Клітини Hep2 та їхня роль у дослідженнях раку гортані

Клітини Hep 2 є ключовою моделлю in vitro, яка широко використовується в різних галузях біомедичних досліджень, таких як ревматологія, дослідження раку та імунологія. Ці клітини людини, що походять з карциноми гортані, відіграють важливу роль у з’ясуванні тканини походження та специфічних ознак новоутворень гортані. Їх значення добре визнане в трансляційних дослідженнях раку, де вони значно сприяли нашому розумінню природи та походження раку гортані, займаючи значне місце в публікаціях з досліджень раку гортані [1].

📋 Клітинна лінія Hep2 — короткі факти

Середовище для культивування: Для культивування клітин Hep 2 використовується EMEM або мінімальне есенціальне середовище Ігл. Для забезпечення ідеальних умов росту клітин це середовище доповнюють 10% FBS, 1,0 г/л глюкози, 2,2 г/л NaHCO3, 2,0 мМ L-глутаміну, 1% NEAA та 1 мМ пірувату натрію. Середовище слід оновлювати 2–3 рази на тиждень.
Час подвоєння: Час подвоєння, зафіксований для клітин Hep 2, становить приблизно 40 годин.
Тип росту: Клітини Hep 2 є адгезивними і ростуть у вигляді моношарів.
Рівень біобезпеки: BSL-1
Доступно у: Cytion — Замовити Hep2

Походження та загальні характеристики клітин Hep 2

Походження та загальні характеристики клітинної лінії визначають її застосовність у дослідженнях. Цей розділ допоможе вам дізнатися про походження та деякі основні особливості клітин Hep 2. Наприклад, ви дізнаєтеся: Що таке клітинна лінія HEp-2? Яке походження клітин Hep 2? І яка морфологія клітин Hep 2?

Hep 2, безсмертна лінія епітеліальних клітин людини, була вперше описана H.W. Toolan як клітини карциноми гортані в 1954 році. Однак останнім часом повідомляється, що клітинна лінія Hep 2 складається з клітин аденокарциноми шийки матки і походить від забруднення клітинної лінії Hela [2].
Клітини Hep 2 містять маркерні хромосоми Hela і дають позитивний результат на кератин та послідовності ДНК вірусу папіломи людини, що підтверджено за допомогою імунопероксидазного фарбування та ПЛР відповідно.
Похідна клітинної лінії Hela, Hep 2, має епітеліоподібну морфологію.
Клітинна лінія Hep 2 демонструє як структурні, так і числові хромосомні аномалії з майже триплоїдним каріотипом [3].

Ділення клітин раку шийки матки HeLa під мікроскопом.

Клітинна лінія HEp-2: інформація щодо культивування

Перед початком роботи з клітинною лінією необхідно знати наступні ключові моменти щодо її культивування. Ця інформація може бути корисною для ефективного культивування та підтримання клітинної лінії. Вам слід знати: Який час подвоєння клітин HEp-2? Чи є клітини Hep 2 адгезивними? Яка щільність висівання клітин Hep2?

Час подвоєння популяції:: Час подвоєння клітин Hep 2 становить приблизно 40 годин.
Адгезивні або у суспензії:: Клітини Hep 2 є адгезивними і ростуть у моношари.
Щільність висівання:: Ідеальна щільність висівання для культури клітин Hep 2 становить 1 × 10⁴ клітин/см². Для висівання адгезивні клітини Hep 2 промивають розчином 1 × PBS, а потім інкубують у розчині для дисоціації Accutase. Після 8–10-хвилинної інкубації при кімнатній температурі клітини ресуспендують у середовищі та центрифугують. Зібрані клітини потім дозують у свіже середовище та переливають у нові колби для культивування.
Середовище для росту:: Для культивування клітин Hep 2 використовується EMEM або мінімальне есенційне середовище Ігл. Для забезпечення ідеальних умов росту клітин це середовище доповнюють 10 % FBS, 1,0 г/л глюкози, 2,2 г/л NaHCO3, 2,0 мМ L-глутаміну, 1 % NEAA та 1 мМ пірувату натрію. Середовище слід оновлювати 2–3 рази на тиждень.
Умови росту:: Як і інші клітинні лінії ссавців, Hep 2 також культивують у зволоженому інкубаторі, налаштованому на температуру 37 °C, з безперервною подачею 5% CO2.
Зберігання:: Клітини Hep 2 можна зберігати в електричних морозильних камерах з наднизькою температурою (нижче -150 °C) або у фазі пари рідкого азоту для довгострокового зберігання.
Процес заморожування та середовище:: Рекомендованими середовищами для заморожування клітин Hep 2 є CM-1 або CM-ACF. Клітини слід заморожувати за допомогою процесу повільного заморожування, що забезпечує поступове зниження температури на 1 °C та захищає життєздатність клітин.
Процес розморожування:: Флакон із замороженими клітинами швидко розморожують шляхом перемішування у водяній бані при температурі 37 °C, доки не залишиться невеликий шматок льоду. Потім клітини додають до свіжого середовища та центрифугують для видалення компонентів середовища для заморожування. Пізніше осад клітин ресуспендують у середовищі, а клітини розливають у культуральні колби. Клітинам потрібно відпочити майже 24 години, щоб прикріпитися.
Рівень біобезпеки: Для роботи з культурами клітин Hep 2 та їх утримання рекомендується лабораторія рівня біобезпеки 1.

Hep2 cells

Клітини Hep 2 до та після досягнення конфуенції.

Переваги та обмеження клітин Hep 2

Майже всі клітинні лінії мають унікальне поєднання переваг та обмежень, що впливає на їх використання в наукових дослідженнях. У цьому розділі описано кілька основних переваг та недоліків, пов’язаних із клітинною лінією Hep 2.

Переваги

Основними перевагами клітинної лінії Hep 2 є:

Людське походження: Hep 2 походить з епітеліальних клітин людини, що робить її цінною моделлю in vitro для вивчення захворювань людини та вірусних інфекцій.
Виявлення ANA: Клітинна лінія Hep 2 володіє набором нативних білків, що представляють численні антигени, що робить її чудовим субстратом для виявлення антинуклеарних антитіл (ANA). Ця особливість дозволяє проводити специфічний та високочутливий скринінг ANA в сироватці, що робить її важливим діагностичним інструментом для виявлення захворювань сполучної тканини.

Обмеження

Хромосомні аномалії: Клітини Hep 2 виявляють численні числові та структурні хромосомні аномалії. Ці аномалії можуть впливати на поведінку клітин і обмежувати їхню застосовність у певних лабораторних експериментах.
Онкогенність: Hep 2, лінія епітеліальних клітин людини, отримана з пухлини, може мати генетичні аномалії, які зазвичай відсутні в епітеліальних клітинах. Отже, використання клітин Hep 2 може бути обмежене в конкретних дослідженнях, що зосереджуються на нормальній клітинній фізіології.

Розширення застосування клітинної лінії Hep 2 у біомедичних дослідженнях

Клітинна лінія Hep 2 виділяється як зразкова модель для безлічі застосувань у біомедичних дослідженнях. Відомі своєю універсальністю, ці клітини відіграють важливу роль в експериментах in vitro, починаючи від аналізу рецепторів і закінчуючи дослідженням складних захворювань.

Дослідження механізмів пухлиноутворення та терапевтичних мішеней за допомогою клітин Hep 2

Клітини Hep 2, будучи пухлиногенними, мають ключове значення для вивчення тонкощів біології раку. Вони дають уявлення про сигнальні шляхи раку, механістичні дослідження та є основою скринінгу та оцінки протиракових препаратів. Наприклад, у глибокому дослідженні використовували клітини Hep 2 для визначення впливу miRNA-33a на проліферацію ракових клітин. Результати пролили світло на антипроліферативні ефекти miRNA-33a через його взаємодію з PIM1, відомим онкогеном, що вказує на нову терапевтичну мішень [4]. В іншому випадку клітини Hep 2 використовували для оцінки терапевтичного потенціалу наночастинок оксиду цинку Marsdenia tenacissima, підкресливши їхню антипроліферативну та апоптотичну ефективність [5].

Просування вірусологічних досліджень за допомогою даних про клітини Hep 2

Схильність клітин Hep 2 до різних людських вірусів робить їх безцінним ресурсом у вірусологічних дослідженнях. Вони ефективно використовувалися для експресії вірусних генів SARS-CoV-2 з метою розшифрування складної взаємодії між вірусом та клітинними механізмами хазяїна [6]. Це застосування є особливо важливим у сучасну епоху, коли розуміння та боротьба з вірусними інфекціями, такими як COVID-19, є глобальним пріоритетом.

Розшифровка клітинних функцій: маніпуляції з генами в клітинах Hep 2

Пристосованість клітинної лінії Hep 2 до генетичної маніпуляції підкреслює її корисність у механістичних дослідженнях. Дослідники використовують цю особливість для модуляції експресії генів та з'ясування ролі конкретних генів у клітинних функціях. Одне з помітних досліджень стосувалося надмірної експресії РНК-зв'язуючого білка RBM6 у клітинах Hep 2, що сприяло вивченню його потенціалу як супресора пухлин, надаючи цінну інформацію про молекулярні основи раку [7].

Покращення діагностики захворювань за допомогою клітинної лінії Hep 2

Окрім цих областей досліджень, клітини Hep 2 відомі своїми діагностичними можливостями, особливо у виявленні АНА, які мають вирішальне значення для діагностики аутоімунних захворювань, таких як системний червоний вовчак. Точність, з якою клітини Hep 2 можуть виявляти АНА, сприяє діагностиці та розробці цільових методів лікування, покращуючи наше розуміння аутоімунних патологій та якість догляду за пацієнтами.

Завдяки цим різноманітним застосуванням клітини Hep 2 зробили значний внесок у прогрес у трансляційних дослідженнях раку, вивченні вірусних інфекцій та дослідженні клітинних механізмів. Їхній внесок у отримання клінічно значущих даних є неоціненним, що підтверджує їхню незамінну роль як у лабораторії, так і в клініці. У міру розвитку досліджень клітинна лінія Hep 2, безсумнівно, залишатиметься на передовій, сприяючи відкриттю нових методів лікування та розширенню наших знань про здоров'я та хвороби людини.

Замовте клітинну лінію HEp-2 вже сьогодні

430,00 EUR*

Вміст: 1.5 milliliter

Ціни без урахування податків та витрат на доставку

cryovial

Номер продукту: 300397

Клітини Hep 2: Наукові публікації

Нижче наведено кілька цікавих та найбільш цитованих наукових публікацій про клітини Hep 2.

Синтез наночастинок оксиду цинку з Marsdenia tenacissima пригнічує проліферацію клітин та індукує апоптоз у клітинах раку гортані (Hep-2)
У цій статті, опублікованій у журналі «Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology» (2019), досліджено протираковий потенціал біосинтезованих наночастинок оксиду цинку з Marsdenia tenacissima у клітинній лінії Hep 2.
Біоформульовані наночастинки PLGA, наповнені гесперидином, протидіють мітохондріально-опосередкованому внутрішньому апоптотичному шляху в ракових клітинах
Ця стаття була опублікована в журналі «Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials» у 2021 році. У цьому дослідженні вивчалися протиракові властивості біоформульованих наночастинок полі(молочно-гліколевої кислоти) (PLGA), навантажених гесперидином, у клітинах Hep 2.
Противірусна активність етанольного екстракту Lophatherum gracile проти інфекції
респіраторно-синцитіального вірусу У цій публікації в журналі «Journal of Ethnopharmacology» у 2019 році використовували клітини Hep 2 для вивчення інфекції респіраторно-синцитіального вірусу та скринінгу противірусних препаратів проти нього. У дослідженні повідомляється про багатообіцяючий противірусний потенціал етанольного екстракту лікарської рослини Lophatherum gracile проти інфекції респіраторно-синцитіального вірусу.
Оцінка водних екстрактів чотирьох ароматичних рослин щодо їхньої активності проти адгезії Candida albicans до епітеліальних клітин
людини HEp-2 Це дослідження опубліковано в журналі «Gene Reports» (2020). У цьому дослідженні вивчався інгібуючий потенціал водних екстрактів чотирьох ароматичних рослин щодо адгезії Candida albicans до епітеліальних клітин людини Hep 2.
Wnt1-індукований сигнальний білок 1 регулює гліколіз та хіміорезистентність плоскоклітинного раку гортані через шлях
YAP1/TEAD1/GLUT1. Це дослідження було опубліковано в журналі Journal of Cellular Physiology у 2019 році. У дослідженні повідомляється, що Wnt1-індукований сигнальний білок 1 (WISP1) взаємодіє з сигнальним шляхом YAP1/TEAD1/GLUT1 та регулює метаболізм глюкози та хіміорезистентність у клітинній лінії Hep 2.

Ресурси для клітинної лінії Hep2: протоколи, відео та інше

Hep 2 — це добре відома клітинна лінія. Існує кілька доступних ресурсів, присвячених клітинній лінії Hep 2.

Субкультурування клітинної лінії Hep 2: це відео є покроковим керівництвом з субкультурування клітин Hep 2.
Скринінг клітин Hep 2 на ANA: це відео пояснює скринінг на антинуклеарні антитіла (ANA) з використанням клітинної лінії Hep 2.
Культивування Hep 2: це посилання містить основну інформацію про культивування клітин Hep 2. Воно включає поділ клітин, заморожування та розморожування клітин.

Поширені запитання про клітини гепатиту-2 в біомедичних дослідженнях

Література

Fusi, M. та S. Dotti, Адаптація клітинної лінії HEp-2 до повністю безтваринних систем культивування та аналіз росту клітин у реальному часі. Biotechniques, 2021. 70(6): с. 319-326.
Gorphe, P., Комплексний огляд клітинної лінії Hep-2 у трансляційних дослідженнях раку гортані. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): с. 644–649.
Wang, M., et al., Фібробласти, асоційовані з раком, у ксенотрансплантованій пухлині гортані, створеній на основі людської клітинної лінії HEp-2, не походять від ракових клітин шляхом епітеліально-мезенхімального переходу, фенотипово активовані, але каріотипічно нормальні. PLoS One, 2015. 10(2): с. e0117405.
Karatas, O.F., Антипроліферативний потенціал miR-33a у клітинах раку гортані Hep-2 шляхом націлювання на PIM1. Head Neck, 2018. 40(11): с. 2455–2461.
Wang, Y., et al., Синтез наночастинок оксиду цинку з Marsdenia tenacissima пригнічує проліферацію клітин та індукує апоптоз у клітинах раку гортані (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: с. 111624.
Чжан, Ц., та ін., Системне та молекулярне дослідження субклітинної локалізації білків SARS-CoV-2. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): с. 269.
Wang, Q., et al., Білок RBM6, що зв'язує РНК, як ген-супресор пухлин пригнічує ріст та прогресування раку гортані. Gene, 2019. 697: с. 26-34.