Neuro-2a rakuliin

Neuro-2a on hiirte närvirakuliin, mida kasutatakse laialdaselt neuroteaduslike uuringute käigus. Peamiselt kasutatakse neid rakke neuronaalse arengu, diferentseerumise, neurotoksilisuse, raku signaaliradade ja aksonite kasvu uurimiseks. Peale selle kasutatakse neid ravimite arendamiseks ja sõelumiseks.

Selles artiklis keskendutakse neuroblastoomi Neuro-2a rakkude olulistele aspektidele, mis võiksid teid aidata enne sellega töö alustamist. See hõlmab peamiselt järgmist:

Neuro-2a rakkude üldised omadused ja päritolu
Teave Neuro-2a rakuliini kultiveerimise kohta
Neuro-2a rakuliini eelised ja puudused
Neuro-2a rakuliini uurimisrakendused
Neuro-2a rakke sisaldavad teaduspublikatsioonid
Neuro-2a rakkude ressursid: Protokollid, videod ja muud

1. Neuro-2a rakkude üldised omadused ja päritolu

Selles artikli osas käsitletakse Neuro-2a rakuliini tausta ja põhiomadusi, mida on oluline teada enne sellega töötamist. Siin saate teada: Mis on Neuro-2a rakuliin? Mis on Neuro-2a rakuliini päritolu? Mis on Neuro-2a rakuliini diferentseerimine? Milline on Neuro-2a rakuliini suurus? Milline on Neuro-2a rakkude morfoloogia?

Neuro-2a rakud pärinevad albiinohiire (tüvi A) spontaansest kasvajast (neuroblastoom). Rakuliini rajasid R.J. Klebe ja F.H. Ruddle.
Neuro-2a neuroblastoomirakkudel on neuronaalne ja amoeboidne tüvirakkude morfoloogia.
Neuro-2a rakkude suurus on 12 mikromeetrit [1].
Neuro-2a rakkude kromosoomide arv võib ulatuda 59-st kuni 193-ni, modaalne arv on 95. Nende neuroblastoomirakkude karyotüüp on ebastabiilne vahemikus 94 kuni 98 kromosoomi.

Neuronaalne signaalimine illustreeritud: neurotransmitteri vabanemine sünaptilises lõigus presünaptilise neuroni poolt, mis vallandub Ca2+ sissevoolu mõjul, mis viib aktiveeritud ioonikanalite ja Na+ sissevoolu postsünaptilises neuronis. 3-D kujutis.

2. Neuro-2a rakuliini kasvatamise teave

Neuro-2a rakke kasutatakse laialdaselt neuroteaduslike uuringute laborites. Enne nende rakkudega töötamist peaksite tutvuma allpool mainitud hädavajaliku rakukultuuriinfoga. See võib aidata teil sellega hõlpsasti toime tulla. Te saate teada: Mis on Neuro-2a rakukultuurikeskkond? Kuidas kasvatada Neuro-2a rakke? Milline on Neuro-2a rakkude kahekordistumisaeg? Milline on Neuro-2a rakkude külvi tihedus ? Milline on Neuro-2a rakukultuuri protokoll? Milline on Neuro-2a rakukeskkond?

Neuro-2a rakkude kultiveerimise põhipunktid

Kordistumisaeg:	Neuro-2a rakkude kahekordistumisaeg on ligikaudu 70 tundi.
Adherentselt või suspensioonis:	Neuro-2a on adherentne rakuliin.
Külvitihedus:	Neuro-2a rakuliini optimaalne rakkude külvikutihedus on 1 x¹⁰⁴ ^rakku/cm2. Külvamiseks pestakse rakud magneesiumi- ja kaltsiumivaba fosfaatpuhvrisoolalahusega (1x). Hiljem lisatakse passageerimislahus (Accutase) ja rakke inkubeeritakse 8-10 minutit ümbritseva õhu temperatuuril. Pärast rakkude dissotsieerumist lisatakse uus keskkond ja rakud tsentrifuugitakse. Korjatud rakupellet resuspenseeritakse ettevaatlikult ja rakud valatakse kasvamiseks kultuuranumasse.
Kasvukeskkond:	Neuro-2a rakkude kasvatamiseks kasutatakse EMEMi. See sisaldab 10% FBS, 2 mM L-Glutamiini, 1,5 g/L NaHCO3, EBSS, 1 mM naatriumpüruvaati ja NEAA-d rakkude ideaalseks kasvuks. Keskkonda tuleb vahetada 1-2 korda nädalas.
Kasvutingimused:	Neuro-2a kultuure hoitakse 37 °C niiskendatud inkubaatoris, mis on ühendatud 5% CO2-ga.
Säilitamine:	Rakke tuleks pikaajaliselt säilitada alla -150 °C temperatuuril ülimadalal temperatuuril elektrilises sügavkülmikus või vedela lämmastiku aurufaasis.
Külmutamisprotsess ja keskkond:	Neuro-2a rakkude külmutamiseks kasutatakse CM-1 või CM-ACF keskkonda. Rakud külmutatakse aeglase külmutamise teel, mis võimaldab ainult 1 °C langust minutis. See kaitseb rakke šoki eest ja säilitab nende elujõulisuse.
Sulatamisprotsess:	Külmutatud kultuuride sulatamiseks asetatakse viaali 37 °C veevanni 40-60 sekundiks, kuni alles jääb vaid väike jääklomp. Seejärel lisatakse kultuurkeskkond ja rakud tsentrifuugitakse. See etapp aitab eemaldada külmutusvedeliku komponendid. Seejärel resuspendeeritakse rakupellet uuesti ja rakud viiakse uude kolbi, mis on täidetud kultuurkeskkonnaga. Seejärel pannakse rakud vähemalt 24 tunniks inkubaatorisse 37 °C juures.
Bioturvalisuse tase:	Neuro-2a kultuuride käitlemiseks ja säilitamiseks on kohustuslik 1. bioloogilise ohutuse taseme laboratoorsed tingimused.

Neuroblastoomi Neuro 2a adherentsete rakkude varajase läbimise mikroskoopiline pilt, millel on kujutatud nende morfoloogiat 10x ja 20x suurendusega.

3. Neuro-2a rakuliini eelised ja puudused

Neuro-2a rakkudel on mõned eelised ja puudused, mis eristavad neid teistest neuronaalsetest rakuliinidest. Siin on loetletud nende rakkude mõned märkimisväärsed eelised ja puudused.

Eelised

Neuro-2a hiire neuroblastoomi rakuliini eelised on järgmised:

Lihtne hooldada
Neuro-2a rakuliin ei ole seotud keeruliste või keeruliste rakukultuuriprotseduuridega. Neid on lihtne kasvatada ja hooldada teaduslaboratooriumides.
In vitro neuronaalsete rakkude mudel
Neuro-2a on mugav neuronaalne rakumudel, mida teadlased kasutavad laialdaselt neuronite arengu ja diferentseerumise uuringutes.

Puudused

Neuro-2a rakkude puudused on järgmised:

Hiirte päritolu
Uurijad peaksid olema ettevaatlikud, kui nad ekstrapoleerivad hiirtel põhinevate uuringute tulemusi inimeste tervisele ja haigustele, kuna hiirte ja inimeste bioloogia võib oluliselt erineda.

4. Neuro-2a rakuliini uurimisrakendused

Neuro-2a rakud pakuvad neuroteaduste uurimisvaldkonnas mitmeid rakendusi. Siin käsitletakse mõningaid selle rakuliini paljulubavaid kasutusviise:

Neuronaalne areng: Neuro-2a on in vitro neuronaalne rakumudel, mida kasutatakse laialdaselt neuronaalse arengu ja sellega seotud protsesside, näiteks diferentseerumise, aksonite kasvu ja sünapsi moodustumise uurimiseks. 2020. aastal läbiviidud uuringus kasutati Neuro-2a rakke, et uurida mikroRNA-124 rolli retinoiinhappe poolt indutseeritud neuronaalsete rakkude diferentseerumisel [2]. Teises uuringus uuriti Neuro 2a retinoiinhappe retseptori gamma (RARG) ja miRNA-124 ekspressiooni neuroblastoomi rakuliinis (N2A). Selles uuringus pakuti välja, et RARG on miR-124 sihtmärgiks ja pärsib neuriidi väljarengut [3].
Neurotoksilisus: Neuro-2a kasutatakse ka ravimite, kemikaalide või keskkonnategurite toksilise mõju hindamiseks neuronaalsetele rakkudele. Näiteks uuriti Zhihong Yini ja kaastöötajate poolt läbi viidud uuringus neuro-2a rakkude abil keskkonnakemikaali bisfenool A (BPA) neurotoksilisust. Nad täheldasid, et BPA pärsib neuronaalsete rakkude diferentseerumist ja proliferatsiooni, häirides nende rakulist ja sünaptilist terviklikkust [4].
Ravimite sõelumine: Neuro-2a rakke kasutatakse ka mitmete ravimite, ühendite ja looduslike toodete terapeutilise toime hindamiseks. Näiteks kasutati ühes uuringus Neuro-2a rakke ja uuriti Gingko biloba taimeekstrakti antioksüdatiivset potentsiaali. Lisaks pakuti uuringus välja, et see põhjustab Aβ-agregatsiooni vähenemist ja võib olla Alzheimeri tõve potentsiaalne ravi [5].

430,00 €*

Sisu: 1.5 milliliter

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 400394

5. Neuro-2a rakke hõlmavad uurimisteosed

Siin on mõned huvitavad teadusartiklid, milles kasutatakse Neuro-2a rakuliini.

Piperine-like alkamiidid Piper nigrum'ist indutseerivad BDNF promootorit ja soodustavad neuro-2a rakkudes neuriidi väljarengut

Selles ajakirjas Journal of Natural Medicines, 2018 avaldatud uuringus uuriti valgest piprast (P. nigrum) isoleeritud alkamiidide terapeutilist mõju Neuro-2a neuronaalsetele rakkudele.

Nkx2. 1 allareguleerimine on seotud liigse retiinhappe poolt esile kutsutud aju kõrvalekalletega

See uuring ajakirjas Acta Biochimica et Biophysica Sinica, 2020 pakkus välja, et Nkx2.1 geen mängib olulist rolli hiirte aju arengus, reguleerides Shh-signaalkaskaadi.

Kokkupuude bisfenool A-ga põhjustab neurotoksilisust, mis on seotud sünaptilise ja tsütoskeleti düsfunktsiooniga neuro-2a rakkudes

See artikkel avaldati ajakirjas Toxicology and Industrial Health (2023) ja pakkus välja, et keskkonnakemikaal bisfenool A, vallandab neurotoksilisuse neuro-2a rakkudes ja häirib nende sünaptilist ja tsütoskeleti düsfunktsiooni.

Heksareliini MAPK ja PI3K/Akt radade moduleerimine neuro-2A rakkudes pärsib vesinikperoksiidi poolt põhjustatud apoptootilist toksilisust

Selles farmaatsiatoodetes (2021) avaldatud artiklis pakuti välja, et ravim, heksareliin, moduleerib PI3K/AKT ja MAPK kaskaadi neuroblastoomirakkudes (Neuro-2a) ja inhibeerib vesinikperoksiidi poolt põhjustatud neuro-2a rakkude apoptoosi.

Emblica officinalis'e etanoolne puuviljaekstrakt pärsib neuroinflammatsiooni mikroglias ja soodustab neuro2a rakkude neuriidi väljarengut

See teadustöö ajakirjas Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2021) pakkus välja, et Emblica officinalise puuviljaekstrakt pärsib neuroinflammatsiooni Neuro-2a rakkudes ja võib seega olla kasulik neuroinflammatoorsete haiguste puhul.

6. Neuro-2a rakkude ressursid: Protokollid, videod ja muud vahendid: protokollid, videod ja muud

Järgnevalt on esitatud Neuro-2a rakkude kohta kättesaadavad veebiressursid. Need hõlmavad Neuro-2a rakkude kasvatamise ja transfektsiooni protokolli.

Neuro-2a transfektsiooni protokoll: Neuro-2a on sobiv transfektsiooni peremees. See link juhendab teid rakuliini transfektsiooniprotokolli osas. Neuro 2a transfektsiooni tõhusus varieerub reagenditi.

Järgmine link sisaldab Neuro-2a rakukultuuri protokolli.

Neuro-2a rakukultuuri protokoll: See link aitab teil õppida neuro 2a rakkude subkultiveerimise protokolli.
Neuro-2a rakud: Veebileht sisaldab põhjalikke teadmisi Neuro-2a rakkude söötme, külvitiheduse ja protokollidega subkultuuride ja krüokultuuride ning proliferatiivsete kultuuride käitlemise kohta.

Viited

Lulevich, V., et al., Single-cell mechanics provides a sensitive and quantitative means for probing amyloid-beta peptide and neuronal cell interactions. Proc Natl Acad Sci U S A, 2010. 107(31): p. 13872-7.
You, Q., et al., MiR-124 roll retiinhappest põhjustatud neuro-2A rakkude diferentseerumise reguleerimisel. Neural Regen Res, 2020. 15(6): p. 1133-1139.
Su, X., et al., Retinoiinhappe retseptori gamma on mikroRNA-124 sihtmärgiks ja inhibeerib neuriidi väljarengut. Neuropharmacology, 2020. 163: p. 107657.
Yin, Z., et al., Bisfenool-A ekspositsiooniga indutseeritud neurotoksilisus ja seotud sünapsi ja tsütoskeletiga Neuro-2a rakkudes. Toxicology in Vitro, 2020. 67: p. 104911.
Chen, L., et al., Gingko biloba ekstrakt (EGb) inhibeerib oksüdatiivset stressi neuro 2A rakkudes, mis üleekspresseerivad APPsw. BioMed research international, 2019. 2019.