Клітинна лінія BEWO
BeWo — це клітинна лінія, отримана з хоріокарциноми людини, яка широко використовується в біомедичних дослідженнях. Вона слугує цінною in vitro моделлю для вивчення складного процесу розвитку плаценти та синцитізації трофобластів людини. Дослідники також використовують ці клітини для вивчення поведінки трофобластів, вироблення гормонів та транспорту речовин через плаценту. Крім того, клітини BeWo також знаходять застосування в токсикології, інфекціології та дослідженнях передачі захворювань.
Ця стаття містить основні відомості про клітини BeWo, які можуть допомогти вам у роботі з ними під час досліджень. Вона включає:
- Загальні характеристики та походження клітин BeWo
- Клітинна лінія BeWo: інформація про культивування
- Переваги та недоліки клітинної лінії BeWo
- Застосування клітин BeWo в наукових дослідженнях
- Наукові публікації, присвячені клітинам BeWo
- Ресурси щодо клітинної лінії BeWo: протоколи, відео та інше
Загальні характеристики та походження клітин BeWo
Попереднє знання про походження та загальні характеристики клітинної лінії має вирішальне значення для її використання у ваших дослідженнях. У цій частині статті розглядаються походження клітинної лінії BeWo, її характерні особливості та багато іншого. Тут ви дізнаєтеся: Що таке клітинна лінія хоріокарциноми BeWo? Що таке синцитізація BeWo? Звідки походять клітини BeWo? Яка морфологія клітин BeWo? Яка плоїдність BeWo?
- Плацентарна клітинна лінія BeWo походить від злоякісної гестаційної хоріокарциноми плаценти плода чоловічої статі у 1968 році [1]. Таким чином, вона слугує безцінною моделлю для досліджень плаценти.
- Клітини BeWo мають епітеліоподібну морфологію.
- Клітини BeWo відносно малі, їх розмір коливається від 20 до 30 мкм [2].
- Клітини BeWo мають стабільний каріотип. Їхній основний каріотип — гіпотетраплоїдний. Модальна кількість хромосом клітин BeWo становить 86. Вона може варіюватися від 71 до 178.
- Клітини BeWo продукують кілька гормонів, а саме: хоріонічний соматомамотропін людини, хоріонічний гонадотропін людини (hCG) та стероїдні гормони.
- Клітини BeWo експресують молекулярні маркери, включаючи CK 7, E-кадгерин та VE-кадгерин.
Сублінія B30
B30 — це сублінія клітин BeWo. Вона використовується для дослідження поглинання та транспорту поживних речовин. Це пояснюється їхнім інтенсивним ростом на пористих мембранах.
BeWo та JEG-3
Клітинні лінії BeWo та JEG-3 походять від хоріокарцином і використовуються в дослідженнях плаценти. Клітини BeWo виробляють гормони, такі як хоріонічний гонадотропін людини (hCG) та естрадіол, у менших кількостях, ніж клітини JEG-3.
Клітинна лінія BeWo: інформація щодо культивування
Підтримка клітинної культури може виявитися складною, якщо не знати ключових деталей. Наприклад: Який час подвоєння клітин BeWo? Що таке середовище для культивування клітин BeWo? Як культивувати клітинну лінію BeWo? І як заморожувати клітини BeWo?
Ключові моменти культивування клітин BeWo
Час подвоєння:
Час подвоєння популяції клітин BeWo становить приблизно 30 годин.
Адгезивні або у суспензії:
BeWo — це адгезивна клітинна лінія.
Щільність висівання клітин:
Рекомендована щільність висівання клітин BeWo становить 1 × 10⁴ клітин/см². Для висівання старе середовище видаляють з клітин, а клітини промивають 1× PBS. Після цього додають Accutase (розчин для пасажування) і інкубують клітини протягом 8–10 хвилин при кімнатній температурі. Потім відокремлені клітини додають до культурального середовища та центрифугують. Зібрані клітини ресуспендують і переносять у нову колбу.
Середовище для росту:
Для культивування клітин BeWo використовується середовище Ham's F12K, що містить 10 % FBS, 2,0 мМ L-глутаміну, 2,0 мМ пірувату натрію та 2,5 г/л NaHCO₃. Культуральне середовище для клітин BeWo слід замінювати 2–3 рази на тиждень.
Умови культивування:
Клітини BeWo утримують у зволоженому інкубаторі, налаштованому на температуру 37 градусів Цельсія та з подачею 5% CO₂.
Зберігання:
Заморожені клітини BeWo зберігають при температурі нижче -150 °C в електричній ультранизькотемпературній морозильній камері або у паровій фазі рідкого азоту.
Процес заморожування та середовище:
Рекомендується заморожувати клітини BeWo у заморожувальному середовищі CM-1 або CM-ACF. Клітини заморожують методом повільного заморожування. Цей метод дозволяє знижувати температуру лише на 1 градус за хвилину, що запобігає шоку клітин та забезпечує збереження їх життєздатності.
Процес розморожування:
Заморожені клітини розморожують шляхом занурення їх у заздалегідь підготовлену водяну баню з температурою 37 °C на 40–60 секунд, доки не залишиться невеликий шматок льоду. Потім додають свіже живильне середовище, а клітини центрифугують для видалення компонентів заморожувального середовища. Отриманий осад клітин ресуспендують і переносять у культуральну колбу для вирощування.
Рівень біобезпеки:
Для роботи з культурами клітин BeWo та їхнього утримання необхідна лабораторія рівня біобезпеки 1.
Опубліковано: 2023 | Останнє оновлення: травень 2026
- Переваги та недоліки клітинної лінії BeWo
- Дослідницьке застосування клітин BeWo
- Клітинна лінія BeWo: інформація про культивування
- Загальні характеристики та походження клітин BeWo
- 5. Наукові публікації, присвячені клітинам BeWo
- Ресурси щодо клітинної лінії BeWo: протоколи, відео та інше
- Поширені запитання
Переваги та недоліки клітинної лінії BeWo
Клітини BeWo мають унікальні характеристики та певні переваги й недоліки. У цьому розділі ми розглянемо деякі з найважливіших.
Переваги
Основними перевагами клітинної лінії хоріокарциноми BeWo є:
-
Модель плацентарних клітин in vitro
Клітини BeWo забезпечують in vitro модель для вивчення поведінки трофобластів та синцитізації плаценти, відтворюючи процеси, які важко спостерігати in vivo.
-
Вироблення гормонів
Клітини BeWo секретують гормони, такі як hCG та плацентарний лактоген, що робить їх цінними для досліджень гормональної регуляції та репродуктивної біології.
Недоліки
Недоліками трофобластних клітин BeWo є:
-
Клітинна лінія раку
Клітини BeWo були отримані з хоріокарциноми, яка є пухлиною плаценти. Таке походження може не повністю відображати нормальну функцію клітин плаценти.
Дослідницьке застосування клітин BeWo
Клітинна лінія BeWo широко використовується в дослідженнях плаценти. Тут згадано кілька конкретних застосувань цієї клітинної лінії:
- Дослідження плаценти та вагітності: Клітини BeWo відіграють ключову роль у дослідженнях плаценти та вагітності. Наприклад, дослідники використовують ці клітини для вивчення транспорту речовин, включаючи ліки, поживні речовини та токсини, через плацентарний бар'єр. Крім того, вони також досліджують вироблення та регуляцію гормонів, включаючи хоріонічний гонадотропін людини (hCG), плацентарний лактоген та стероїдні гормони. Це важливо для розуміння гормональних змін під час вагітності. У дослідженні, проведеному в 2018 році, вивчався вплив бромованих антипіренів (BFR) на активність сульфотрансферази в лінії трофобластних клітин людини (BeWo). Цей фермент бере участь у регуляції внутрішньоклітинних рівнів тиреоїдного гормону [3].
- Дослідження інфекцій та захворювань: Клітини BeWo також використовуються для вивчення взаємодії між патогенами та клітинами плаценти. Ці дослідження є цінними для розуміння захворювань, які можуть передаватися від матері до плода, та для розробки стратегій захисту здоров’я плода. Крім того, ця клітинна лінія допомагає дослідникам вивчати ускладнення, що виникають під час вагітності, такі як прееклампсія. Наприклад, у дослідженні, проведеному Міхаліною Бралевською у 2023 році, було використано модель трофобластних клітин BeWo і встановлено, що як хромогранін А (CgA), так і похідний від нього пептид, катестатин (CST), можуть відігравати роль у складному процесі патогенезу прееклампсії (ПЕ) [4]. У подальшому в іншому дослідженні вивчався протираковий потенціал трихосантину з використанням клітинної лінії хоріокарциноми BeWo. У рамках дослідження також було докладено додаткових зусиль для виявлення біомаркерів шляхом проведення порівняльного протеомного аналізу до та після експерименту [5].
5. Наукові публікації, присвячені клітинам BeWo
Ось кілька важливих наукових публікацій, присвячених трофобластним клітинам BeWo.
У цьому дослідженні, опублікованому в журналі Frontiers in Bioscience-Landmark (2022), висунуто гіпотезу, що сигнальний шлях AMPK активує мітофагію в трофобластних клітинах BeWo через шляхи мітофагії, опосередковані FUNDC1 та PRKN. В результаті мітофагія допомагає підтримувати виробництво АТФ та потенціал мітохондріальної мембрани.
Ця стаття була опублікована в журналі Animal Cells and Systems (2020). У дослідженні висунуто гіпотезу, що етилпарабен опосередковує апоптоз клітин BeWo через регулювання шляху каспази 3.
У цьому дослідженні, опублікованому в журналі «Metabolism and Disposition» (2023), використовувалися клітинні лінії плаценти, включаючи BeWo, JAR, JEG-3 та HTR-8/SVneo, для дослідження накопичення ксенобіотиків та стероїдів у клітинах.
У цій науковій статті, опублікованій у журналі «International Journal of Molecular Medicine» (2020), висловлено припущення, що апелін, ліганд рецептора APJ, сприяє проліферації клітин BeWo через сигнальні шляхи APJ, ERK1/2, stat3 та AMPK. Таким чином, він може бути важливим адипокіном, що регулює розвиток плаценти.
У цьому дослідженні, опублікованому в журналі Epilepsia (2021), вивчався вплив поживних речовин для плода та протисудомних препаратів на холінові транспортери в лінії трофобластичних клітин людини BeWo.
Ресурси щодо клітинної лінії BeWo: протоколи, відео та інше
Ось кілька онлайн-ресурсів, присвячених клітинам BeWo:
- Трансфекція in vitro: це відео допоможе вам ознайомитися з протоколом трансфекції плазмідної ДНК in vitro для адгезивних клітин.
За посиланням наведено інформацію про культивування клітин BeWo:
- Клітини BeWo: Цей веб-сайт містить важливу інформацію про культивування клітин лінії BeWo. Сюди входить інформація щодо клітинних середовищ та умов культивування. Також тут наведено протоколи субкультурування та роботи з кріоконсервованими та проліферативними культурами.
Посилання
- Weber, M., et al., Цитогеноміка шести ліній трофобластних клітин людини. Placenta, 2021. 103: с. 72-75.
- Kolokol'tsova, T., et al., Характеристики трофобластів у довготривалій культурі. Бюлетень експериментальної біології та медицини, 2017. 164: с. 259–265.
- Леонетті, К.П., К.М. Батт та Г.М. Степлтон, Порушення активності сульфотрансферази тиреоїдних гормонів під впливом бромованих антипіренів у клітинній лінії хоріокарциноми плаценти людини BeWo. Chemosphere, 2018. 197: с. 81–88.
- Бралевська, М., Т. Пєтруха та А. Саковіч, Зниження рівня білка CST, похідного від CgA, у трофобластичних клітинних лініях HTR-8/SVneo та BeWo, спричинене прееклампсичним середовищем. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): с. 7124.
- Ху, Ю. та ін., Порівняльний протеомний аналіз додавання препарату трихосантину до клітинної лінії BeWo. Molecules, 2022. 27(5): с. 1603.