Raztopina za ločevanje celic Accutase z EDTA in fenol rdečim – 100 ml

Accutase je sterilno filtrirana raztopina za ločevanje celic, pripravljena za takojšnjo uporabo, zasnovana kot nežna alternativa tripsinu/EDTA za ločevanje adhezivnih sesalskih celic s standardne plastične posode za tkivno kulturo in površin, prevlečenih z adhezivnim premazom. Združuje proteolitično in kolagenolitično encimsko aktivnost v uravnoteženi solni raztopini, da zagotovi učinkovito, a nadzorovano ločevanje, ohranja proteine na površini celic ter podpira visoko preživetje po prehodu in hitro ponovno pritrditev.

Formulacija Accutase temelji na Dulbeccovem fosfatnem pufru (DPBS) z EDTA in fenol rdečim kot vizualnim indikatorjem pH. Encimi niso živalskega ali bakterijskega izvora, zaradi česar je Accutase še posebej primeren za raziskave matičnih celic, postopke pri razvoju cepiv in vse aplikacije, kjer je treba zmanjšati onesnaževala živalskega ali mikrobiološkega izvora. Raztopina se pri 37 °C samodejno inhibira, zato po ločitvi ni potrebno nevtralizacijsko reagens ali medij, ki vsebuje serum – celice se lahko prenesejo neposredno v svež medij.

Ključne lastnosti

Pripravljena za uporabo 1x sterilno filtrirana tekočina – ni potrebno redčenje ali rekonstitucija
Kombinirana proteolitična in kolagenolitična encimska aktivnost za nežno disociacijo
Vsaka serija je standardizirana na določeno disociacijsko aktivnost za doslednost med serijami
Encimi niso živalskega ali bakterijskega izvora
Samodejna inhibicija pri 37 °C – ni potrebna nevtralizacijska raztopina
Formulirano v Dulbeccovem PBS z EDTA
Vključena fenol rdeča kot vizualni indikator pH
pH 6,8 – 7,8


Tipične uporabe
Accutase nežno razkroji široko paleto adhezivnih in občutljivih celic, vključno s človeškimi embrionalnimi izvorniškimi celicami (hESCs), človeškimi indukiranimi pluripotentnimi izvorniškimi celicami (iPSCs), nevralnimi izvorniškimi celicami, primarnimi nevroni in rutinsko gojenimi adhezivnimi linijami, kot so HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 in A549. Tipični primeri uporabe vključujejo:

Rutinsko subkultiviranje in pasiranje adhezivnih sesalskih celic
Nežno razcepjanje posameznih celic hESCs, iPSCs in drugih občutljivih linij
Priprava vzorcev za pretočno citometrijo in analizo FACS
Analizo markerjev na celični površini, kjer je pomembna integriteta epitopa
Testi migracije, proliferacije in apoptoze celic
Testi mirovanja s pomočjo pomanjkanja seruma in študije transfekcije onkogenov
Testi migracije tumorskih celic in celic nevralnega grebena
Povečanje proizvodnje v delovnih tokovih bioreaktorjev

Za rutinsko delo nanesite približno 10 ml Accutase na 75 cm2 površine kulture in inkubirajte 5–10 minut pri sobni temperaturi. Optimalni čas inkubacije je treba določiti za vsako celično linijo in ne sme presegati ene ure. Pred dodajanjem sperite celični sloj z raztopino soli brez Ca2+/Mg2+, kot je DPBS brez kalcija in magnezija, da odstranite ostanke seruma in dvovalentne katione.

Ravnanje in shranjevanje
Neodprto stekleničko shranjujte zamrznjeno pri -15 °C ali nižji temperaturi. Odtalite pri sobni temperaturi ali čez noč pri +2 °C do +8 °C. Accutase ne odtaljujte v vodni kopeli pri 37 °C, saj višje temperature zmanjšujejo encimsko aktivnost. Po odtalitvi se raztopina lahko shranjuje do 2 mesecev pri +2 °C do +8 °C; ne shranjujte pri sobni temperaturi. Reagenta pred uporabo ne segrevajte na 37 °C – dodajte ga neposredno na oprane celice pri sobni temperaturi. Za daljšo rok uporabnosti priporočamo razdelitev v enkratne odmerke, da se izognete ponavljajočim se ciklom odmrzovanja. Vedno delajte v aseptičnih pogojih.

Kakovost
Izdelano v skladu s strogimi standardi kakovosti. Vsaka serija Accutase je sterilno filtrirana in testirana na sterilnost, pH, videz in disociacijsko aktivnost, da se zagotovi dosledna, ponovljiva učinkovitost med serijami.

Specifikacije izdelka



Specifikacija
Podrobnosti



Vrsta izdelkaReagent za ločevanje/disociacijo celic
OblikaSterilno filtrirana tekočina, pripravljena za uporabo
Količina100 ml
Delovna koncentracija1x (pripravljeno za uporabo)
Encimska aktivnostKombinirana proteolitična in kolagenolitična
Izvor encimovNesestavljen iz sesalcev in bakterij
Puferski sistemDulbeccov PBS z EDTA
Indikator pHFenol rdeča
Območje pH6,8 – 7,8
VidezBistra, bledo rdeča do oranžna raztopina
Temperatura shranjevanja-15 °C ali manj
Stabilnost po odmrzovanjuDo 2 mesecev pri temperaturi od +2 °C do +8 °C
Priporočena količina za uporabo~10 ml na 75 cm2 površine kulture
Tipični čas inkubacije5–10 minut pri sobni temperaturi
Pogoji za pošiljanjeZamrznjeno na suhem ledu
Namen uporabeSamo za raziskovalne namene in nadaljnjo proizvodnjo



Formulacija (sestava na liter)



Sestavina
Koncentracija (mg/l)




Anorganske soli

Natrijev klorid (NaCl)8000,00
Dinatrijev hidrogenfosfat (Na2HPO4)1150,00
Kalijev klorid (KCl)200,00
Kalijev dihidrogenfosfat (KH2PO4)200,00

Druge sestavine

EDTA · 4Na (tetranatrijev EDTA)220,00
Fenol rdeča3,00
Lastniška mešanica encimov (proteolitična in kolagenolitična aktivnost)1x



Accutase je registrirana blagovna znamka podjetja Innovative Cell Technologies, Inc.