Клітинна лінія INS-1

INS-1 - це добре охарактеризована клітинна лінія інсуліноми щурів, яка широко використовується в дослідженнях діабету. Клітини INS-1 секретують інсулін при стимуляції глюкозою, тому їх використовують для вивчення метаболізму глюкози, фізіології бета-клітин та регуляції секреції інсуліну. Крім того, ці клітини також використовуються для скринінгу, тестування та розробки потенційних терапевтичних засобів проти цукрового діабету.

Ця стаття надасть вам всю необхідну інформацію про бета-клітини INS-1, яку ви повинні знати перед тим, як використовувати їх у своїх дослідженнях. Головним чином, ви дізнаєтесь наступне:

Загальні характеристики та походження клітин INS-1
Клітинна лінія INS-1: Інформація про культивування
Переваги та недоліки клітинної лінії INS-1
Дослідницькі застосування клітин інсуліноми щурів INS-1
Наукові публікації за участю бета-клітин INS-1
Ресурси по клітині INS-1: Протоколи, відео та інше

1. Загальні характеристики та походження клітин INS-1

Знання загальних характеристик та походження клітинної лінії може значно допомогти вам ефективно використовувати її у ваших дослідженнях. У цьому розділі статті ви дізнаєтесь про походження та загальні характеристики INS-1. Ви дізнаєтесь Що таке клітинні лінії інсуліноми щурів INS-1? Які загальні характеристики INS-1? Що таке клітинна лінія INS-1 832/3? Що таке INS-1E?

Клітини INS-1 були спочатку виділені з 666-денного щура з індукованою рентгенівським випромінюванням трансплантованою інсуліномою.
Клітини INS-1 є бігормональними. Вони одночасно експресують білки інсуліну та проглюкагону. Ці клітини вважаються незрілими, оскільки демонструють низький рівень експресії фактора транскрипції Nkx6.1 і позбавлені альфа-клітинних маркерів [1].
Існує два субклони клітин INS-1 - INS-1E та INS-1 832/3.
INS-1E відрізняється від батьківської клітинної лінії INS-1 щодо секреторних реакцій на вміст глюкози та інсуліну.
INS-1 832/3 або INS-1 832/13 також є субклоном клітинної лінії INS-1. Це безцінна модель для вивчення функції бета-клітин острівцевих клітин підшлункової залози та регуляції секреції інсуліну. Він також відрізняється від батьківських клітин INS-1 в контексті глюкозо-стимульованої секреції інсуліну (GSIS).

3D-моделювання інсулінопосередкованого поглинання глюкози.

2. Клітинна лінія INS-1: Інформація про культивування

Щоб ефективно працювати з клітинною лінією та підтримувати її в належному стані, необхідно знати наступну інформацію про її культивування. У цьому розділі статті ви дізнаєтеся про всі ключові моменти культивування клітин INS-1: Як культивувати бета-клітини INS-1? Що таке протокол культивування клітин INS-1? Який час подвоєння клітин INS-1? Що таке середовище для культивування клітин інсуліноми INS-1 щурів?

Ключові моменти для культивування клітин INS-1

Час подвоєння:	Час подвоєння популяції клітин INS-1 становить приблизно 44 години.
Прикріплені або в суспензії:	Клітини INS-1 ростуть як в суспензії, так і в адгезійній формі.
Коефіцієнт субкультивування:	Клітини INS-1 субкультивують у співвідношенні 1:3. Спочатку збирають суспендовані клітини. Адгезивні клітини промивають PBS та інкубують з розчином аккутази. Після відокремлення клітин додають свіже середовище. Потім суспендовані та прилиплі клітини центрифугують і збирають. Клітини обережно ресуспендують і розподіляють у нові колби для росту.
Поживне середовище:	RPM1 1640 використовується для культивування клітинної лінії інсуліноми INS-1rat. До середовища додають 10% термоінактивованої фетальної сироватки великої рогатої худоби, 2,1 мМ стабільного глутаміну, 10 мМ HEPES, 2,0 г/л NaHCO3 та 1 мМ пірувату натрію.
Умови вирощування:	Клітини INS-1 зберігають у зволоженому інкубаторі при температурі 37°C та постійному надходженні 5% CO2.
Зберігання:	Бета-клітини INS-1 можна зберігати в паровій фазі рідкого азоту або при температурі нижче -150°C в електричному морозильнику протягом тривалого часу.
Процес заморожування і середовище:	Для заморожування клітин INS-1 використовують середовища CM-1 або CM-ACF, які застосовують повільний процес заморожування. Це дозволяє знижувати температуру лише на 1°C за хвилину, щоб захистити життєздатність клітин.
Процес розморожування:	Заморожені клітини INS-1 розморожують на водяній бані при температурі 37 градусів Цельсія протягом 40-60 секунд. Після розморожування клітини додають до свіжого середовища і безпосередньо переливають у нову колбу для росту. Через 24 години середовище замінюють для усунення компонентів, що замерзли.
Рівень біобезпеки:	Для культивування клітин інсуліноми щурів INS-1 необхідний рівень біобезпеки 1.

Клітини INS-1 ростуть острівцями при 10-кратному та 20-кратному збільшенні.

3. переваги та недоліки клітинної лінії INS-1

Як і інші клітинні лінії, INS-1 також має деякі особливості, пов'язані з певними перевагами та недоліками. Нижче ми розповімо про деякі з них.

Переваги

Основними перевагами клітинної лінії INS-1 є

Добре охарактеризована
INS-1 - це добре вивчена і добре охарактеризована клітинна лінія. Вона була використана в численних наукових дослідженнях. Вона зберігає свої фенотипічні характеристики та здатність до секреції інсуліну протягом тривалого періоду, забезпечуючи таким чином надійні та послідовні результати експериментів.
Модель бета-клітин
Клітини INS-1 використовуються для вивчення функції бета-клітин острівцевих клітин підшлункової залози, оскільки вони секретують інсулін і реагують на коливання рівня глюкози.

недоліки

Недоліками клітин INS-1 є

Нелюдське походження
Бета-клітини INS-1 мають нелюдське походження. Вони були отримані з інсуліноми щурів. Це може спричинити видоспецифічні відмінності і обмежити пряме перенесення експериментальних результатів на фізіологію людини.

4 Застосування клітин інсуліноми щурів INS-1 в дослідженнях

Бета-клітини INS-1 широко використовуються в дослідженнях діабету. Нижче наведено кілька перспективних застосувань цієї клітинної лінії.

Дослідження секреції інсуліну: Клітини INS-1 мають здатність секретувати інсулін і тому широко використовуються для вивчення основних клітинних механізмів секреції інсуліну. Дослідники вивчають основні фактори, що беруть участь у вивільненні інсуліну, включаючи метаболізм глюкози, сигнальні шляхи, гормони та фармакологічні агенти. Дослідження показало, що іонний канал, залежний від К+АТФ, регулює секрецію інсуліну в бета-клітинах INS-1 [2]. Крім того, дослідження також показали, що шляхи GLP-1R та AKT/PDX1 також залучені до секреції інсуліну в клітинах інсуліноми INS-1 щурів [3].
Дослідження функції бета-клітин: Клітини INS-1 мають бета-клітини, подібні до бета-клітин острівців підшлункової залози, такі як чутливість до метаболізму глюкози та секреція інсуліну. Тому їх використовують для вивчення фізіологічних процесів і функцій бета-клітин. У дослідженні, проведеному в 2022 році, використовували клітини INS-1 і розробили модель дисфункції бета-клітин за допомогою _H2O2. Вони вивчали життєздатність клітин, секрецію інсуліну та маркери, пов'язані з окислювальним стресом, у цих клітинах у відповідь на лікування природними сполуками [4].
Відкриття та розробка ліків: Клітини інсуліноми щурів INS-1 широко використовуються для скринінгу та тестування протидіабетичних сполук або ліків. Вони можуть бути використані для вивчення потенційного впливу терапевтичних агентів на секрецію інсуліну та інші відповідні параметри. Дослідження показало, що логанін, компонент китайської трав'яної формули, захищає інсуліносекреторну функцію клітин INS-1 і має потенційний антидіабетичний ефект. Компонент опосередковував ці корисні ефекти шляхом інгібування ядерної транслокації гена FOXO1 через шлях PI3K/AKT [5].

550,00 EUR*

Вміст: 1.5 milliliter

Ціни без урахування податків та витрат на доставку

cryovial

Номер продукту: 300471

5. Наукові публікації за участю бета-клітин INS-1

Нижче наведено кілька важливих наукових публікацій за участю клітинної лінії інсуліноми щурів INS-1.

Альфа-мангостин покращує секрецію інсуліну та захищає клітини INS-1 від індукованого стрептозотоцином пошкодження

Це дослідження було опубліковане в Міжнародному журналі молекулярних наук у 2018 році. У дослідженні припускається, що жовта кристалічна природна сполука альфа-мангостин сприяє секреції інсуліну в бета-клітинах INS-1 і захищає їх від пошкодження, спричиненого токсином бета-клітин стрептозотоцином.

Потенціювання епікатехіном стимульованої глюкозою секреції інсуліну в клітинах INS-1 не залежить від його антиоксидантної активності

Це дослідження було опубліковано в журналі Acta pharmacologica sinica у 2018 році. Результати дослідження показали, що сполука епікатехіну сприяє стимулюванню секреції інсуліну, стимульованої глюкозою, у бета-клітинах INS-1 з порушенням чутливості до насичених жирних кислот шляхом активації CaMKII шляху.

Нещодавно відкритий фенілетаноїдний глікозид зі стевії ребаудіани Бертоні впливає на секрецію інсуліну в β-клітинах острівця INS-1 щурів

У цій статті в журналі Molecules (2019) висловлено припущення, що нова природна сполука фенілетаноїдного глікозиду впливає на секрецію інсуліну в клітинах інсуліноми INS-1 щурів, а отже, має антидіабетичний потенціал.

Лурейрин В сприяє секреції інсуліну через GLP-1R та AKT/PDX1 шляхи

Це дослідження було опубліковане в Європейському журналі фармакології (2022). У дослідженні припускається, що лурейрин В, натуральний продукт, посилює секрецію інсуліну в бета-клітинах острівцевих клітин підшлункової залози INS-1 шляхом модуляції шляхів AKT/PDX1 та GLP-1R.

Протиракова активність Withania coagulans in vitro проти ракових клітин HeLa, MCF-7, RD, RG2 та INS-1 та фітохімічний аналіз

У цій статті Integrative Medicine Research (2018) оцінено протираковий потенціал екстракту Withania coagulans на ракових клітинах INS-1.

6. Ресурси для клітинної лінії INS-1: Протоколи, відео та інше

Ось кілька онлайн-ресурсів, присвячених клітинам INS-1:

Субкультивування суспензії клітин: Це відео є вичерпним посібником з субкультивування клітин, що ростуть у суспензійних культурах.
Субкультивування адгезивних клітин: Це відео допоможе вам вивчити загальний протокол пасажування адгезійних клітин.

За наступним посиланням ви знайдете протокол культивування клітин INS-1:

Клітинна лінія INS-1: Цей веб-сайт містить всю інформацію про культуру клітин INS-1. Він включає інформацію про культуру клітин INS-1 та середовище для заморожування, протоколи субкультивування та поводження з кріоконсервованими та проліферуючими культурами INS-1.

Список використаних джерел

Акоста-Монтальво, А. та ін., Експресія та секреція проглюкагон-похідних пептидів у клітинах INS-1 інсуліноми щурів. Front Cell Dev Biol, 2020. 8: p. 590763.
Park, J.E. and J.S. Han, A. Екстракт Portulaca oleracea L. сприяє секреції інсуліну через K+ АТФ-канал, залежний від β-клітин підшлункової залози INS-1. Дослідження і практика харчування, 2018. 12(3): p. 183.
Fang, H. та ін., Лурейрин B сприяє секреції інсуліну через GLP-1R та AKT/PDX1 шляхи. Європейський журнал фармакології, 2022. 936: p. 175377.
Duan, J. та ін., Swietenine та swietenolide з Swietenia macrophylla king покращують секрецію інсуліну та послаблюють апоптоз в клітинах INS-1, індукованих H2O2. Екологічна токсикологія, 2022. 37(11): p. 2780-2792.
Мо, Ф.-Ф. та ін., Антидіабетична дія логаніну шляхом інгібування ядерної транслокації FOXO1 через сигнальний шлях PI3K/Akt у клітинах INS-1. Іранський журнал фундаментальних медичних наук, 2019. 22(3): p. 262.