Клітини NCI-H1299: Дослідження та клінічне значення клітин раку легенів NCI-H1299
NCI-H1299 - це імморталізована лінія клітин недрібноклітинного раку легенів людини, яка широко використовується в імунній онкології, онкології та дослідженнях з розробки ліків. Крім того, дослідники використовують ці клітини для вивчення чутливості до ліків, основних сигнальних шляхів та молекулярних механізмів, пов'язаних з раком легенів. Крім того, ці клітини використовуються для вивчення вірусних інфекцій, таких як SARS-CoV-2.
Загальні характеристики та походження клітин NCI-H1299
Перше, що потрібно знати про клітинну лінію - це її походження та загальні характеристики, оскільки вони допоможуть вам розробити план її використання у ваших дослідженнях. Цей розділ статті допоможе вам дізнатися деяку важливу інформацію про походження та характеристики NCI-H1299. Наприклад, що таке клітини раку легенів NCI-H1299? Яким типом клітин є NCI-H1299? Який розмір клітин NCI-H1299? Яка різниця між A549 і NCI-H1299?
- Клітинна лінія NCI-H1299 була отримана з метастазів у лімфатичних вузлах легень 43-річного хворого на рак чоловіка європеоїдної раси.
- Ці клітини мають гомозиготну часткову делецію гена р53, тобто не експресують білок р53. Відсутність експресії білка р53 NCI-H1299 сприяє проліферації клітин раку легенів H1299.
- Крім р53, ці імморталізовані клітини, як повідомляється, мають мутацію NCI-H1299 KRAS, що відповідає за їх ріст, проліферацію, міграцію та інвазивні властивості.
- Каріотип NCI-H1299 близький до диплоїдного.
- Клітини NCI-H1299 мають епітеліальну морфологію.
- Ці клітини сплющені і мають товщину менше 5 мкм.
NCI-H1299 і A549
NCI-H1299 і A549 - це клітинні лінії недрібноклітинного раку легенів. Клітини NCI-H1299 більш агресивні та чутливі порівняно з A549. Обидві мають відносно схожі мутації, такі як KRAS. Однак, на відміну від клітин NCI-H1299, клітини A549 експресують ген P53.
Інформація про культивування
Підтримувати культуру клітинної лінії нелегко, якщо ви не знаєте всієї ключової інформації про неї: Який час подвоєння NCI-H1299? Яка щільність посіву NCI-H1299? Що таке клітинне середовище NCI-H1299? Як культивувати клітинні лінії NCI-H1299? Цей розділ допоможе вам знайти відповіді на всі ці питання про культивування клітин NCI-H1299.
Ключові моменти для культивування клітин NCI-H1299
|
Час подвоєння: |
Час подвоєння клітин NCI-H1299 становить 22-30 годин. |
|
У прикріпленому стані або в суспензії: |
NCI-H1299 є адгезивною клітинною лінією. |
|
Коефіцієнт субкультивування: |
Клітини NCI-H1299 субкультивують у рекомендованому співвідношенні від 1:3 до 1:6. Для посіву адгезивні клітини промивають 1х PBS і інкубують з пасажним розчином Accutase протягом 8-10 хвилин при кімнатній температурі. Відокремлені клітини додають до свіжого живильного середовища і центрифугують. Потім осад клітин ресуспендують, а клітини переливають у нові колби з живильним середовищем. |
|
Поживне середовище: |
RPM1 1640 є ідеальним клітинним середовищем NCI-H1299. До нього додають 10% фетальної сироватки великої рогатої худоби, 4500 мг/л глюкози, 2,0 мМ L-глутаміну, 1 мМ пірувату натрію, 1500 мг/л NaHCO3 і 10 мМ HEPES. Поживне середовище слід оновлювати кожні 2-3 рази на тиждень. |
|
Умови росту: |
Культури клітин раку легенів NCI-H1299 підтримують у зволоженому інкубаторі при 37°C з 5% подачею CO2. |
|
Зберігання: |
Клітинну лінію NCI-H1299 можна зберігати в паровій фазі рідкого азоту або в наднизькотемпературних морозильних камерах при температурі нижче -150°C протягом тривалого часу. |
|
Процес заморожування та середовище: |
CM-1 або CM-ACF - це середовища для заморожування клітин NCI-H1299. Клітини заморожуються за допомогою повільного процесу заморожування, який дозволяє знижувати температуру лише на 1 градус за хвилину, щоб захистити життєздатність клітин. |
|
Процес розморожування: |
Заморожені клітини NCI-H1299 швидко перемішують на попередньо нагрітій водяній бані при 37 градусах Цельсія протягом 40-60 секунд, поки не залишиться невеликий шматочок льоду. Розморожені клітини додають до свіжого середовища і можна безпосередньо культивувати в нових колбах або центрифугувати. У першому випадку середовище слід замінити через 24 години інкубації. Центрифугування допомагає видалити елементи середовища, що замерзають. Після цього зібрані клітини ресуспендують у свіжому середовищі і переносять у нову колбу для культивування. |
|
Рівень біобезпеки: |
Для роботи з культурою клітин NCI-H1299 необхідна лабораторія з рівнем біобезпеки 1. |
Придбайте клітинну лінію NCI-H1299: високоякісні дослідницькі інструменти для вивчення біології раку легенів
Переваги та недоліки клітин NCI-H1299
Як і інші ракові клітинні лінії людини, NCI-H1299 також має деякі відмінні характеристики, пов'язані з певними перевагами та недоліками. Нижче ми підсумували кілька найважливіших з них.
Переваги
Основними перевагами недрібноклітинного раку легенів NCI-H1299 є наступні:
-
Модель раку легенів in vitro
Клітинні лінії NCI-H1299 були отримані з метастазів карциноми легень у лімфатичні вузли і тому мають відносно схожі властивості. Тому ці клітини можуть слугувати моделлю in vitro для дослідження біології раку легенів, клітинних і молекулярних механізмів, а також для скринінгу та тестування потенційних терапевтичних засобів.
-
Легко культивувати
Клітини NCI-H1299 легко культивувати і підтримувати в дослідницькій лабораторії. Немає ніяких складних вимог до культури клітин і процедур.
-
NCI-H1299 P53 та NCI-H1299 KRAS мутація
У клітинах NCI-H1299 відсутня експресія гена p53, що дозволяє клітинам інтенсивно проліферувати. Крім того, вони мають мутацію KRAS, яка сприяє росту, проліферації, інвазії та міграції клітин. З огляду на це, дослідники використовують клітини H1299 для вивчення молекулярних механізмів, пов'язаних з мутаціями KRAS і P53.
Недоліки
Недоліками клітин NCI-H1299 є
-
Тканинна специфічність
Клітини NCI-H1299 походять з легеневої тканини. Тому їх застосування здебільшого обмежується дослідженнями карциноми легень. Він може не повністю відображати гетерогенність та загальні характеристики інших типів раку.
Застосування клітин NCI-H1299 в дослідженнях
Клітинна лінія NCI-H1299 широко використовується в дослідженнях раку легенів. Кілька перспективних застосувань цієї клітинної лінії згадуються тут.
- Біологія раку: Клітини NCI-H1299 слугують чудовим дослідницьким інструментом для вивчення розвитку та прогресування раку, а також пов'язаних з ним клітинних та молекулярних механізмів. Ці клітини містять певні мутації, що дозволяє дослідникам вивчати поведінку ракових клітин, сигнальні шляхи та профілі експресії генів. Кілька досліджень використовували клітинну лінію недрібноклітинного раку легенів NCI-H1299 для вивчення біології раку легенів. Наприклад, дослідження, проведене в 2018 році, вивчало сигнальний шлях, задіяний в апоптозі клітин раку легенів, використовуючи клітини NCI-H1299. Дослідники виявили, що шлях PI3K/AKT сприяє проліферації клітин, а його пригнічення може спричинити загибель ракових клітин [1]. Аналогічно, в іншому дослідженні вивчалися механізми, задіяні в епітеліально-мезенхімальному переході (ЕМТ) клітин NCI-H1299. У цьому дослідженні було припущено, що позаклітинний білок SPARC (секретований білок, кислий і багатий на цистеїн) сприяє ЕМТ і міграції NCI-H1299 і, таким чином, сприяє пухлиноутворенню в клітинах - білок SPARC діє як посередник сигналізації TGF-β1 [2].
- Відкриття та скринінг ліків: NCI-H1299, клітинна лінія раку легенів людини, широко використовується для оцінки токсичності та ефективності потенційних лікарських засобів. Крім того, вона використовується дослідниками для вивчення механізму дії протипухлинних препаратів. Дослідження також використовують ці клітини для виявлення можливих мішеней для ліків і механізмів резистентності. Наприклад, дослідження, проведене Сяо-Юн Шеном (Xiao-Yun Shen) та його колегами, вивчало протираковий потенціал природної сполуки бруцеїну D (BD). Результати показали, що BD значно пригнічує проліферацію, інвазію та міграцію клітин NCI-H1299. Тому його можна розглядати як потенційну ад'ювантну терапію для лікування недрібноклітинного раку легень [3]. Аналогічно, в одному дослідженні оцінювали цитотоксичну дію ксантогумолу окремо та в комбінації з хіміотерапевтичним препаратом цисплатином на клітини раку легенів NCI-H1299 [4].
Наукові публікації за участю клітин лінії NCI-H1299
Деякі найважливіші та найбільш цитовані наукові публікації про клітинну лінію карциноми легень NCI-H1299 знаходяться тут.
Стаття опублікована в журналі Human and Experimental Toxicology (2021). Дослідження показало, що індол-3-карбінол індукує апоптоз у клітинах H1299 шляхом підвищення рівня активних форм кисню (АФК).
Це дослідження було опубліковане у 2018 році в журналі Cellular Physiology and Biochemistry. Результати дослідження показали, що комбінація кофеїнової кислоти та паклітакселу чинить синергічний протираковий ефект на клітинну лінію недрібноклітинного раку легенів NCI-H1299.
Стаття опублікована в журналі Molecular Medicine Reports (2018). У дослідженні оцінювали протипухлинну дію тубімозиду-1, тритерпеноїдного сапоніну, та механізми, що лежать в його основі, на клітинній лінії NCI-H1299.
Пристимерин індукує апоптоз і пригнічує проліферацію та міграцію в клітинах раку легенів H1299
У статті, опублікованій в Journal of Cancer (2020), висловлено припущення, що пристимерин, природна сполука, пригнічує проліферацію та міграцію клітин NCI-H1299.
Механізм регуляції геном VIPR1 клітин аденокарциноми легень H1299 людини
У цьому дослідженні, опублікованому в журналі Medical Oncology (2019), вивчався потенційний вплив надекспресії гена VIPR1 на клітинну лінію аденокарциноми легень NCI-H1299.
Ресурси для клітинної лінії NCI-H1299: Протоколи, відео та інше
Ось кілька онлайн-ресурсів, присвячених клітинам лінії NCI-H1299.
- Трансфекція NCI-H1299: Це відео пояснює протокол транзиторної трансфекції клітинних ліній NCI-H1299.
- Субкультивування адитивної клітинної лінії: Це відео допоможе вам дізнатися про загальну процедуру субкультивування адитивної клітинної лінії.
Наступне посилання містить інформацію про культуру клітин для клітин NCI-H1299.
- Клітинна лінія NCI-H1299: Це посилання допоможе вам дізнатися про протокол пасажування та трансфекції клітин NCI-H1299.
Часті запитання про клітинну лінію NCI-H1299
Список використаних джерел
- Gu, J. та ін., Дослідження індукованого EGCG апоптозу в клітинах раку легенів шляхом пригнічення сигнального шляху PI3K/Akt. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): p. 4557-4563.
- Sun, W. та ін., SPARC діє як медіатор TGF-β1 у просуванні епітеліально-мезенхімального переходу в клітинах раку легенів A549 та H1299. Біофактори, 2018. 44(5): p. 453-464.
- Shen, X.-Y. та ін., Дослідження механізму дії бруцеїну D у лікуванні клітин недрібноклітинного раку легенів H1299. Всесвітній журнал традиційної китайської медицини, 2020. 6(4): p. 500.
- Лонг Б. та ін. Цитотоксичні ефекти ксантогумолу та його комбінації з цисплатином на клітини метастатичного раку легенів людини H1299. Журнал досягнень медицини і медичних досліджень, 2019. 30(9): p. 1-15.