Клітини A431 - поглиблений аналіз клітин епідермоїдної карциноми в дерматологічних дослідженнях
A431 - це лінія клітин епідермоїдного раку людини. Вона широко використовується в біомедичних дослідженнях, в основному в біології раку, імуноонкології та токсикології. Крім того, клітини A431 гіперекспресують EGFR (рецептор епідермального фактору росту), що робить їх цінною моделлю in vitro для вивчення клітинного циклу та сигнальних шляхів, пов'язаних з раком.
Ця стаття пояснить основи роботи з раковою клітинною лінією А431. Ви дізнаєтесь наступне:
- Клітини A431: Загальна характеристика та походження
- Клітинна лінія A431: Інформація про культивування
- Переваги та недоліки клітинної лінії A431
- Дослідницькі застосування клітин A431
- Наукові публікації за участю клітин A431
- Ресурси для клітинної лінії A431: Протоколи, відео та інше
1. Клітини A431: Загальна характеристика та походження
Цей розділ статті допоможе вам дізнатися загальну інформацію про клітинну лінію A431, яку необхідно знати перед початком роботи з нею. Наприклад, звідки походить Що таке клітинна лінія A431? Які характеристики клітинної лінії A431? Яка морфологія клітин A431? Звідки беруться клітини A431?
- Клітинну лінію раку шкіри людини A431 було отримано з епідермісу 85-річної пацієнтки з епідермоїдною карциномою [1]. Вона була створена D.J. Giard та ін., які розробили багато інших клітинних ліній з солідних пухлин.
- Клітини А-431 мають епітеліальну морфологію. Вони агрегують і утворюють клітинні кластери.
- Клітинна лінія раку шкіри a431 є гіпертриплоїдною. Модальне число хромосом для цієї клітинної лінії становить 74, що зустрічається приблизно в 36% клітин. Більш високі плоїдності також існують приблизно в 1% клітинної популяції.
2.клітинна лінія А431: Інформація про культивування
Знання вимог та процедур культивування клітинної лінії може зробити роботу з нею безпроблемною. Ця частина статті допоможе вам дізнатися про ключові моменти культивування клітинної лінії A431. Зокрема, ви дізнаєтесь, який час подвоєння клітин A431? Чи є лінія ракових клітин A431 адгезивною? Яке живильне середовище використовується для A431?
Ключові моменти для культивування клітин A431
|
Час подвоєння: |
Час подвоєння популяції клітин A431 становить від 80 до 100 годин. |
|
Прикріплені або в суспензії: |
A431 є адгезивною клітинною лінією. |
|
Щільність посіву: |
щільність посіву 1 x104 клітин/см2 є ідеальною для клітинної лінії A431. При такій щільності клітинам потрібно майже 4 дні, щоб досягти злиття. Злиплі клітини промивають PBS (1x) та інкубують з пасажним розчином Accutase. Після цього клітини ресуспендують у культуральному середовищі та центрифугують. Зібрані клітини знову ресуспендують і розподіляють у нові колби для росту. |
|
Поживне середовище: |
Для культивування клітинної лінії A431 використовується середовище DMEM, доповнене 10% ембріональної сироватки великої рогатої худоби, 4,5 г/л глюкози, 1,0 мМ пірувату натрію, 1,5 г/л NaHCO3 і 4 мМ L-глутаміну. Поживне середовище слід замінювати кожні 2-3 дні на тиждень. |
|
Умови вирощування: |
Ракові клітини A431 вирощують у зволоженому інкубаторі, обладнаному 5% джерелом CO2, при температурі 37°C. |
|
Зберігання: |
Клітинну лінію можна зберігати в електричному морозильнику або в паровій фазі рідкого азоту при температурі нижче -150°С, оскільки це допомагає зберегти життєздатність клітин. |
|
Процес заморожування та середовище: |
CM-1 або CM-ACF - два рекомендовані середовища для заморожування клітин лінії A431. Клітини заморожують методом повільного заморожування, який дозволяє знижувати температуру лише на 1 градус за хвилину. |
|
Процес розморожування: |
Заморожені клітини A431 розморожують на водяній бані при 37°C з антимікробним засобом протягом 40-60 секунд. Коли залишається лише невелика крижана грудка, клітини додають до культурального середовища і центрифугують. Зібрані клітини ресуспендують і виливають у культуральну колбу для росту. |
|
Рівень біобезпеки: |
Для роботи з культурами A431 рекомендується перший рівень біобезпеки. |
3.переваги та недоліки клітинної лінії A431
Клітинна лінія A431 має чітко виражені характеристики і пропонує ряд переваг і недоліків. Нижче ми підсумували деякі з них.
Переваги
Основними перевагами клітинної лінії раку А431 є наступні:
|
Гіперекспресія EGFR |
Клітини A431 гіперекспресують рецептор епідермального фактору росту (EGFR). Вони слугують позитивним контролем для вивчення сигналізації EGFR та її впливу на рак. Вони також використовуються для оцінки нових методів лікування раку. |
|
Пухлиногенність |
Клітини A431 є туморогенними і мають здатність утворювати пухлини. Вони можуть бути використані для розробки ксенотрансплантаційних моделей раку, які є цінними інструментами для вивчення динаміки росту пухлин і оцінки нових методів лікування раку. |
Недоліки
До недоліків клітин А431 відносяться
|
Генетичні аномалії |
A431 - це лінія ракових клітин, що містить генетичні мутації та зміни, які можуть відрізняти її від оригінальних характеристик пухлини. |
|
Мікробне забруднення |
A431 схильна до мікробного забруднення, в першу чергу бактеріального. Однак дотримання стандартних асептичних умов культивування може допомогти запобігти такому забрудненню клітинних культур A431. |