BEWO rakud
430,00 €*
Tooted saadetakse külmutatuna kuivjääs krüotubides. Iga krüotub sisaldab tavaliselt 3 × 10 6 rakku adhesiivsetele liinidele või 5 × 106 rakku suspensiooniliinidele (üksikasjad on esitatud partii CoA-s).
Üldine teave
| Kirjeldus | BeWo rakud, mis on loote meessoost platsenta pahaloomulisest gestatsioonikoriokartsinoomist saadud rakuliin, on saanud laialdaselt kasutatavaks in vitro mudeliks platsenta uurimiseks. Raku ja rakkude ühinemine inimese trofoblastide süntsiatsioonifaasis platsenta arengu ajal on üks olulisemaid, kuid samas kõige vähem mõistetud sündmusi. Kuna seda protsessi on raske uurida platsentas in vivo, kasutatakse BeWo rakke rakukultuurimudelina, et simuleerida platsenta villoosse trofoblasti in vivo süntsiatsioone. Need rakud omavad epiteelilaadset fenotüüpi ja on adherentsed. BeWo rakkude b30 subkloon on eriti kasulik toitainete omastamise ja transpordi uurimiseks, kuna ta kasvab tihedalt läbilaskvatel membraanidel. CK 7 ja E-kadheriin on molekulaarsed markerid, mida BeWo rakud ekspresseerivad. VE-kadheriini leidub BeWo rakkudes ja see suureneb ravimisel forskoliiniga. Rakud ekspresseerivad ka keratiini ja on positiivsed G6PD, B isoensüümi suhtes. BeWo rakkude karyotüüp on modaalne arv = 86, vahemikus 71-178, ja tüvirida on hüpotetraploidne. Karüotüüp on suhteliselt stabiilne tüviridaarvu piires. BeWo rakud eritavad erinevaid hormoone, sealhulgas inimese kooriongonadotropiini (hCG), inimese koorionsomatomammotropiini (platsenta laktogeen) ja steroidhormoone nagu östroon, östriool ja östradiool. BeWo rakkude poolt sekreteeritud β-hCG ja östradiooli tase on siiski madalam kui teiste koorikartsinoomist saadud rakuliinide, näiteks JEG-3, poolt sekreteeritavad tasemed. Forskoliinravi korral suureneb β-hCG sekretsioon BeWo rakkudes sarnasele tasemele, mis on täheldatud teiste koorikartsinoomist saadud rakuliinide puhul. Lisaks suurendab Forskolin-ravi ka BeWo rakkude poolt eritatava progesterooni taset. Kokkuvõttes on BeWo rakud laialdaselt kasutatav in vitro mudel platsenta arengu ja inimese trofoblastide süntsiatsiooniprotsessi uurimiseks. Neil on epiteelilaadne fenotüüp, nad ekspresseerivad erinevaid molekulaarseid markereid ja eritavad mitmeid hormoone, sealhulgas hCG, platsenta laktogeeni ja steroidhormoone. Üldiselt on BeWo rakud väärtuslik vahend platsenta arenguga seotud keeruliste protsesside uurimiseks. |
|---|---|
| Organism | Inimene |
| Kude | Platsenta |
| Haigus | Choriocarcinoma |
| Metastaatiline koht | Aju |
| Sünonüümid | BeWo, Be Wo, Be-Wo |
Omadused
| Vanus | Loote |
|---|---|
| Sugu | Mees |
| Morfoloogia | Epiteelilaadsed |
| Kasvuomadused | Kinnipeetav |
Regulatiivsed andmed
| Tsitaat | BEWO (Cytioni katalooginumber 300123) |
|---|---|
| Bioturvalisuse tase | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0044 |
Biomolekulaarsed andmed
| Isoensüümid | G6PD, B |
|---|---|
| Viiruse vastuvõtlikkus | Polioviirus 3, vesikulaarne stomatiit (Indiana) |
| Pöördtranskriptaas | Negatiivne |
| Tooted | Progesteroon, inimese koorioni somatomammotropiin (platsenta laktogeen), östrogeen, östroon, östriool, östradiool, keratiin |
Töötlemine
| Kultuurikeskkond | Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamiin, w: 2,0 mM naatriumpüruvaat, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820608a) |
|---|---|
| Täiendused | Täiendada söötme 10% FBS-ga |
| Dissotsiatsioonireaktiiv | Accutase |
| Subkultuuride kasvatamine | Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda. |
| Külvi tihedus | Soovitatav külvitihedus on 1 x 104 rakku/cm2. |
| Vedeliku uuendamine | 2 kuni 3 korda nädalas |
| Taastumisjärgne taastumine | Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul. |
| Külmutage keskkond | Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi. |
| Rakkude sulatamine ja kultiveerimine |
|
| Inkubatsiooni atmosfäär | 37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär. |
| Kolvi katmine | Optimaalse kinnitumise ja elujõulisuse tagamiseks pärast sulatamist soovitame kasutada kollageeniga kaetud koldeid või plaate. |
| Külmutamise protseduur | Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi. |
| Veotingimused | Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi. |
| Ladustamistingimused | Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist. |
Kvaliteedikontroll / Geneetiline profiil / HLA
| Steriilsus | Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt. |
|---|---|
| HLA alleles |
A*: '01:01:01, '11:01:01
B*: '08:13, '35:01:01
C*: '04:01:01, '07:01:01
DRB1*: '01:03:01, '03:01:01
DQA1*: '01:01:01, '05:01:01
DQB1*: '02:01:01, '05:01:01
DPB1*: '01:01:01, '04:01:01
E: '01:01:01
|
Analüüsisertifikaat (CoA)
| Partii number | Sertifikaadi tüüp | Kuupäev | Kataloogi number |
|---|---|---|---|
| 300123-010425 | Analüüsitunnistus | 23. May. 2025 | 300123 |
| 300123-1022 | Analüüsitunnistus | 23. May. 2025 | 300123 |
Materjali üleandmise leping
Kui kavatsete Cytioni rakuliine kasutada ainult ühe uurimisasutuse sisemisteks uuringuteks, täitke ja allkirjastage meie materjalide üleandmise leping (MTA) ning saatke see koos tellimusega.
Kõigi kommertsrakenduste puhul – sealhulgas, kuid mitte ainult tasuliste teenuste osutamine, kvaliteedikontrolli testid, toote turuleviimine, diagnostiline kasutamine või regulatiivsed uuringud – täitke palun kavandatud kasutusvorm, et saaksime koostada teie projektile sobiva lepingu.
Pange tähele: MTA kehtib ainult teatud rakuliinide puhul. Kui see teade ja MTA dokument on toote lehel, kehtib leping. Rakuliinide puhul, mis ei ole MTAga hõlmatud, ei näidata viidet lepingule. MTA ei kehti Ameerika, Hiina ega Taiwani klientide puhul. Palun võtke ühendust meie Ameerika Ühendriikide üksusega, et saada sobiv leping.