Клітинна лінія BxPC-3
BxPC-3 - це клітинні лінії раку підшлункової залози, отримані від людини. Вона широко застосовується в дослідженнях раку. В основному дослідники використовують ці клітини для вивчення біології раку підшлункової залози, визначення терапевтичних мішеней та розробки протиракових препаратів.
Ця стаття містить важливу інформацію про клітинну лінію BxPC-3, яка може суттєво допомогти вам у роботі з нею. Головним чином, в ній буде розглянуто:
- Загальна інформація та походження клітинної лінії BxPC-3
- Культивування клітин BxPC-3
- Клітинна лінія BxPC-3: Переваги та обмеження
- Застосування клітин BxPC-3 в дослідженнях
- Наукові публікації про клітини BxPC-3
- Ресурси для клітинної лінії BxPC-3: Протоколи, відео та інше
1. загальна інформація та походження клітинної лінії BxPC-3
Знання про походження клітинної лінії має вирішальне значення для її застосування в дослідженнях. Ознайомлення з її характеристиками, включаючи морфологію, розмір клітин і плоїдність, робить її використання більш простим і зручним. У цій статті ви дізнаєтесь про походження та загальні характеристики клітин BxPC-3: Що таке клітини BxPC-3? Що таке клітинна лінія BxPC-3? Яке походження клітинної лінії BxPC-3? Яка морфологія BxPC-3?
- Клітини карциноми підшлункової залози людини BxPC-3 були отримані від 61-річної європейської жінки з аденокарциномою підшлункової залози в 1986 році. Ці клітини були підтверджені як пухлинні навіть після того, як пацієнтка пройшла кілька сеансів радіо- та хіміотерапії. Таким чином, створена клітинна лінія є безцінною моделлю для вивчення розвитку та прогресування раку.
- Клітини BxPC-3 мають епітеліальну морфологію.
- Кількість модальних хромосом для BxPC-3 становить 59. Ці клітини мають гомозиготну делецію на хромосомі 18q, яка кодує білок SMAD4/DPC4. Крім того, у клітинній лінії відсутня мутація BxPC-3 kras, поширена серед пухлин підшлункової залози. У цих клітинах раку підшлункової залози також виявлена делеція BxPC-3 braf.
У чому різниця між BxPC3 і PANC-1?
Клітини BxPC-3 PADC (аденокарцинома проток підшлункової залози) і PANC-1 - це первинні клітинні лінії раку підшлункової залози з епітеліальною морфологією. При цьому перші клітини мають більше епітеліальних властивостей, тоді як другі мають більше мезенхімальних ознак [1].
2. культивування клітин BxPC-3
Клітинна лінія BxPC-3 широко використовується в онкологічних лабораторіях. Для ефективного культивування цієї лінії клітин раку підшлункової залози необхідно знати наступні ключові моменти. Ви дізнаєтесь Який час подвоєння для bxpc3? Як культивувати клітинну лінію BxPC-3?
Ключові моменти для культивування клітин BxPC-3
|
Час подвоєння популяції: |
Час подвоєння клітин BxPC-3 становить від 48 до 60 годин. |
|
Адгезія або суспензія: |
BxPC-3 є адгезивною клітинною лінією. |
|
Співвідношення поділу: |
Клітини BxPC-3 субкультивують у співвідношенні від 1:2 до 1:4. Клітини промивають 1 х PBS та інкубують з пасажним розчином, який називається аккутаза. Через 8-10 хвилин до клітин додають свіже середовище, і клітини центрифугують. Осад знову ресуспендують у середовищі, а клітини переливають у нову культуральну посудину для росту. |
|
Поживне середовище: |
Для культивування клітинної лінії BxPC-3 використовується середовище RPMI 1640. До нього додають 10% фетальної сироватки великої рогатої худоби, 2,1 мМ стабільного глутаміну та 2,0 г/л NaHCO3 для досягнення ідеального росту клітин. Середовище слід замінювати 2-3 рази на тиждень. |
|
Умови вирощування: |
Культури клітин BxPC-3 підтримують у зволоженому інкубаторі при 37 °C, підключеному до 5%-го джерела СО2. |
|
Зберігання: |
Заморожені клітини зазвичай зберігають при температурі нижче -150 °C або в паровій фазі рідкого азоту для захисту життєздатності клітин. |
|
Процес заморожування і середовище: |
Для заморожування клітинних культур BxPC-3 можна використовувати CM-1 або CM-ACF. Процес заморожування відбувається повільно, з падінням температури лише на 1 °C, щоб запобігти шоковому впливу на клітини. |
|
Процес розморожування: |
Заморожені клітини BxPC-3 розморожують на попередньо встановленій водяній бані при 37 °C протягом 40-60 секунд. Після того, як залишиться невелика крижана грудка, клітини додають до свіжого культурального середовища і центрифугують, щоб видалити елементи середовища, що замерзають. Потім клітинну гранулу ресуспендують, і клітини вносять у колбу для росту. |
|
Рівень біобезпеки: |
Культури клітин BxPC-3 підтримуються в лабораторіях з рівнем біобезпеки 1. |
3. клітинна лінія BxPC-3: Переваги та обмеження
BxPC-3 - добре відома клітинна лінія аденокарциноми підшлункової залози, яка має ряд переваг і недоліків. Ключові переваги та недоліки клітинної лінії наведені нижче.
Переваги
Основними перевагами клітин BxPC-3 є:
-
Модель раку підшлункової залози in vitro
Клітини BxPC-3, отримані від пацієнтів з аденокарциномою підшлункової залози, мають відповідні характеристики, що робить їх придатною моделлю для вивчення поведінки раку підшлункової залози in vitro.
-
Туморогенна клітинна лінія
Клітини BxPC-3 мають туморогенні властивості і можуть утворювати пухлини при введенні їх голим мишам або мишам з ослабленим імунітетом. Ці пухлини дуже схожі на первинну аденокарциному підшлункової залози, що робить модель ксенотрансплантата BxPC-3 ідеальною для вивчення росту і прогресування раку.
Обмеження
Обмеження, пов'язані з клітинною лінією BxPC-3, полягають у наступному:
-
Перехресна контамінація
Клітинна лінія BxPC-3, як і будь-яка інша, несе ризик перехресної контамінації. Дослідники повинні проявляти обережність і дотримуватися суворих протоколів запобігання контамінації при роботі з цими клітинами.
-
Повільна швидкість росту
Клітини BxPC-3 демонструють відносно повільну швидкість проліферації, час подвоєння становить від 48 до 60 годин. Ця особливість може вимагати більш тривалих періодів інкубації для певних експериментів, що потенційно може спричинити затримки в ході досліджень.
4. застосування клітин BxPC-3 в дослідженнях
Клітини BxPC-3 мають багато застосувань у дослідженнях раку. Найпоширеніші з них такі:
- Дослідження раку підшлункової залози: Клітини BxPC-3 імітують аденокарциному підшлункової залози і, таким чином, використовуються для дослідження генетичних і молекулярних механізмів, що лежать в основі розвитку і росту пухлини. Крім того, за допомогою цих клітин дослідники виявляють нові біомаркери та терапевтичні мішені. Крім того, клітини BxPC-3 значною мірою експресують ангіогенні фактори - інтерлейкін-8 (IL-8), простагландин Е2 (PGE2) та фактор росту ендотелію судин (VEGF), що робить їх придатними для вивчення ангіогенезу. При цьому ангіогенез є важливим процесом, пов'язаним з ростом і метастазуванням раку. Дослідження, опубліковане в 2022 році, показало, що гіперекспресія ламініну-5 гамма-2 (LAMC2) в BxPC3 PDAC (протокова аденокарцинома підшлункової залози) посилює її пухлиноутворення шляхом регулювання сигнального шляху BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/ mTOR [2].
- Відкриття та розробка ліків: Клітинна лінія BxPC-3 слугує безцінною моделлю для тестування протиракових препаратів. Дослідники вивчають цитотоксичний, антиметастатичний та апоптотичний вплив потенційних препаратів на PDAC BxPC3. Дослідження, проведене Олександрією Тернер та її колегами у 2020 році, вивчало апоптотичні властивості екстрактів плодів Elaeocarpus reticulatus у клітинах раку підшлункової залози BxPC-3 [3]. Аналогічно, у 2020 році було проведено дослідження, яке визначило протираковий потенціал метанольного екстракту рослини Oxialis obtriangulata в клітинах BxPC-3. Крім того, дослідники також вивчили клітинний механістичний шлях, через який екстракт рослини чинить терапевтичну дію [4].
5.наукові публікації про клітини BxPC-3
У цьому розділі наведено деякі з найбільш цитованих та цікавих публікацій за участю клітинної лінії BxPC-3.
У цій публікації в журналі Chemico-Biological Interactions (2020) досліджено апоптотичний вплив природного продукту, лікокумарону, на клітини раку підшлункової залози BxPC-3.
Ця наукова стаття була опублікована в журналі Anticancer Research (2022). У дослідженні припускається, що гідроксихлорохін спричиняє загибель клітин BxPC3 шляхом інгібування гена BCL-XL.
Це дослідження було опубліковане у 2020 році в Journal of Cellular Biochemistry. У дослідженні йдеться про те, що природна сполука салідрозид виявляє протиракову активність у клітинах BxPC-3, регулюючи сигнальний каскад HIF-1α (гіпоксія-індукований фактор) та LOXL2.
Ця стаття в журналі Biomedicine & Pharmacotherapy припускає, що ібрутиніб можна використовувати як чудовий радіосенсибілізатор у пацієнтів з раком підшлункової залози. Дослідження in vitro на клітинах BxPC-3 вказують на те, що він знижує фосфорилювання EGFR BxPC3 та експресію pAKT і наступних генів, які регулюються променевою терапією.
Хелідонін індукує апоптоз через регуляцію GADD45a-p53 у клітинах раку підшлункової залози людини
У цьому дослідженні, опублікованому в журналі Integrative Cancer Therapies, припускається, що натуральний продукт, хелідонін, виявляє апоптотичну активність у клітинах підшлункової залози людини BxPC-3 шляхом регулювання сигналізації BxPC3 p53 і GADD45a.
6. ресурси для клітинної лінії BxPC-3: Протоколи, відео та інше
Клітинна лінія BxPC-3 має багато привабливих переваг, які роблять її придатною для дослідницького використання. Багато онлайн-ресурсів, присвячених клітинній лінії BxPC-3, згадують про поводження з нею, її обслуговування та протокол трансфекціїs.
- Трансфекція BxPC3: Це відео є покроковим посібником з вивчення протоколу трансфекції клітин BxPC-3.
Цей розділ статті містить деякі посилання, що пояснюють протоколи культури клітин BxPC3.
- Культура клітин BxPC3: Цей сайт допоможе вам вивчити протоколи субкультивування та поводження з кріоконсервованими та проліферуючими культурами BxPC-3.
Посилання
- Кім Ю. та ін. Порівняльне протеомне профілювання клітинних ліній аденокарциноми проток підшлункової залози. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Кіртоня А. та ін., Надмірна експресія ламініну-5 гамма-2 сприяє пухлиноутворенню протокової аденокарциноми підшлункової залози через каскад EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR. Клітинні та молекулярні науки, 2022. 79(7): p. 362.
- Тернер А. та ін., Екстракти плодів Elaeocarpus reticulatus знижують життєздатність та індукують апоптоз у клітинах раку підшлункової залози in vitro. Доповіді з молекулярної біології, 2020. 47: p. 2073-2084.
- Ан Е.-Ж. та ін. Протираковий потенціал Oxialis obtriangulata в клітинах раку підшлункової залози через регуляцію ERK/Src/STAT3-опосередкованого шляху. Молекули, 2020. 25(10): p. 2301.