Клітини гепатиту 2 та їх роль у дослідженні раку гортані

Клітини гепатиту 2 є ключовою моделлю in vitro, яка широко використовується в біомедичних дослідженнях, таких як ревматологія, дослідження раку та імунологія. Ці клітини, отримані з карциноми гортані, були невід'ємною частиною дослідження тканин походження та специфічних особливостей новоутворень гортані. Їх важливість добре визнана в трансляційних дослідженнях раку, де вони зробили значний внесок у наше розуміння природи та походження раку гортані, відзначаючись значною присутністю в публікаціях, присвячених дослідженню раку гортані [1].

Походження та загальні характеристики клітин Hep 2

Походження та загальні характеристики клітинної лінії визначають її застосовність у дослідженнях. Цей розділ допоможе вам дізнатися про походження та деякі основні характеристики клітин Hep 2. Наприклад, ви дізнаєтесь Що таке клітинні лінії гепатиту 2? Звідки беруться клітини гепатиту 2? Яка морфологія клітин гепатиту 2?

Гепатит 2, безсмертна епітеліальна клітинна лінія людини, була вперше описана H.W. Toolan як клітини карциноми гортані в 1954 році. Однак нещодавно з'явилися повідомлення про те, що клітинна лінія Hep 2 складається з клітин аденокарциноми шийки матки і походить від контамінації клітинної лінії Hela [2].
Клітини Hep 2 містять маркерні хромосоми Hela і виявляються позитивними на послідовності ДНК кератину і вірусу папіломи людини, що підтверджено за допомогою імунопероксидазного фарбування і ПЛР відповідно.
Похідна клітинної лінії Hela - Hep 2 - має епітеліоподібну морфологію.
Клітинна лінія Hep 2 демонструє як структурні, так і числові хромосомні абразії з близьким до триплоїдного каріотипом [3].

Поділ клітин раку шийки матки HeLa під мікроскопом.

Клітинна лінія гепатиту 2: Інформація про культивування

Перед початком роботи з клітинною лінією ми повинні знати наступні ключові моменти щодо її культивування. Ця інформація може бути корисною для ефективного культивування та підтримки клітинної лінії. Ви повинні знати: Який час подвоєння клітин гепатиту 2? Чи є клітини гепатиту 2 адгезивними? Яка щільність посіву клітин Hep2?

Час подвоєння популяції:	Час подвоєння для клітин гепатиту 2 становить приблизно 40 годин.
Адгезія або суспензія:	Клітини гепатиту 2 є адгезійними і ростуть в моношари.
Щільність посіву:	Щільність посіву 1 х¹⁰⁴ ^{клітин/см2} є ідеальною для культури клітин гепатиту 2. Для посіву адгезовані клітини гепатиту 2 промивають 1 розчином PBS з подальшою інкубацією з розчином дисоціації аккутази. Після 8-10-хвилинної інкубації при кімнатній температурі клітини ресуспендують у середовищі та центрифугують. Зібрані клітини потім розводять у свіжому середовищі і переливають у нові колби для культивування.
Поживне середовище:	Для культивування клітин гепатиту 2 використовується мінімальне живильне середовище EMEM або Eagle's. До цього середовища додають 10% FBS, 1,0 г/л глюкози, 2,2 г/л NaHCO3, 2,0 мМ L-глутаміну, 1% NEAA та 1 мМ пірувату натрію для ідеального росту клітин. Поживне середовище слід оновлювати 2-3 рази на тиждень.
Умови росту:	Як і інші клітинні лінії ссавців, Hep 2 також культивують у зволоженому інкубаторі при температурі 37°C і постійному надходженні 5% CO2.
Зберігання:	Клітини Hep 2 можна зберігати в наднизькотемпературних електричних морозильних камерах (нижче -150 °C) або в паровій фазі рідкого азоту для довготривалого зберігання.
Процес заморожування та середовище:	Рекомендованими середовищами для заморожування клітин гепатиту 2 є CM-1 або CM-ACF. Клітини слід заморожувати з використанням повільного процесу заморожування, який забезпечує поступове зниження температури на 1 °С і захищає життєздатність клітин.
Процес розморожування:	Заморожені клітини швидко розморожують шляхом перемішування на водяній баніпри 37°Cдо утворення невеликої крижаної грудки. Потім клітини додають у свіже середовище і центрифугують, щоб видалити компоненти заморожуючого середовища. Пізніше клітинну гранулу ресуспендують у середовищі, а клітини розподіляють у культуральних колбах. Клітини повинні відпочити майже 24 години, щоб прилипнути.
Рівень біобезпеки	Для роботи з культурами клітин гепатиту 2 рекомендується лабораторія з рівнем біобезпеки 1.

Клітини гепатиту 2 до і після досягнення злиття.

Переваги та обмеження клітин гепатиту 2

Майже всі клітинні лінії демонструють унікальне поєднання переваг та обмежень, які сприяють їх використанню в дослідницькій сфері. У цьому розділі ми опишемо кілька основних переваг і недоліків, пов'язаних з клітинною лінією Hep 2.

Переваги

Основними перевагами клітинної лінії гепатиту 2 є наступні:

Людське походження: Гепатит 2 отримано з епітеліальних клітин людини, що робить його цінною моделлю in vitro для вивчення людських захворювань та вірусних інфекцій
Виявлення ANA: Клітинна лінія Hep 2 має нативний білковий масив, який представляє численні антигени, що робить її чудовим субстратом для виявлення антинуклеарних антитіл (ANA). Ця особливість дозволяє проводити специфічний і високочутливий скринінг АНА в сироватці крові, що робить його важливим діагностичним інструментом для виявлення захворювань сполучної тканини

Обмеження

Хромосомні аномалії: Клітини гепатиту 2 мають численні чисельні та структурні хромосомні аномалії. Ці порушення можуть впливати на поведінку клітин і обмежувати їх застосування в певних лабораторних експериментах
Пухлиногенність: Hep 2, пухлинна лінія епітеліальних клітин людини, може мати генетичні аномалії, які зазвичай відсутні в епітеліальних клітинах. Отже, використання клітин гепатиту 2 може бути обмежене в специфічних дослідженнях, що фокусуються на нормальній клітинній фізіології.

Розширення застосування клітинної лінії гепатиту 2 в біомедичних дослідженнях

Клітинна лінія гепатиту 2 є зразковою моделлю для безлічі застосувань в біомедичних дослідженнях. Відомі своєю універсальністю, ці клітини відіграють важливу роль в експериментах in vitro, починаючи від аналізу рецепторів і закінчуючи вивченням складних захворювань.

Дослідження пухлинних механізмів та терапевтичних мішеней за допомогою клітин гепатиту 2

Клітини гепатиту 2, будучи пухлиноутворюючими, є ключовими для заглиблення в тонкощі біології раку. Вони дають уявлення про сигнальні шляхи раку, механістичні дослідження і є основою для скринінгу та оцінки протиракових препаратів. Наприклад, в одному глибокому дослідженні було використано вірус гепатиту 2, щоб визначити вплив miRNA-33a на проліферацію ракових клітин. Результати дослідження висвітлили антипроліферативні ефекти miRNA-33a через її взаємодію з PIM1, відомим онкогеном, що вказує на нову терапевтичну мішень [4]. В іншому випадку гепатит 2 був використаний для оцінки терапевтичного потенціалу наночастинок оксиду цинку Marsdenia tenacissima, підкреслюючи їх антипроліферативну та апоптотичну ефективність [5].

Поглиблення вірусологічних досліджень за допомогою вивчення клітин гепатиту 2

Чутливість клітин гепатиту 2 до різних вірусів людини робить їх безцінним ресурсом у вірусологічних дослідженнях. Вони були ефективно використані для експресії вірусних генів SARS-CoV-2, щоб розгадати складну взаємодію між вірусом і клітинними механізмами хазяїна [6]. Таке застосування є особливо важливим у нинішню епоху, коли розуміння та боротьба з вірусними інфекціями, такими як COVID-19, є глобальним пріоритетом.

Розшифровка клітинних функцій: Маніпуляції з генами в клітинах гепатиту 2

Пристосованість клітинної лінії гепатиту 2 до генетичних маніпуляцій підкреслює її корисність у механістичних дослідженнях. Дослідники використовують цю особливість для модуляції експресії генів та з'ясування ролі певних генів у клітинних функціях. Одне з відомих досліджень включало надмірну експресію РНК-зв'язуючого білка RBM6 у клітинах гепатиту 2, що сприяло вивченню його потенціалу супресора пухлин, надаючи цінну інформацію про молекулярні основи раку [7].

Покращення діагностики захворювань за допомогою застосування клітинних ліній гепатиту 2

За межами цих дослідницьких областей клітини Hep 2 відомі своїми діагностичними можливостями, особливо у виявленні антинуклеарних антитіл (ANA), які є критично важливими для діагностики аутоімунних захворювань, таких як системний червоний вовчак. Точність, з якою клітини гепатиту 2 можуть виявляти антинуклеарні антитіла, сприяє діагностиці та розробці цілеспрямованих методів лікування, поглиблюючи наше розуміння аутоімунних патологій та покращуючи лікування пацієнтів.

Завдяки такому різноманітному застосуванню клітини гепатиту 2 зробили значний внесок у розвиток трансляційних досліджень раку, вивчення вірусних інфекцій та вивчення клітинних механізмів. Їх внесок у отримання клінічно значущих даних є неоціненним, що підтверджує їх незамінну роль як в лабораторії, так і в клініці. Оскільки дослідження продовжують розвиватися, клітинні лінії вірусу гепатиту 2, безсумнівно, залишатимуться на передовій, допомагаючи у відкритті нових методів лікування та розширюючи наші знання про здоров'я і хвороби людини.

Захистіть свою клітинну лінію гепатиту-2 вже сьогодні

430,00 EUR*

Вміст: 1.5 milliliter

Ціни без урахування податків та витрат на доставку

cryovial

Номер продукту: 300397

Клітини гепатиту 2: Наукові публікації

Нижче наведені деякі цікаві та найбільш цитовані наукові публікації про клітини гепатиту 2.

Синтез наночастинок оксиду цинку з Marsdenia tenacissima пригнічує проліферацію клітин та індукує апоптоз у клітинах раку гортані (Hep-2)
У цій статті, опублікованій в журналі фотохімії та фотобіології B: Biology (2019), досліджено протираковий потенціал біосинтезованих наночастинок оксиду цинку з Marsdenia tenacissima на клітинній лінії Hep 2.
Біоформульовані наночастинки PLGA, навантажені гесперидином, протидіють мітохондріально-опосередкованому внутрішньому шляху апоптозу в ракових клітинах
Ця стаття була опублікована в Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials у 2021 році. У цьому дослідженні вивчали протиракові властивості біоформульованих наночастинок на основі гесперидину, навантажених полі (молочно-ко-гліколевою) кислотою (PLGA), у клітинах гепатиту 2.
Противірусна активність етанольного екстракту Lophatherum gracile проти респіраторно-синцитіальної вірусної інфекції
Ця публікація в Journal of Ethnopharmacology у 2019 році використовувала клітини гепатиту 2 для вивчення респіраторно-синцитіальної вірусної інфекції та скринінгу противірусних препаратів проти неї. У дослідженні повідомляється про багатообіцяючий противірусний потенціал етанольного екстракту лікарської рослини Lophatherum gracile проти респіраторно-синцитіальної вірусної інфекції.
Оцінка водних екстрактів з чотирьох ароматичних рослин на предмет їх активності проти адгезії Candida albicans до епітеліальних клітин людського гепатиту-2
Це дослідження опубліковане в журналі Gene Reports (2020). У цьому дослідженні вивчався інгібуючий потенціал водних екстрактів чотирьох ароматичних рослин проти адгезії Candida albicans до епітеліальних клітин вірусу гепатиту 2 людини.
Wnt1-індукований сигнальний білок 1 регулює гліколіз та хіміорезистентність плоскоклітинного раку гортані через шлях YAP1/TEAD1/GLUT1
Це дослідження було опубліковане в Journal of Cellular Physiology у 2019 році. У дослідженні повідомляється, що Wnt1-індукований сигнальний білок 1 (WISP1) взаємодіє з YAP1/TEAD1/GLUT1 шляхом і регулює метаболізм глюкози та хіміорезистентність у клітинній лінії Hep 2.

Ресурси для клітинної лінії Hep2: Протоколи, відео та інше

Гепатит 2 - добре відома клітинна лінія. Існує кілька доступних ресурсів, що містять інформацію про клітинну лінію Hep 2.

Субкультивування клітинної лінії Hep2: Це відео є покроковим посібником з субкультивування клітин гепатиту 2.
Скринінг на антинуклеарні антитіла до клітин гепатиту 2: Це відео пояснює скринінг антинуклеарних антитіл (ANA) з використанням клітинної лінії Hep 2.
Культивування клітин гепатиту 2: Це посилання містить основну інформацію про культуру клітин гепатиту 2. Вона включає поділ клітин, заморожування та розморожування клітин.

Поширені запитання про клітини гепатиту-2 в біомедичних дослідженнях

Посилання

Фузі, М. та С. Дотті, Адаптація клітинної лінії HEp-2 до повністю вільних від тварин культуральних систем та аналіз росту клітин у реальному часі. Biotechniques, 2021. 70(6): p. 319-326.
Горф, П., Всебічний огляд клітинної лінії Hep-2 у трансляційних дослідженнях раку гортані. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): p. 644-649.
Wang, M. та ін., Рак-асоційовані фібробласти в ксенотрансплантованій пухлині гортані людини HEp-2 не походять від ракових клітин через епітеліально-мезенхімальний перехід, фенотипічно активовані, але каріотипічно нормальні. PLoS One, 2015. 10(2): p. e0117405.
Каратас О.Ф., Антипроліферативний потенціал miR-33a в клітинах раку гортані Hep-2 через таргетування PIM1. Head Neck, 2018. 40(11): p. 2455-2461.
Ван, Ю. та ін., Синтез наночастинок оксиду цинку з Marsdenia tenacissima пригнічує проліферацію клітин та індукує апоптоз у клітинах раку гортані (Hep-2). Журнал фотохімії та фотобіології В: Біологія, 2019. 201: p. 111624.
Чжан, Дж. та ін., Системне та молекулярне дослідження субклітинної локалізації білків SARS-CoV-2. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): p. 269.
Wang Q. та ін. РНК-зв'язуючий білок RBM6 як ген-супресор пухлин пригнічує ріст і прогресію ларингокарциноми. Ген, 2019. 697: p. 26-34.