPBS-ga, et eemaldada jääkserum ja kahevalentsed katioonid.

Käsitsemine ja säilitamine
Hoidke avamata pudelit külmutatuna temperatuuril -15 °C või madalamal. Sulatage toatemperatuuril või öösel temperatuuril +2 °C kuni +8 °C. Ärge sulatage Accutase'i 37 °C veevannis, kuna kõrgem temperatuur vähendab ensüümi aktiivsust. Pärast sulatamist võib lahust hoida kuni 2 kuud temperatuuril +2 °C kuni +8 °C; ärge hoidke toatemperatuuril. Ärge soojendage reagenti enne kasutamist 37 °C-ni – lisage see otse pestud rakkudele toatemperatuuril. Pika säilivusaja tagamiseks soovitatakse kasutada ühekordseks kasutamiseks mõeldud alikvoote, et vältida korduvaid sulatamistsükleid. Töötage alati aseptilistes tingimustes.

Kvaliteet
Valmistatud rangete kvaliteedistandardite kohaselt. Iga Accutase'i partii on steriilselt filtreeritud ja testitud steriilsuse, pH, välimuse ja dissotsiatsioonitegevuse suhtes, et tagada partii-partii ühtlane ja korratav tulemus.

Toote spetsifikatsioonid



Spetsifikatsioon
Detail



TootetüüpRakkude eraldamise / dissotsiatsiooni reagent
VormSteriilselt filtreeritud vedelik, kasutusvalmis
Maht100 ml
Töökontsentratsioon1x (kasutusvalmis)
Enüümi aktiivsusKombineeritud proteolüütiline ja kollageenolüütiline
Enüümi päritoluMitte-imetaja ja mitte-bakteriaalne
PuhversüsteemDulbecco PBS koos EDTA-ga
pH indikaatorFenoolpunane
pH vahemik6,8 – 7,8
VälimusLäbipaistev, heleroosa kuni oranž lahus
Säilitustemperatuur-15 °C või madalam
Stabiilsus pärast sulatamistKuni 2 kuud temperatuuril +2 °C kuni +8 °C
Soovitatav kasutamiskogus~10 ml 75 cm2 kultuuripinna kohta
Tüüpiline inkubatsiooniaeg5–10 minutit toatemperatuuril
TransporditingimusedKülmutatud kuivjääs
KasutuseesmärkAinult teadusuuringuteks ja edasiseks tootmiseks



Koostis (koostis ühe liitri kohta)



Komponent
Kontsentratsioon (mg/l)




Anorgaanilised soolad

Naatriumkloriid (NaCl)8000,00
Dinatriumvesinikfosfaat (Na2HPO4)1150,00
Kaaliumkloriid (KCl)200,00
Kaaliumdivesinikfosfaat (KH2PO4)200,00

Muud koostisosad

EDTA · 4Na (tetranatrium-EDTA)220,00
Fenoolpunane3,00
Patenteeritud ensüümisegu (proteolüütiline ja kollageenolüütiline toime)1x



Accutase on Innovative Cell Technologies, Inc. registreeritud kaubamärk.