Celice NIH-3T3: Napredek pri študijah fibroblastov in aplikacijah celic NIH-3T3

Celična linija NIH-3T3, ki sta jo leta 1962 iz tkiva 17 dni starega zarodka miši Swiss Albino ustvarila Howard Green in George Todaro na Medicinski fakulteti Univerze v New Yorku, je postala temeljni vir v biomedicinskih raziskavah. Celice NIH-3T3, ki so prepoznane kot zelo dovzetne za nastanek žarišč levkemičnega virusa in sarkomskega virusa, služijo kot ključno orodje za številne znanstvene raziskave, vključno z virusnimi onkološkimi študijami, analizo izražanja genov in raziskovanjem dinamike celične rasti. Poimenovanje "3T3" odraža metodo gojenja celic in označuje "3-dnevni interval prenosa" z začetno gostoto naselitve 3 × 10^5 celic, kar poudarja standardizirane pogoje, v katerih so bile te celice prvič gojene in razširjene.

Različne morfologije in uporaba celic NIH-3T3

Ena od značilnih lastnosti celic NIH-3T3 je njihova morfološka prilagodljivost, ki se znatno spreminja glede na konfluenco kulture. Pri manjših gostotah imajo ti fibroblasti vretenasto, osamljeno celično strukturo, ki se razvije v goste, vrtinčaste vzorce, ko populacija doseže konfluenco. S povprečnim premerom približno 18 μm so celice NIH-3T3 vsestranski model za poglobljene študije celične biologije, od mehanizmov obnove tkiv do zapletenih poti uravnavanja celičnega cikla.

Informacije o gojenju

Švicarska miška Albino v laboratoriju.

Prednosti in slabosti uporabe celic NIH 3T3

Prednosti

• Učinkovitost transfekcije: Celice NIH 3T3 so znane po visoki stopnji transfekcije, zato so odlične za prehodne in stabilne študije izražanja genov ter so primerne za različne tehnike transfekcije.

• Uporabnost hranilne plasti: Zaradi sproščanja rastnih dejavnikov, ki spodbujajo rast celic, gojenih v skupni kulturi, te celice pogosto služijo kot podporni napajalni sloj za skupne kulture s celicami, kot so keratinociti in matične celice.

• Raziskavematičnih celic : NIH-3T3 celice so prednostna izbira pri raziskavah matičnih celic, saj inducirajo pluripotentnost brez genskega spreminjanja in zagotavljajo ugodno okolje za diferenciacijo matičnih celic.

• Stabilnost kulture: Celice NIH-3T3 so znane po svoji stabilnosti in nizki pogostosti spontane transformacije. Vendar pa se lahko pod določenimi pogoji ali po izpostavljenosti določenim onkogenom ali mutagenom celice NIH-3T3 spontano preoblikujejo. Ta transformacija lahko privede do pridobitve rakavih lastnosti, kot so nenadzorovana rast, izguba zaviranja stika in sposobnost tvorjenja tumorjev, ko se vbrizgajo v dovzetne gostitelje.

Slabosti

• Neskladna velikost celic: Podolgovata morfologija celic NIH-3T3, podobna vretenom, se lahko spreminja, kar otežuje analizo slik v testih.

• Občutljivost za okužbe: Te celice so nagnjene k okužbam z bakterijami in mikoplazmo, če se ne vzdržujejo v strogih aseptičnih pogojih, kar lahko vpliva na celovitost poskusa.

Raziskovalna uporaba celic NIH-3T3

• Študije transfekcije DNK: Celice NIH-3T3 so zaradi svoje robustnosti idealne za uvajanje in preučevanje delovanja različnih genov, kar se kaže v raziskavah, ki preučujejo beljakovine, kot je NAB2-STAT6, in njihove vloge v celičnih procesih.

• Celični testi: Njihova zanesljivost je razširjena na različne preskuse, vključno s preskusi viabilnosti, apoptoze in tvorbe žarišč, kar omogoča vpogled v celične odzive pod različnimi eksperimentalnimi pogoji.

• Raziskave celičnega cikla: Zaradi preproste manipulacije celičnega cikla s serumskimi koncentracijami je celična linija učinkovit model za preučevanje regulacije celičnega cikla in njegovih odstopanj v bolezenskih okoliščinah.

Izboljšajte svoje raziskave s celicami NIH-3T3

Poudarjanje ključnih študij, ki vključujejo fibroblastno celično linijo NIH 3T3

Celična linija NIH-3T3 je bila ključna v številnih raziskovalnih projektih, ki so zajemali različne vidike celične biologije. V nadaljevanju so predstavljene nekatere pomembne študije, v katerih so bile uporabljene te celice:

• Raziskovanje fuzijskega proteina NAB2-STAT6: Ta študija, objavljena v reviji Biochemical and Biophysical Research Communications, obravnava vpliv fuzijskega proteina NAB2-STAT6 na celice NIH-3T3, zlasti njegovo vlogo pri pospeševanju rasti in migracije celic z regulacijo EGR-1
• Raziskovanje APOBEC3 in virusa Murine Leukemia Virus: Ta raziskava v reviji Virology preučuje hipermutacijo virusa AKV mišje levkemije v celicah NIH-3T3, ki izražajo mišji gen APOBEC3
• Ocenjevanje anti-metastatičnega potenciala epigenetskih zdravil: Ta študija v reviji Oncotargets and Therapy ocenjuje antimetastatične učinke hidralazina in valprojske kisline na celice NIH-3T3, transformirane z RAS
• Vpliv bajkaleina na proliferacijo in sintezo kolagena v NIH-3T3: Ta raziskava uporablja celice NIH-3T3, da bi raziskala, kako bajkalein vpliva na proliferacijo celic in proizvodnjo kolagena z modulacijo osi miR-9/insulinu podobnega rastnega faktorja-1
• Preučevanje izčrpavanja riboflavina in tumorigeneze: Ta študija predstavlja ugotovitve o tem, kako pomanjkanje riboflavina v celicah NIH-3T3 prispeva k tumorigenezi s spodbujanjem celične proliferacije in disregulacijo genov celičnega cikla

Bistveni viri za raziskave celic NIH-3T3

Raziskovalcem, ki jih zanima delo s celicami NIH-3T3, so na voljo različni viri, ki pomagajo pri gojenju in eksperimentalnih protokolih:

• Oblikovanje sferoidov v celicah NIH-3T3: V tem videoposnetku je podrobno opisano oblikovanje sferoidov, tehnike 3D gojenja celic, ki združuje celice NIH-3T3 v skupke, kar omogoča bolj fiziološko ustrezen model za študije
• Spremljanje rasti celic NIH-3T3: V tem videoposnetku je s pomočjo sistema za slikanje živih celic JuLI Br zajeta dinamika rasti celic NIH-3T3 v 65 urah, kar prikazuje proliferacijo celic v realnem času

Namen teh virov je podpreti vaša raziskovalna prizadevanja s celicami NIH-3T3 ter zagotoviti podlago za uspešne poskuse in odkritja.

Reference

1. Rahimi, A.M., M. Cai in S. Hoyer-Fender, Heterogenost celične linije fibroblastov NIH3T3. Cells, 2022. 11(17): p. 2677.
2. Leibiger, C. in drugi, Prva molekularna citogenetska karakterizacija celične linije NIH 3T3 z visoko ločljivostjo z večbarvnim pasovnim označevanjem. Journal of Histochemistry & Cytochemistry, 2013. 61(4): p. 306-312.
3. Wang, H.-X., et al., Comparative analysis of different feeder layers with 3T3 fibroblasts for culturing rabbits limbal stem cells (Primerjalna analiza različnih napajalnih plasti s fibroblasti 3T3 za gojenje limbalnih matičnih celic zajcev ). International Journal of Ophthalmology, 2017. 10(7): p. 1021.
4. Wang, Z., et al., Differentiation of neuronal cells from NIH/3T3 fibroblasts under defined conditions (Diferenciacija nevronskih celic iz fibroblastov NIH/3T3 pod določenimi pogoji ). Development, growth & differentiation, 2011. 53(3): p. 357-365.
5. Park, Y.-S., et al., NAB2-STAT6 fusion protein mediates cell proliferation and oncogenic progression via EGR-1 regulation. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2020. 526(2): p. 287-292.
6. Mattsson, M., Expression of the Sloppymerase™ in NIH/3T3 Cells (Izražanje Sloppymerase™ v celicah NIH/3T3): Sympymerase: Raziskovanje vsestranskosti fuzijske polimeraze, nagnjene k napakam. 2021.
7. Sahinturk, V., et al., Acrylamide exerts its cytotoxicity in NIH/3T3 fibroblast cells by apoptosis. Toksikologija in industrijsko zdravje, 2018. 34(7): p. 481-489.
8. Lusi, E. A. in F. Caicci, Discovery of the First Human Retro-Giant Virus (Odkritje prvega človeškega retro-živalskega virusa): Opis njegove morfologije, retrovirusne kinaze in sposobnosti povzročanja tumorjev pri miših. bioRxiv, 2019: str. 851063.
9. Endo, M. in drugi,SignalizacijaE2F1-Ror2posreduje usklajeno regulacijo transkripcije za spodbujanje prehoda med fazama G1/Sv fibroblastih NIH/3T3,stimuliranihz bFGF. The FASEB Journal, 2020. 34(2): p. 3413-3428.
10. Long, L., et al., Riboflavin Depletion Promotes Tumorigenesis in HEK293T and NIH3T3 Cells by Sustaining Cell Proliferation and Regulating Cell Cycle-Related Gene Transcription. The Journal of Nutrition, 2018. 148(6): p. 834-843.