Клітинна лінія LNCaP: Ключ до прориву в лікуванні раку простати

Клітинна лінія LnCaP є наріжним каменем у дослідженнях раку, особливо у вивченні раку передміхурової залози. Її широке застосування в цій галузі пояснюється її корисністю для розуміння біологічних основ раку передміхурової залози та оцінки ефективності потенційних терапевтичних втручань. Ця стаття має на меті надати фундаментальне розуміння клітинної лінії LNCaP (карцинома лімфатичних вузлів простати), забезпечивши дослідників основною інформацією, необхідною для початку роботи з цією клітинною лінією.

Характеристики та походження клітин LNCaP

Клітинна лінія LNCaP, визнана за свою актуальність у дослідженнях раку простати, має унікальні характеристики та походження, які є ключовими для розуміння дослідниками:

Походження: Клітини LNCaP були вперше виділені в 1977 році з метастатичного лімфатичного вузла 50-річного чоловіка європеоїдної раси з раком простати, а саме з лівої надключичної ділянки.
Чутливість до андрогенів: Ці клітини характеризуються чутливістю до андрогенів - особливістю, яка сприяла розвитку двох значних підліній з оригінальних клітин LNCaP: LNCaP-G4, відомої своєю високою чутливістю до андрогенів, та LNCaP-E9, що відрізняється низькою чутливістю до андрогенів. Ці підлінії є універсальним інструментом для дослідження нюансів раку передміхурової залози.
Морфологія: Клітини LNCaP мають епітеліальну форму і здатні рости як в агрегатах, так і поодинокими клітинами, пропонуючи універсальну модель для вивчення міжклітинних взаємодій і морфології ракових клітин.
Розмір: Середній діаметр клітин раку передміхурової залози LNCaP становить приблизно 18 мкм - деталь, яка допомагає в мікроскопічному дослідженні та характеристиці цих клітин.
Хромосомний склад: Клітинна лінія є анеуплоїдною, зі змінним хромосомним числом від 76 до 91, що відображає генетичну нестабільність, яка часто спостерігається в ракових клітинах.
Онкогенний потенціал: При введенні самцям атимічних голих мишей клітини LNCaP демонструють 58% частоту утворення підшкірних пухлин, що підкреслює їх корисність у моделях раку передміхурової залози in vivo.

Детальне розуміння походження, характеристик та корисності LNCaP-клітин у дослідженнях створює міцний фундамент для вчених, які починають вивчати рак передміхурової залози, сприяючи обґрунтованому плануванню експериментів та інтерпретації отриманих результатів.

Клітини передміхурової залози в СЕМ.

Культивування клітин LNCaP: Основні принципи

Початок досліджень з LNCaP, відомою клітинною лінією раку передміхурової залози, вимагає глибокого розуміння основ її культивування. Нижче наведено найважливіші аспекти, які слід враховувати для ефективного культивування клітин LNCaP:

Час подвоєння популяції: Клітини LNCaP демонструють середній час подвоєння від 48 до 60 годин, що вказує на період, необхідний для подвоєння клітинної популяції за оптимальних умов.
Характеристика росту: ці клітини є адгезійними, мають тенденцію до моношарового росту, утворюючи при цьому характерні клітинні кластери, що є важливою ознакою для моніторингу здоров'я та злиття клітин.
Щільність посіву: Рекомендується висівати клітини LNCaP з щільністю 1-2 x 10^4 клітин/см^2. Протокол передбачає промивання клітин PBS, відділення їх за допомогою Accutase з подальшим центрифугуванням. Потім клітини ресуспендують і культивують у свіжому живильному середовищі в нових колбах.
Оптимальне живильне середовище: Найкращим середовищем для культивування LNCaP є EMEM, збагачене 2,5 мМ L-глутаміну і 10% фетальної сироватки великої рогатої худоби (FBS). Для підтримання оптимальних умов росту рекомендується оновлювати середовище кожного третього дня.
Середовище длякультивування: Клітини LNCaP процвітають у зволоженому інкубаторі при температурі 37°C з 5% CO2, в умовах, які максимально наближені до середовища in vivo.
Зберігання клітин: Для довготривалого збереження клітини LNCaP слід зберігати в паровій фазі рідкого азоту, що забезпечує їх життєздатність для майбутніх експериментів.
Методи заморожування та розморожування: Використовуючи середовище для заморожування CM-1 або CM-ACF, клітини LNCaP слід заморожувати поступово, щоб мінімізувати термічний шок. Після розморожування, яке найкраще проводити на водяній бані при 37°C, поки не залишиться лише невелика крижана грудка, клітини слід негайно ресуспендувати в живильному середовищі, центрифугувати, щоб видалити заморожувальне середовище, а потім перенести в культуральну колбу.
Міркуваннящодо біобезпеки: Культивування клітин LNCaP вимагає дотримання протоколів біобезпеки рівня 1, що забезпечують безпечне та ефективне поводження з ними.

Ці настанови слугують основою для створення та підтримання культур клітин LNCaP, сприяючи отриманню надійних та відтворюваних результатів у дослідженнях раку передміхурової залози.

Клітини LNCaP при низькій та високій конвергенції.

Переваги та недоліки використання клітинної лінії LNCaP

Клітинна лінія LNCaP, наріжний камінь у дослідженні раку передміхурової залози, має унікальний набір характеристик, які створюють як переваги, так і виклики у її застосуванні. У цьому розділі описано основні переваги та потенційні недоліки, пов'язані з клітинами LNCaP.

Переваги

Простота культивування: Клітини LNCaP надзвичайно зручні у вирощуванні та підтримці в лабораторних умовах. Ця доступність зробила їх кращим вибором для різних застосувань, включаючи скринінг лікарських засобів і фармакологічне тестування.
Чутливість до андрогенів: Відмінною рисою клітин LNCaP є їх залежність від андрогенів, що характеризується експресією андрогенних рецепторів (AR). Ця особливість робить їх безцінною моделлю in vitro для вивчення динаміки андрогензалежного раку передміхурової залози, надаючи уявлення про прогресування захворювання та потенційні терапевтичні мішені.

Недоліки

Швидкість росту: Одним з обмежень клітин LNCaP є їх відносно повільна швидкість проліферації. Ця характеристика може створювати проблеми в експериментальних проектах, які вимагають швидкого росту клітин або високої пропускної здатності протягом обмеженого часу.
Агрегація клітин: Клітини LNCaP мають схильність до утворення агрегатів або кластерів, що може вносити варіабельність і ускладнювати інтерпретацію даних у певних клітинних аналізах, особливо тих, що покладаються на рівномірний розподіл клітин або одноклітинний аналіз.

Розуміння цих особливостей клітинної лінії LNCaP має вирішальне значення для дослідників, щоб використовувати її переваги, пом'якшуючи вплив її обмежень, тим самим оптимізуючи потенціал клітинної лінії в просуванні досліджень раку простати.

Застосування андроген-чутливих клітин LNCaP в дослідженнях

Клітини LNCaP, отримані з раку передміхурової залози людини, слугують важливим інструментом у різних сферах досліджень. Їх корисність зумовлена андрогензалежною природою та здатністю моделювати специфічні аспекти біології раку простати. Основні сфери застосування включають

Дослідження раку простати

Дослідження андрогенних рецепторів

Клітини LNCaP, як і багато пухлинних клітин простати, виявляють чутливість до андрогенів, які є критичними факторами росту раку простати. Ця чутливість використовується в терапевтичних цілях за допомогою стратегій позбавлення андрогенів, таких як абляція андрогенів або застосування антиандрогенів, таких як флутамід. Ефективність цих методів лікування часто контролюється шляхом придушення специфічних антигенів і пригнічення проліферації клітин. Однак поява резистентного раку передміхурової залози є значною проблемою, часто після відміни антиандрогенів, що може призвести до метастатичного захворювання.

Мутації відіграють ключову роль у механізмах адаптації та резистентності клітин LNCaP. Точкові мутації, особливо в гені андрогенного рецептора, були ідентифіковані та вивчені за допомогою таких методів, як полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) та транскриптомний аналіз. Ці мутації можуть впливати на реакцію клітин на депривацію андрогенів та антиандрогенну терапію, що ускладнює лікування поширеного раку передміхурової залози.

Відкриття ліків

Терапевтичний скринінг

Дослідження з використанням клітин LNCaP вийшли за рамки традиційної гормональної терапії і спрямовані на вивчення нових методів лікування. Предметом інтересу є внутрішньоклітинна доставка ліків, спрямована на специфічні шляхи в цих клітинах, цитотоксичність сполук, таких як ripl, а також вплив таких агентів, як амігдалін і клоргілін. Ці дослідження спрямовані на пошук нових методів зупинки метастатичного процесу, контролю прогресування клітинного циклу та індукції зупинки клітинного циклу в клітинах раку передміхурової залози, що дає надію на більш ефективні методи лікування прогресуючих і резистентних форм захворювання.

Клінічне значення

Метастатичний потенціал клітин LNCaP, зокрема їх здатність імітувати метастатичний процес у таких місцях, як надключичні лімфатичні вузли, робить їх безцінними для вивчення поширення раку простати. Розуміння геномного і транскриптомного ландшафту цих клітин, включаючи роль геномної ДНК людини в їхній поведінці, має вирішальне значення для розробки стратегій профілактики або лікування метастатичного раку простати.

430,00 EUR*

Вміст: 1.5 milliliter

Ціни без урахування податків та витрат на доставку

cryovial

Номер продукту: 300265

Покращуйте свої дослідження з нашоюклітинною лінією LnCaP та її похіднимклоном LnCaP FGC

Ресурси та результати досліджень клітин LNCaP

Доступ до високоякісних клітинних ліній LNCaP та їх детальних генетичних і фенотипічних даних має вирішальне значення для дослідників. Численні біорепозитарії та наукові установи пропонують ці життєво важливі ресурси, що дає можливість дослідникам проводити ретельні та важливі дослідження раку простати та суміжних галузей.

Варті уваги наукові публікації за участю клітин LNCaP

Клітинна лінія LNCaP відігравала центральну роль у численних результативних дослідженнях у сфері вивчення раку простати. Нижче наведені деякі відомі публікації, в яких клітини LNCaP використовувалися як ключова дослідницька модель:

Націлювання CRISPR/Cas9 на андрогенний рецептор пригнічує ріст клітин раку передміхурової залози людини LNCaP: Це дослідження, опубліковане в журналі Molecular Medicine Reports у 2018 році, висвітлює потенціал CRISPR/Cas9 як терапевтичного інструменту для пригнічення росту клітин LNCaP шляхом націлювання на андрогенний рецептор.
Фітохімічний аналіз стебел Daphne pontica L. з їх проапоптотичними властивостями проти клітин раку простати DU-145 та LNCaP: Ця публікація в журналі DARU Journal of Pharmaceutical Sciences доводить протиракову здатність Daphne pontica L. проти клітин LNCaP та DU-145.
Синергічні протипухлинні ефекти ліраглутиду, агоніста рецептора глюкагоноподібного пептиду-1, разом з доцетакселом на клітинну лінію раку передміхурової залози LNCaP: Це дослідження, опубліковане в Європейському журналі фармакології у 2020 році, вивчає потужну протипухлинну синергію між ліраглутидом і доцетакселом на клітинах LNCaP.
Визначення потенційних протипухлинних ефектів Coriandrum sativum на клітинах раку передміхурової залози PC-3 та LNCaP: Згідно з публікацією 2018 року в Journal of Cellular Biochemistry, екстракт Coriandrum sativum демонструє багатообіцяючі протипухлинні ефекти на клітини LNCaP шляхом модуляції ключових генів клітинного циклу.
Нокдаун STEAP1 пригнічує ріст клітин та індукує апоптоз у клітинах раку передміхурової залози LNCaP, протидіючи дії андрогенів: У цій статті з журналу Molecular Oncology Journal за 2018 рік обговорюється, як приглушення гіперекспресії гена STEAP1 в клітинах LNCaP може перешкоджати росту клітин раку передміхурової залози і викликати апоптоз.

Клітини LNCaP: Протоколи, навчальні посібники та інше

LNCaP, широко використовувана клітинна лінія раку передміхурової залози, підтримується великою кількістю ресурсів, включаючи детальні протоколи культивування та трансфекції:

Трансфекція клітинної лінії LNCaP: Цей документ пропонує вичерпний посібник з протоколів пасажування та трансфекції клітин LNCaP

Поширені запитання про клітини LNCaP

Список використаних джерел

Кастанарес М.А. та ін., Характеристика нової метастатичної клітинної лінії раку передміхурової залози походження LNCaP. Простата, 2016. 76(2): p. 215-225.
Ігучі К. та ін., Виділення та характеристика субліній LNCaP, що відрізняються за чутливістю до гормонів. Журнал андрології, 2007. 28(5): p. 670-678.
Wei, C. та ін., Націлювання CRISPR/Cas9 на андрогенний рецептор пригнічує ріст клітин раку передміхурової залози людини LNCaP. Доповіді з молекулярної медицини, 2018. 17(2): p. 2901-2906.
Гомес І.М. та ін. Нокдаун STEAP1 пригнічує ріст клітин та індукує апоптоз у клітинах раку передміхурової залози LNCaP, протидіючи дії андрогенів. Медична онкологія, 2018. 35: p. 1-10.
Тусі, М. С. та ін., Оцінка апоптотичних ефектів наночастинок оксиду заліза, покритих mPEG-b-PLGA, як носія еупаторину, на клітинах раку простати людини DU-145 та LNCaP. Журнал фармацевтичного аналізу, 2021. 11(1): p. 108-121.