Клітинна лінія Neuro-2a

Neuro-2a - це мишача лінія нервових клітин, яка широко використовується в неврологічних дослідженнях. В основному, ці клітини використовуються для вивчення нейронного розвитку, диференціації, нейротоксичності, клітинних сигнальних шляхів та росту аксонів. Крім того, їх використовують для розробки та скринінгу ліків.

Ця стаття присвячена важливим аспектам клітин нейробластоми Neuro-2a, які можуть допомогти вам перед початком роботи з ними. В основному мова піде про:

Загальні характеристики та походження клітин Neuro-2a
Інформація про культивування клітинної лінії Neuro-2a
Переваги та недоліки клітинної лінії Neuro-2a
Дослідницькі застосування клітинної лінії Neuro-2a
Наукові публікації за участю клітин лінії Neuro-2a
Ресурси по клітинах Neuro-2a: Протоколи, відео та інше

1. Загальні характеристики та походження клітин Neuro-2a

У цій частині статті ми розповімо про походження та основні характеристики клітинної лінії Neuro-2a, які важливо знати перед початком роботи з нею. Тут ви дізнаєтесь Що таке клітинна лінія Neuro-2a? Яке походження клітинної лінії Neuro-2a? Як відбувається диференціювання клітин Neuro-2a? Який розмір клітини Neuro-2a? Яка морфологія клітин Neuro-2a?

Клітини Neuro-2a походять від спонтанної пухлини (нейробластоми) миші-альбіноса (штам А). Клітинна лінія була створена R.J. Klebe та F.H. Ruddle.
Клітини нейробластоми Neuro-2a мають морфологію нейронів та амебоїдних стовбурових клітин.
Розмір клітини Neuro-2a становить 12 мкм у висоту [1].
Кількість хромосом у клітинах Neuro-2a може варіювати від 59 до 193 з модальним числом 95. Каріотип цих клітин нейробластоми нестабільний в межах від 94 до 98 хромосом.

Ілюстрація нейронної сигналізації: 3D-зображення вивільнення нейромедіатора в синаптичній щілині пресинаптичним нейроном, викликане припливом Са2+, що призводить до активації іонних каналів і припливу Na+ в постсинаптичному нейроні.

2. Інформація про культивування клітинної лінії Neuro-2a

Клітини лінії Neuro-2a широко використовуються в неврологічних дослідницьких лабораторіях. Перед початком роботи з цими клітинами вам слід вивчити обов'язкову інформацію про культуру клітин, наведену нижче. Це може допомогти вам легше впоратися з цим завданням. Ви будете знати: Що таке середовище для культивування клітин Neuro-2a? Як культивувати клітини Neuro-2a? Який час подвоєння клітин Neuro-2a? Яка щільність посіву клітин Neuro-2a? Який протокол культивування клітин Neuro-2a? Що таке середовище для культивування клітин Neuro-2a?

Ключові моменти для культивування клітин Neuro-2a

Час подвоєння:	Час подвоєння клітин Neuro-2a становить приблизно 70 годин.
Адгезія або суспензія:	Neuro-2a є адгезивною клітинною лінією.
Щільність посіву:	Оптимальна щільність посіву клітин для лінії Neuro-2a становить 1 x¹⁰⁴ ^{клітин/см2}. Для посіву клітини промивають фосфатним буферним розчином, що не містить магнію і кальцію (1 раз). Пізніше додають пасажуючий розчин (аккутазу) і інкубують клітини протягом 8-10 хвилин при кімнатній температурі. Після дисоціації клітин додають свіже середовище, і клітини центрифугують. Зібрану клітинну гранулу обережно ресуспендують, і клітини переливають у культуральну посудину для росту.
Поживне середовище:	Для культивування клітин Neuro-2a використовується середовище EMEM. Воно містить 10% FBS, 2 мМ L-глутаміну, 1,5 г/л NaHCO3, EBSS, 1 мМ пірувату натрію та NEAA для ідеального росту клітин. Поживне середовище слід замінювати 1-2 рази на тиждень.
Умови вирощування:	Культуру Neuro-2a підтримують у зволоженому інкубаторі з температурою 37°C, підключеному до джерела 5% CO2.
Зберігання:	Клітини слід зберігати при температурі нижче -150 °C в наднизькотемпературному електричному морозильнику або в паровій фазі рідкого азоту протягом тривалого часу.
Процес заморожування і середовище:	Для заморожування клітин Neuro-2a використовують середовища CM-1 або CM-ACF. Клітини заморожуються за допомогою повільного процесу заморожування, який дозволяє знижувати температуру лише на 1 °C за хвилину. Це захищає клітини від шоку і зберігає їх життєздатність.
Процес розморожування:	Для розморожування заморожених культур пробірку поміщають на водяну баню при 37 °C на 40-60 секунд, поки не залишиться лише невелика крижана грудка. Потім додають культуральне середовище, і клітини піддають центрифугуванню. Цей крок допомагає видалити компоненти середовища, що замерзають. Потім клітинну гранулу ресуспендують, а клітини переносять у нову колбу, заповнену культуральним середовищем. Після цього клітини поміщають в інкубатор при 37 °C мінімум на 24 години.
Рівень біобезпеки:	Для роботи з культурами Neuro-2a обов'язковим є рівень біобезпеки 1 для лабораторій, що працюють з ними.

Мікрофотографія раннього пасажу адгезійних клітин нейробластоми Neuro 2a з морфологією при 10-кратному та 20-кратному збільшенні.

3. Переваги та недоліки клітинної лінії Neuro-2a

Клітини Neuro-2a мають ряд переваг і недоліків, які відрізняють їх від інших клітинних ліній нейронів. Нижче наведені деякі важливі переваги та недоліки цих клітин.

Переваги

Перевагами клітинної лінії нейробластоми миші Neuro-2a є

Легкість у підтримці
Клітинна лінія Neuro-2a не пов'язана зі складними або заплутаними процедурами культивування клітин. Їх легко культивувати і підтримувати в дослідницьких лабораторіях.
Клітинна модель нейронів in vitro
Neuro-2a - це зручна модель нейронних клітин, яка широко використовується дослідниками для вивчення розвитку та диференціації нейронів.

Недоліки

Недоліками клітин Neuro-2a є

Мишаче походження
Клітини Neuro-2a мають мишаче походження, і дослідники повинні бути обережними, екстраполюючи результати досліджень на мишах на здоров'я і хвороби людини, оскільки біологія мишей і людини може суттєво відрізнятися.

4. Дослідницькі застосування клітинної лінії Neuro-2a

Клітини Neuro-2a мають багато застосувань у галузі неврологічних досліджень. Кілька перспективних напрямків використання цієї клітинної лінії обговорюються тут:

Розвиток нейронів: Neuro-2a - це модель нейронних клітин in vitro, яка широко використовується для вивчення розвитку нейронів і пов'язаних з ними процесів, таких як диференціація, ріст аксонів і формування синапсів. У дослідженні, проведеному в 2020 році, клітини Neuro-2a використовували для вивчення ролі мікроРНК-124 в диференціації нейронів, індукованій ретиноєвою кислотою [2]. В іншому дослідженні вивчали експресію гамма-рецептора ретиноєвої кислоти Neuro 2a (RARG) та мікроРНК-124 в клітинній лінії нейробластоми (N2A). Це дослідження припустило, що RARG є мішенню для miR-124 і пригнічує ріст нейритів [3].
Нейротоксичність: Neuro-2a також використовується для оцінки токсичного впливу ліків, хімічних речовин або факторів навколишнього середовища на нервові клітини. Наприклад, у дослідженні, проведеному Чжихон Інь (Zhihong Yin) та його колегами, вивчалася нейротоксичність бісфенолу А (BPA), хімічної речовини з навколишнього середовища, за допомогою клітин Neuro-2a. Вони виявили, що БФА пригнічує диференціацію та проліферацію клітин нейронів, порушуючи їхню клітинну та синаптичну цілісність [4].
Скринінг ліків: Клітини Neuro-2a також використовуються для оцінки терапевтичної активності деяких лікарських засобів, сполук та природних продуктів. Наприклад, в одному дослідженні за допомогою клітин Neuro-2a вивчали антиоксидантний потенціал екстракту рослини гінгко білоба. Більше того, дослідження припустило, що він викликає зниження агрегації Aβ і може бути потенційним засобом для лікування хвороби Альцгеймера [5].

430,00 EUR*

Вміст: 1.5 milliliter

Ціни без урахування податків та витрат на доставку

cryovial

Номер продукту: 400394

5. Наукові публікації за участю клітин лінії Neuro-2a

Пропонуємо вашій увазі кілька цікавих наукових публікацій за участю клітин лінії Neuro-2a.

Піпериноподібні алкаміди з Piper nigrum індукують промотор BDNF та сприяють росту нейритів у клітинах Neuro-2a

У цьому дослідженні, опублікованому в Journal of Natural Medicines, 2018, вивчався терапевтичний вплив алкамідів, виділених з білого перцю (P. nigrum), на нейронні клітини Neuro-2a.

Зниження регуляції Nkx2. 1 бере участь у патології мозку, спричиненій надлишком ретиноєвої кислоти

Дослідження, опубліковане в Acta Biochimica et Biophysica Sinica, 2020, припускає, що ген Nkx2.1 відіграє важливу роль у розвитку мозку мишей, регулюючи сигнальний каскад Shh.

Вплив бісфенолу А викликає нейротоксичність, пов'язану з синаптичною та цитоскелетною дисфункцією в клітинах нейро-2a

Ця стаття була опублікована в журналі Toxicology and Industrial Health (2023) і припускає, що хімічна речовина з навколишнього середовища, бісфенол А, викликає нейротоксичність у клітинах нейро-2a і порушує їх синаптичну та цитоскелетну дисфункцію.

Модуляція гексареліном шляхів MAPK та PI3K/Akt у клітинах нейро-2A інгібує індуковану перекисом водню апоптотичну токсичність

У цій статті в журналі Pharmaceuticals (2021) запропоновано препарат гексарелін, який модулює каскад PI3K/AKT та MAPK у клітинах нейробластоми (Neuro-2a) та інгібує індукований перекисом водню апоптоз клітин Neuro-2a.

Етанольний екстракт плодів Emblica officinalis пригнічує нейрозапалення в мікроглії та сприяє росту нейритів у клітинах Neuro2a

У цій науковій статті в журналі "Доказова комплементарна та альтернативна медицина" (2021) припускається, що екстракт плодів Emblica officinalis пригнічує нейрозапалення в клітинах Neuro-2a і, таким чином, може бути корисним при нейрозапальних захворюваннях.

6. Ресурси для клітин Neuro-2a: Протоколи, відео та інше

Нижче наведені онлайн-ресурси, що стосуються клітин Neuro-2a. Вони включають культуру клітин Neuro-2a та протокол трансфекції.

Протокол трансфекції Neuro-2a: Клітини Neuro-2a є придатними для трансфекції. За цим посиланням ви можете ознайомитися з протоколом трансфекції клітинної лінії. Ефективність трансфекції Neuro-2a залежить від реагенту.

Наступне посилання містить протокол культури клітин Neuro-2a.

Протокол культивування клітин Neuro-2a: За цим посиланням ви можете ознайомитися з протоколом субкультивування клітин Neuro-2a.
Клітини Neuro-2a: Сайт містить вичерпну інформацію про живильні середовища для клітин Neuro-2a, щільність посіву, а також протоколи субкультивування та поводження з кріоконсервованими і проліферуючими культурами.

Посилання

Лулевич, В. та ін., Механіка одноклітинних клітин забезпечує чутливі та кількісні засоби для дослідження взаємодії амілоїд-бета-пептиду та нейрональних клітин. Proc Natl Acad Sci U S A, 2010. 107(31): p. 13872-7.
You, Q. та ін. Роль miR-124 в регуляції індукованої ретиноєвою кислотою диференціації клітин Neuro-2A. Neural Regen Res, 2020. 15(6): p. 1133-1139.
Су, X. та ін., Рецептор гамма-рецептора ретиноєвої кислоти є мішенню мікроРНК-124 та інгібує ріст нейритів. Нейрофармакологія, 2020. 163: p. 107657.
Yin, Z. та ін., Вплив бісфенолу-А індукує нейротоксичність та асоціюється з синапсом та цитоскелетом у клітинах Neuro-2a. Токсикологія in vitro, 2020. 67: p. 104911.
Чен, Л. та ін., Екстракт гінгко білоба (EGb) інгібує окислювальний стрес у клітинах нейро 2А, що гіперекспресують APPsw. BioMed research international, 2019. 2019.