Celična linija Neuro-2a

Neuro-2a je mišja nevronska celična linija, ki se pogosto uporablja v nevroznanstvenih raziskavah. Te celice se večinoma uporabljajo za preučevanje nevronskega razvoja, diferenciacije, nevrotoksičnosti, celičnih signalnih poti in rasti aksonov. Poleg tega se uporabljajo za razvoj in pregledovanje zdravil.

Ta članek se osredotoča na pomembne vidike nevroblastomskih celic Neuro-2a, ki vam lahko pomagajo, preden začnete delati z njimi. Obravnaval bo predvsem:

Splošne lastnosti in izvor celic Neuro-2a
Informacije o gojenju celične linije Neuro-2a
Prednosti in slabosti celične linije Neuro-2a
Raziskovalne aplikacije celične linije Neuro-2a
Raziskovalne publikacije, v katerih so predstavljene celice Neuro-2a
Viri za celice Neuro-2a: Viri, protokoli, videoposnetki in drugo Gradivo za-2a-2a

1. Splošne lastnosti in izvor celic Neuro-2a

V tem delu članka bodo opisani ozadje in osnovne značilnosti celične linije Neuro-2a, ki jih je treba poznati pred delom z njo. Tu boste izvedeli: Kaj je celična linija Neuro-2a? Kakšno je poreklo celične linije Neuro-2a? Kaj je diferenciacija celic Neuro-2a? Kakšna je velikost celice Neuro-2a? Kakšna je morfologija celic Neuro-2a?

Celice Neuro-2a izvirajo iz spontanega tumorja (nevroblastoma) albinske miši (sev A). Celično linijo sta ustvarila R. J. Klebe in F. H. Ruddle.
Nevroblastomske celice Neuro-2a imajo morfologijo nevronskih in ameboidnih matičnih celic.
Velikost celic Neuro-2a je 12 mikrometrov v višino [1].
Število kromosomov celic Neuro-2a je lahko od 59 do 193, modalno število pa je 95. Kariotip teh nevroblastomskih celic je nestabilen v razponu od 94 do 98 kromosomov.

Prikazana nevronska signalizacija: 3D prikaz sproščanja nevrotransmiterjev v sinaptični vrzeli v presinaptičnem nevronu, ki ga sproži dotok Ca2+, kar vodi do aktivacije ionskih kanalov in dotoka Na+ v postsinaptičnem nevronu.

2. Informacije o gojenju celične linije Neuro-2a

Celice Neuro-2a se pogosto uporabljajo v nevroznanstvenih raziskovalnih laboratorijih. Preden začnete delati s temi celicami, se morate seznaniti z nujnimi informacijami o gojenju celic, ki so navedene v nadaljevanju. To vam bo pomagalo pri lažjem delu. Spoznali boste: Kaj je gojišče za gojenje celic Neuro-2a? Kako gojite celice Neuro-2a? Kakšen je čas podvojitve celic Neuro-2a? Kakšna je gostota naselitve celic Neuro-2a? Kakšen je protokol gojenja celic Neuro-2a? Kakšno je celično gojišče Neuro-2a?

Ključne točke za gojenje celic Neuro-2a

Čas podvojitve:	Čas podvojitve celic Neuro-2a je približno 70 ur.
Prilepljene ali v suspenziji:	Neuro-2a je adherentna celična linija.
Gostota naselitve:	Optimalna gostota naselitve celic za celično linijo Neuro-2a je 1 x¹⁰⁴ ^celic/cm2. Za naselitev celice speremo s fiziološko raztopino fosfatnega pufra brez magnezija in kalcija (1x). Kasneje se doda raztopina za prehod (Accutase) in celice se inkubirajo 8 do 10 minut pri sobni temperaturi. Po disociaciji celic dodamo sveže gojišče in celice centrifugiramo. Zbrana celična peleta se previdno resuspendira in celice se prelijejo v posodo za gojenje.
Gojišče za rast:	Za gojenje celic Neuro-2a se uporablja EMEM. Vsebuje 10 % FBS, 2 mM L-glutamin, 1,5 g/L NaHCO3, EBSS, 1 mM natrijev piruvat in NEAA za idealno rast celic. Medij je treba zamenjati 1 do 2-krat na teden.
Pogoji za rast:	Nevro-2a vzdržujemo v vlažnem inkubatorju pri 37 °C, ki je priključen na 5-odstotni dovod CO2.
Shranjevanje:	Celice je treba dolgoročno hraniti pri temperaturi pod -150 °C v električnem zamrzovalniku z zelo nizko temperaturo ali v parni fazi tekočega dušika.
Postopek zamrzovanja in medij:	Za zamrzovanje celic Neuro-2a se uporabljajo mediji CM-1 ali CM-ACF. Celice se zamrznejo s počasnim postopkom zamrzovanja, ki omogoča padec temperature le za 1 °C na minuto. To celice ščiti pred šokom in ohranja njihovo vitalnost.
Postopek odtaljevanja:	Za odtaljevanje zamrznjenih kultur stekleničko za 40 do 60 sekund postavimo v vodno kopel s temperaturo 37 °C, dokler ne ostane le majhen ledeni skupek. Nato dodamo gojišče in celice centrifugiramo. Ta korak pomaga odstraniti sestavine zamrzovalnega medija. Celični pelet nato ponovno suspendiramo in celice prenesemo v novo bučko, napolnjeno z gojiščem. Nato celice postavimo v inkubator pri 37 °C za najmanj 24 ur.
Raven biološke varnosti:	Za ravnanje s kulturami Neuro-2a in njihovo vzdrževanje so obvezne laboratorijske razmere na ravni biološke varnosti 1.

Mikroskopska slika zgodnje faze adherentnih celic nevroblastoma Neuro 2a, ki prikazuje njihovo morfologijo pri 10-kratni in 20-kratni povečavi.

3. Prednosti in slabosti celične linije Neuro-2a

Celice Neuro-2a imajo nekatere prednosti in slabosti, po katerih se razlikujejo od drugih nevronskih celičnih linij. Tu so navedene nekatere pomembne prednosti in slabosti teh celic.

Prednosti

Prednosti celične linije nevroblastoma miši Neuro-2a so:

Enostavno vzdrževanje
Celična linija Neuro-2a ni povezana s kompleksnimi ali zapletenimi postopki gojenja celic. V raziskovalnih laboratorijih jih je enostavno gojiti in vzdrževati.
Model nevronskih celic in vitro
Nevro-2a je primeren model nevronskih celic, ki ga raziskovalci pogosto uporabljajo pri študijah razvoja in diferenciacije nevronov.

Slabosti

Slabosti celic Neuro-2a so:

Mišji izvor
Nevro-2a je mišjega izvora, zato morajo biti raziskovalci previdni pri ekstrapolaciji rezultatov študij na miših na zdravje in bolezni ljudi, saj se mišja in človeška biologija lahko bistveno razlikujeta.

4. Raziskovalne aplikacije celične linije Neuro-2a

Celice Neuro-2a omogočajo številne aplikacije na področju nevroznanstvenih raziskav. Tukaj je obravnavanih nekaj obetavnih uporab te celične linije:

Nevronski razvoj: Neuro-2a je model nevronskih celic in vitro, ki se pogosto uporablja za preučevanje razvoja nevronov in z njim povezanih procesov, kot so diferenciacija, rast aksonov in tvorba sinaps. V študiji, izvedeni leta 2020, so bile celice Neuro-2a uporabljene za raziskovanje vloge mikroRNA-124 pri diferenciaciji nevronskih celic, ki jo povzroča retinojska kislina [2]. V drugi študiji so preučevali izražanje receptorja retinojske kisline gama (RARG) Neuro 2a in miRNA-124 v celični liniji nevroblastoma (N2A). V tej študiji so predlagali, da je RARG tarča miR-124 in zavira rast nevritov [3].
Nevrotoksičnost: Nevro-2a se uporablja tudi za ocenjevanje toksičnih učinkov zdravil, kemikalij ali okoljskih dejavnikov na nevronske celice. V študiji, ki so jo izvedli Zhihong Yin in sodelavci, so na primer z uporabo celic Neuro-2a preučevali nevrotoksičnost bisfenola A (BPA), okoljske kemikalije. Ugotovili so, da BPA zavira diferenciacijo in proliferacijo nevronskih celic, saj moti njihovo celično in sinaptično integriteto [4].
Pregledovanje zdravil: Celice Neuro-2a se uporabljajo tudi za ocenjevanje terapevtskega delovanja več zdravil, spojin in naravnih proizvodov. V študiji so na primer uporabili celice Neuro-2a in preučevali antioksidativni potencial rastlinskega izvlečka Gingko biloba. Poleg tega so v raziskavi predlagali, da povzroča zmanjšanje agregacije Aβ in je lahko potencialno zdravilo za Alzheimerjevo bolezen [5].

430,00 €*

Vsebina: 1.5 milliliter

Cene brez davkov in stroškov dostave

cryovial

Številka izdelka: 400394

5. Raziskovalne objave s celicami Neuro-2a

Tukaj je nekaj zanimivih raziskovalnih člankov, ki vključujejo celično linijo Neuro-2a.

Piperinu podobni alkamidi iz Piper nigrum inducirajo promotor BDNF in spodbujajo rast nevritov v celicah Neuro-2a

V tej študiji v reviji Journal of Natural Medicines iz leta 2018 so preučevali terapevtske učinke alkamidov, izoliranih iz belega popra (P. nigrum), na nevronske celice Neuro-2a.

Znižanje regulacije Nkx2. 1 je vključeno v nepravilnosti v možganih, ki jih povzroča presežek retinojske kisline

Ta raziskava v reviji Acta Biochimica et Biophysica Sinica, 2020 predlaga, da ima gen Nkx2.1 pomembno vlogo pri razvoju mišjih možganov z uravnavanjem signalne kaskade Shh.

Izpostavljenost bisfenolu A povzroča nevrotoksičnost, povezano s sinaptično in citoskeletno disfunkcijo v celicah neuro-2a

Ta članek je bil objavljen v reviji Toxicology and Industrial Health (2023) in predlaga, da okoljska kemikalija bisfenol A sproži nevrotoksičnost v celicah nevro-2a ter moti njihovo sinaptično in citoskeletno disfunkcijo.

Modulacija poti MAPK in PI3K/Akt v celicah nevro-2A s heksarelinom zavira apoptotično toksičnost, povzročeno z vodikovim peroksidom

V članku v reviji Pharmaceuticals (2021) je predlagano, da zdravilo, heksarelin, modulira kaskado PI3K/AKT in MAPK v nevroblastomskih celicah (Neuro-2a) ter zavira apoptozo celic Neuro-2a, povzročeno z vodikovim peroksidom.

Etanolni izvleček plodov Emblice officinalis zavira nevrovnetje v mikrogliji in spodbuja rast nevritov v celicah Neuro2a

V tem raziskovalnem članku v reviji Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2021) je bilo predlagano, da izvleček plodov Emblica officinalis zavira nevrovnetje v celicah Neuro-2a in je tako lahko koristen pri nevrovnetnih boleznih.

6. Viri za celice Neuro-2a: Viri: protokoli, videoposnetki in drugo

V nadaljevanju so na voljo spletni viri o celicah Neuro-2a. Vključujejo protokol za gojenje in transfekcijo celic Neuro-2a.

Protokol transfekcije celic Neuro-2a: Neuro-2a je primeren gostitelj za transfekcijo. Ta povezava vas bo usmerila glede protokola transfekcije celične linije. Učinkovitost transfekcije Neuro 2a se razlikuje od reagenta do reagenta.

Naslednja povezava vsebuje protokol gojenja celic Neuro-2a.

Protokol gojenja celic Neuro-2a: Ta povezava vam bo pomagala spoznati protokol subkultiviranja celic nevro 2a.
Celice nevro-2a: Spletna stran vsebuje izčrpno znanje o medijih za celice Neuro-2a, gostoti setve ter protokolih za subkultiviranje in ravnanje s kriokonzerviranimi in proliferativnimi kulturami.

Reference

Lulevich, V., et al., Single-cell mechanics provides a sensitive and quantitative means for probing amyloid-beta peptide and neuronal cell interactions (Mehanika ene celice zagotavlja občutljivo in kvantitativno sredstvo za preizkušanje interakcij amiloid-beta peptida in nevronskih celic). Proc Natl Acad Sci U S A, 2010. 107(31): p. 13872-7.
You, Q., et al., Vloga miR-124 pri uravnavanju diferenciacije celic Neuro-2A, ki jo povzroča retinojska kislina. Neural Regen Res, 2020. 15(6): p. 1133-1139.
Su, X., et al., Retinoic acid receptor gamma is targeted by microRNA-124 and inhibits neurite outgrowth (Retinokislinski receptor gama je tarča mikroRNA-124 in zavira rast nevritov). Nevrofarmakologija, 2020. 163: p. 107657.
Yin, Z., et al., Izpostavljenost bisfenolu-A je povzročila nevrotoksičnost in je povezana s sinapsami in citoskeletom v celicah Neuro-2a. Toxicology in Vitro, 2020. 67: p. 104911.
Chen, L., et al., Gingko biloba extract (EGb) inhibits oxidative stress in neuro 2A cells overexpressing APPsw. BioMed research international, 2019. 2019.