Клітини COS-1: Клітинна робоча конячка в дослідженнях експресії генів

Клітинна лінія COS-1 - це фібробластоподібні клітини, які походять з ниркової тканини мавп і часто використовуються дослідниками для вивчення вірусу мавпячого лихоманки SV40. Ці клітини легко трансфікуються і часто використовуються для створення рекомбінантних білків для різних біохімічних, молекулярних та клітинних експериментів.

У цій статті ви отримаєте вичерпну інформацію про клітинну лінію COS-1, яка охоплює всю необхідну вам інформацію. Зокрема, ви отримаєте знання про наступне:

1. Клітинна лінія COS-1: Походження та загальна інформація.
2. Переваги та недоліки клітин COS-1
3. Застосування клітин COS-1 в дослідженнях
4. Клітини COS-1: Публікації
5. Ресурси для клітинної лінії COS-1, включаючи протоколи, відео та інше
6. Культивування клітин COS-1

1.клітинна лінія COS-1: Походження та загальна інформація.

Перед початком будь-якої роботи з клітинною лінією важливо мати фундаментальне уявлення про саму клітинну лінію. Це включає в себе таку інформацію, як походження клітин, спосіб їх виділення та характеристики. У цьому розділі ми заглибимося в основи роботи з клітинами COS-1.

Що таке клітинна лінія COS-1?

Клітинна лінія COS-1 складається з фібробластоподібних клітин, які вперше були створені J.W.F. Cowell з колегами в 1981 році. Ці клітини були отримані шляхом трансформації епітеліальної лінії клітин зеленої мавпи, відомої як CV-1, з мутантною формою вірусу симу SV40. Згодом створена клітинна лінія COS-1 була ретельно охарактеризована для відновлення ділянки геному SV40, яка раніше була видалена з початку реплікації. Ці клітини експресують великі Т-антигени та інші білки, необхідні для правильної реплікації кругових геномів, таких як плазміди.

Клітини COS-1 мають фібробластоподібну морфологію і прилипають до поверхонь, поширюючись моношаром. Наразі немає відомих генетичних варіантів клітинної лінії COS-1. Однак споріднена клітинна лінія COS-7 також походить від клітин CV-1 і має схожі характеристики.

2.переваги та недоліки клітин COS-1

Клітинна лінія COS-1 має унікальні переваги та обмеження, про які ми поговоримо нижче.

Переваги

• Сприйнятливість до трансфекції: Клітини лінії COS-1 легко трансформуються різними методами, включаючи фізичні та хімічні підходи.
• Виробництво лентивірусів: Клітинна лінія COS-1 є придатним пакувальним носієм для виробництва високоякісних рекомбінантних частинок лентивірусів без додаткових етапів очищення. Ці клітини міцно прилипають до пластикових поверхонь, що запобігає забрудненню супернатанту, який містить вірусні частинки [1].
• Експресія генів: Клітинна лінія COS-1 широко використовується для аналізу транзиторної та стабільної експресії, продукуючи багато рекомбінантних білків шляхом трансфекції циркулярними плазмідами, що містять SV40 походження реплікації [2].

Обмеження

• Нелюдська клітинна лінія: Оскільки клітини COS-1 походять від нелюдських приматів, рекомбінантні білки, що продукуються цією клітинною лінією, придатні лише для лабораторних експериментів і не можуть бути рекомендовані для використання людиною.

3.застосування клітин COS-1 в наукових дослідженнях

Одним з найбільш важливих аспектів при обговоренні клітинної лінії є її дослідницьке застосування. У цьому розділі ми розглянемо найвідоміші дослідницькі застосування клітин COS-1.

• Виробництво рекомбінантних білків: Клітинна лінія COS-1 широко використовується для отримання рекомбінантних білків шляхом транзиторної або стабільної трансфекції циркулярними векторами, що містять SV40 початок реплікації. У нещодавньому дослідженні біологи використовували клітинну лінію COS-1 для отримання хоріонічного гонадотропіну коня, рекомбінантного репродуктивного гормону для репродуктивного застосування [3]. Аналогічно, в іншому дослідженні клітини COS-1 використовували для виробництва рекомбінантних моноклональних антитіл проти певного типу вірусу грипу [4].
• Виробництво вірусоподібних частинок: Клітини COS-1 слугують пакувальними носіями для виробництва високоякісного лентивірусу і можуть бути використані для створення вірусних вакцин. В одному з досліджень клітинна лінія COS-1 використовувалася для отримання неінфекційних, але високоімуногенних вірусоподібних частинок вірусу денге, які є ефективними кандидатами на створення вакцин [5].

4.клітини COS-1: Публікації

Деякі відомі публікації, присвячені клітинам COS-1:

• Виробництво та очищення частинок, подібних до вірусу денге, з клітин COS-1: Ця публікація в журналі Bio-Protocol пояснює використання клітин COS-1 для отримання високоімуногенних частинок, подібних до вірусу денге.
• Аналіз експресії рекомбінантного хоріонічного гонадотропіну коня в трьох системах-хазяїнах - E. coli BL21C, лізаті клітин комах Sf і клітинах ссавців COS-1: У цьому дослідженні вчені порівняли продукцію та посттрансляційну модифікацію рекомбінантного репродуктивного гормону, наприклад, хоріонічного гонадотропіну коня, в різних системах експресії, включаючи клітини COS-1 ссавців.
• Дослідження флавівірусоподібних частинок, що переносяться кліщами, як системи доставки для генної терапії: У цьому дослідженні використовували клітини COS-1 для отримання частинок, подібних до вірусу кліщового енцефаліту (TBEV). Ці частинки пропонуються як шатл для доставки необхідних репліконів (тобто терапевтичних генів).
• Отримано рекомбінантне куряче моноклональне антитіло проти нейрамінідази вірусу пташиного грипу H9N2: У цій статті, опублікованій в журналі AMB Express, використовували клітини COS-1 для отримання рекомбінантних моноклональних антитіл проти нейрамінідази вірусу пташиного грипу типу H9N2.
• Солюбілізація без детергенту людських Kv-каналів, експресованих у клітинах ссавців: У цьому дослідженні клітинну лінію ссавців COS-1 використовували для експресії людських Kv-каналів для проведення деяких експериментів з солюбілізації.