Ramosove celice - Raziskave o limfomih celic B: Ramosovih celic
Ramosove celice so celična linija limfocitov B, ki se pogosto uporablja v biomedicinskih raziskavah. Predvsem se uporabljajo v imunologiji in raziskavah raka. Raziskovalci te celice uporabljajo za ocenjevanje citotoksičnih zdravil in preučevanje površinskih antigenov celic B, mutacij in apoptotičnih mehanizmov.
Izvor in splošne lastnosti Ramosovih celic s
Razumevanje izvora celične linije in njenih bistvenih lastnosti ima ključno vlogo pri odločanju o njeni primernosti za vaše raziskave. Zato je priporočljivo, da te informacije temeljito ocenite, preden začnete kakršno koli delo z njo. V tem razdelku so zajeta naslednja pogosto zastavljena vprašanja: Kaj je celična linija raka Ramos? Kaj je celična linija Ramos CD19? Kaj je Ramosova celična linija CD20? Kakšen je izvor celic Ramos? Kateri so označevalci na celični liniji Ramos? Kakšna je velikost celic Ramos? Kakšna je morfologija celične linije Ramos?
- Ramosova celična linija je bila ustanovljena leta 1972. Te celice so bile pridobljene iz ascitične tekočine triletnega kavkaškega dečka z Burkittovim limfomom ameriškega tipa [1].
- Izražajo ključne označevalce celic B, vključno z imunoglobulinom M (IgM), CD19, CD20 in CD22.
- Ramosove celice so negativne na virus Epstein Bar. Vendar se lahko trajno spremenijo v Epstein-Barrov virus pozitivne celice.
- Te limfoblastne celice B imajo morfologijo okrogle oblike.
Ramosove modre celice proti Ramosovim celicam B
Ramosove modre celice in Ramosove celice B so človeške Burkittove limfomske celice. Obe sta negativni na virus Epstein Bar. Razlika med tema celicama je v tem, da modre celice Ramos izražajo poročevalski gen, ki ga inducira NF-κB/AP-1, imenovan SEAP (izločeni embrionalni alkalni fosfat), medtem ko bele celice Ramos tega ne izražajo.
Gojenje celic Ramos
Ta del članka je namenjen pridobivanju nujnih informacij o gojenju celic Ramos. Tu boste izvedeli: Kakšen je čas podvojitve celičnih linij? Kakšno je priporočeno gojišče? Kako gojite celice Ramos?
Ključne točke za gojenje celic Ramos
|
Čas podvojitve: |
Čas podvojitve celic Ramos je približno 20,4 ± 1,5 ure. Vendar lahko odstopa glede na zagotovljene pogoje gojenja celic. |
|
Prilepljene ali v suspenziji: |
Celice Ramos rastejo v suspenziji. |
|
Gostota celic: |
Optimalna gostota celic za celično linijo Ramos je 3 x105 celic/ml . Za subkultiviranje se suspendirane celice zberejo s centrifugiranjem. Celicam dodamo sveže gojišče in jih previdno resuspendiramo. Nato se celice prelijejo v novo bučko z gostoto 3 do 9 x105 celic/ml . |
|
Rastno gojišče: |
Za gojenje celic Ramos se uporablja RPMI 1640, dopolnjen z 10 % fetalnega govejega seruma, 2,1 mM stabilnega glutamina in 2,0 g/L NaHCO3. |
|
Pogoji rasti: |
Ramosova celična linija človeškega Burkittovega limfoma se hrani v vlažnem inkubatorju pri 5 % CO2 in temperaturi 37 °C. |
|
Shranjevanje: |
Zamrznjene celice Ramos hranimo pri temperaturi pod -150 stopinj Celzija ali v parni fazi tekočega dušika, da bi dlje časa zaščitili sposobnost preživetja celic. |
|
Postopek zamrzovanja in medij: |
CM-1 ali CM-ACF je priporočljivo sredstvo za zamrzovanje celic Ramos. Uporablja se počasen postopek zamrzovanja, ki omogoča postopno zniževanje temperature za 1 stopinjo Celzija na minuto. To počasno zamrzovanje ščiti celice pred kakršnim koli šokom in povečuje njihovo sposobnost preživetja. |
|
Postopek odtaljevanja: |
Za odmrzovanje zamrznjene celice40 do 60 sekund hranimo v predhodno ogreti vodni kopeli pri 37 °C, dokler ne ostane majhen ledeni skupek. Nato dodamo sveže gojišče in celice centrifugiramo, da odstranimo elemente zamrzovalnega gojišča. Pelet ponovno resuspendiramo in celice razporedimo v novo bučko z gojiščem. |
|
Raven biološke varnosti: |
Za vzdrževanje Epstein-Barr virus negativnih Ramosovih celičnih kultur je nujen laboratorij 1. stopnje biološke varnosti. Vendar se raven biološke varnosti premakne na 2, kadar se celice Ramos trajno spremenijo v pozitivne na virus Epstein-Barr. |
Ramos: Prednosti in omejitve
Tako kot druge celične linije imajo tudi celice Ramos svoje prednosti in omejitve. V tem razdelku bomo preučili nekatere pomembne, ki lahko pomembno vplivajo na njihovo uporabo v raziskavah.
Prednosti
- Celice Burkittovega limfoma: Ramosove celice so bile razvite iz bolnika z Burkittovim limfomom, zato so primeren celični model za preučevanje limfoidnih malignomov
- Enostavno gojenje: Ramosove celice je enostavno gojiti in vzdrževati v laboratoriju. Imajo preproste zahteve in pogoje za gojenje celic
Omejitve
- Model in vitro: Celice Ramos morda ne predstavljajo v celoti genetske kompleksnosti bolnikovih tumorjev, kar omejuje njihovo uporabnost. Poleg tega rezultati poskusov z uporabo celične linije Ramos morda ne odražajo v celoti pogojev in vivo, kar lahko povzroči težave pri prenosu
uporaba celic Ramos v raziskavah
Ramos ponuja obetavne aplikacije na biomedicinskem področju. Nekatere nujne uporabe celic Ramos v raziskavah vključujejo:
- Biologija limfoma: Ramosove celice se pogosto uporabljajo za preučevanje biologije limfoma. Uporabljajo se za raziskovanje genetskih in molekularnih dejavnikov, na katerih temeljijo limfoidni malignomi. Poleg tega raziskovalci z uporabo teh celic Burkittovega limfoma dobijo vpogled v začetek, napredovanje in heterogenost bolezni. Raziskujejo tudi genetske mutacije in signalne poti, kar lahko vodi k razvoju natančnejših diagnostičnih in terapevtskih pristopov. V študiji, izvedeni leta 2019, je bilo ugotovljeno, da zaviranje histonske acetiltransferaze GCN5 (General control non-depressible 5) zmanjšuje tumorigenečnost celic človeškega limfoma Burkitt (Ramos) prek prekinitve signalizacije BCR. Zato se GCN5 predlaga kot izvedljiva tarča za razvoj zdravljenja limfomov z zdravili [2].
- Pregledovanje in testiranje zdravil: Celična linija Ramos se pogosto uporablja za pregledovanje in testiranje zdravil. Raziskovalci ocenjujejo učinkovitost potencialnih terapevtskih spojin pri zaviranju razmnoževanja in rasti celic ter povzročanju celične smrti v limfomskih celicah. To pomaga prepoznati obetavne kandidate za zdravila in tako olajša razvoj ciljno usmerjenega zdravljenja bolnikov z limfomom. Raziskava je na primer pokazala, da metanolni izvleček kože, pulpe in semen plodov Annona zmerno, kloroformni izvleček pa močno vpliva na proliferacijo celic Ramosa. Tako je študija predlagala, da bi se lahko plodovi Annona izkazali za učinkovite pri preprečevanju in zdravljenju limfoma [3].
Ramosove celice za vaše raziskave
Publikacije s celicami Ramosa
V tem razdelku članka je navedenih nekaj zanimivih raziskovalnih publikacij s celično linijo Ramos:
Nepretrgana signalizacija CD 79b in CD 19 je potrebna za sposobnost celic B Burkittovega limfoma
Ta raziskava je bila objavljena v reviji The EMBO leta 2018. V študiji je bilo ugotovljeno, da celice B Ramos za svojo kondicijo in konkurenčno rast potrebujejo izražanje označevalcev CD19 in CD79b (komponenta BCR za signalizacijo Igβ).
V tej študiji, objavljeni v reviji Neoplasia (2021), so bile uporabljene celice Ramos in predlagano, da je domena kinaze mešane linije (MLKL) epigenetsko regulirana v celicah Burkittovega limfoma (Ramos). Tako je obetaven prognostični označevalec za uspešnost zdravljenja s terapijami, povezanimi z nekroptozo.
Fosforilacija PBK/TOPK Tyr74 s strani JAK2 spodbuja rast tumorjev limfoma Burkitt
Raziskovalni članek v reviji Cancer Letters (2022) kaže, da ima signalna os JAK2/TOPK/histon H3 ključno vlogo pri proliferaciji celičnih linij limfoma B in vitro.
Članek je bil objavljen leta 2020 v reviji Toxins. V študiji je bilo predlagano, da zdravljenje z verotoksinom-1 povzroči stres endoplazemskega retikuluma (ER) v Ramosovih celicah B. To privede do sprožitve apoptotičnega ali preživetvenega signaliziranja v limfomskih celičnih linijah.
Silimarin zavira izražanje genov Toll-like receptorja 8 in apoptozo v celični liniji raka Ramos
Ta študija v reviji Avicenna Journal of Phytomedicine (2020) poroča, da naravna spojina silimarin zavira izražanje TLR8 (Toll-like receptor 8) in apoptozo v celični liniji Ramos.
Viri za celično linijo Ramos: Ramosova skupina: protokoli, videoposnetki in drugo
V nadaljevanju je navedenih nekaj spletnih virov o celicah Ramos:
- Celična transfekcija celic Ramos: Ta dokument vam bo pomagal spoznati protokol za transfekcijo celične linije Ramos.
Naslednja povezava vsebuje protokol gojenja celic Ramos:
- Ramosove celice: Ta spletna stran vsebuje osnovne informacije o celični liniji Ramos. Vsebuje tudi protokol za subkultiviranje celic Ramos ter ravnanje s proliferacijskimi in kriokonzerviranimi kulturami. Poleg tega so na voljo tudi informacije o medijih za celice Ramos, času podvojitve in gostoti celic.
Ključni vpogledi v Ramosove celice: Pogosto zastavljena vprašanja
Reference
- Kerntke, C.G., Analiza organizacije in signalne zmogljivosti membranskega IgE med njegovo interakcijo s CD19 in CD23 v limfocitih B. 2021, Georg-August-Universität Göttingen.
- Farria, A.T., et al., Zaviranje GCN5 HAT zmanjša preživetje celic človeškega Burkittovega limfoma z zmanjšanjem izražanja tarčnih genov MYC in oviranjem signalnih poti BCR. Oncotarget, 2019. 10(56): p. 5847.
- Al-Shaya, H.M., et al., Phytochemical profile and antioxidation activity of annona fruit and its effect on lymphoma cell proliferation (Fitokemični profil in antioksidativna aktivnost plodov annone ter njihov vpliv na proliferacijo limfomskih celic). Food Science & Nutrition, 2020. 8(1): p. 58-68.